摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一部分 综述 | 第14-24页 |
1 线粒体在卵母细胞成熟和胚胎发育过程中的作用 | 第15-18页 |
1.1 线粒体的结构以及在卵母细胞中的分布 | 第15页 |
1.2 mtDNA与卵母细胞发育潜能的关系 | 第15-16页 |
1.3 卵胞质ATP含量对卵母细胞和胚胎的影响 | 第16-17页 |
1.4 线粒体损伤与卵母细胞老化的关系 | 第17页 |
1.5 线粒体的钙稳态调节 | 第17-18页 |
2 线粒体的生物合成调节机制 | 第18-19页 |
3 重复排卵对雌性哺乳动物生殖功能的影响 | 第19-20页 |
3.1 重复排卵对卵母细胞数量和质量的影响 | 第19-20页 |
3.2 重复超排引起氧化应激 | 第20页 |
4 表儿茶素的生物学功能 | 第20-22页 |
4.1 抗氧化、抗辐射、抗炎、抗癌、抗衰老和抗凋亡等作用 | 第21页 |
4.2 促线粒体生物合成 | 第21-22页 |
4.3 表儿茶素的安全性 | 第22页 |
5 研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二部分 试验部分 | 第24-56页 |
第一章 EC对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 | 第25-34页 |
1 材料与方法 | 第25-28页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
1.4 方法 | 第27-28页 |
1.4.1 小鼠COCs的收集、体外成熟及孤雌激活 | 第27页 |
1.4.2 自然排卵周期卵母细胞的收集 | 第27页 |
1.4.3 标准品的制备 | 第27-28页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR测定mtDNA | 第28页 |
1.5 试验设计 | 第28页 |
1.6 统计方法 | 第28页 |
2 结果 | 第28-32页 |
2.1 卵母细胞mtDNA拷贝数 | 第28-30页 |
2.2 EC对小鼠卵母细胞极体排出率的影响 | 第30-31页 |
2.3 EC对小鼠卵母细胞孤雌激活胚胎发育的影响 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-34页 |
第二章 表儿茶素处理小鼠方法的探索 | 第34-43页 |
1 材料与方法 | 第34-37页 |
1.1 实验动物 | 第34页 |
1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
1.3 主要试剂 | 第35页 |
1.4 方法 | 第35-37页 |
1.4.1 收集MⅡ期卵母细胞并统计获卵数 | 第35-36页 |
1.4.2 mtDNA拷贝数检测 | 第36页 |
1.4.3 荧光定量PCR | 第36-37页 |
1.5 试验设计 | 第37页 |
1.6 统计方法 | 第37页 |
2 结果 | 第37-41页 |
2.1 注射法和灌胃法给药对小鼠卵母细胞mtDNA拷贝数的影响 | 第37-38页 |
2.2 注射EC对小鼠卵巢PGC-1 α、Tfam基因表达的影响 | 第38-39页 |
2.3 不同给药天数对小鼠卵母细胞mtDNA拷贝数的影响 | 第39-40页 |
2.4 注射EC对小鼠超排获卵数的影响 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
4 小结 | 第42-43页 |
第三章 注射表儿茶素对多次超排小鼠卵母细胞发育潜能的影响 | 第43-56页 |
1 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 实验动物 | 第44页 |
1.2 主要仪器 | 第44页 |
1.3 主要试剂 | 第44页 |
1.4 方法 | 第44-46页 |
1.4.1 试验动物给药方法 | 第44-45页 |
1.4.2 收集2-cell阶段胚胎并统计胚胎数 | 第45页 |
1.4.3 小鼠胚胎mtDNA拷贝数检测 | 第45页 |
1.4.4 小鼠胚胎体外培养 | 第45页 |
1.4.5 小鼠囊胚细胞凋亡率的检测 | 第45页 |
1.4.6 卵巢组织抗氧化酶基因表达水平的检测 | 第45-46页 |
1.4.7 卵巢组织GSH含量的检测 | 第46页 |
1.5 试验设计 | 第46-47页 |
1.6 统计方法 | 第47页 |
2 结果 | 第47-53页 |
2.1 超排期间注射EC对多次超排小鼠获胚胎数的影响 | 第47-48页 |
2.2 超排期间注射EC对多次超排小鼠胚胎mtDNA拷贝数的影响 | 第48-49页 |
2.3 超排期间注射EC对多次超排小鼠胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
2.4 超排期间注射EC对多次超排小鼠囊胚细胞凋亡的影响 | 第50页 |
2.5 超排期间注射EC对多次超排小鼠卵巢抗氧化能力的影响 | 第50-53页 |
2.5.1 卵巢抗氧化酶基因的相对表达情况 | 第50-52页 |
2.5.2 卵巢GSH含量的变化 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
4 小结 | 第55-56页 |
总结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录 | 第66-67页 |
图片与说明 | 第67-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |