| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-23页 |
| 1 植物休眠 | 第15-18页 |
| 1.1 花芽的休眠 | 第15-16页 |
| 1.2 影响花芽休眠的因素 | 第16-17页 |
| 1.3 响应低温诱导的休眠相关基因 | 第17-18页 |
| 2 AP2/ERF转录因子研究进展 | 第18-21页 |
| 2.1 植物AP2/ERF家族转录因子的分类 | 第18-19页 |
| 2.2 特异性结合DREB和ERF亚家族蛋白 | 第19页 |
| 2.3 AP2/ERF类转录因子在植物中的功能研究 | 第19-21页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 研究论文 | 第23-76页 |
| 第一章 中国樱桃AP2/ERF类转录因子生物信息学分析 | 第23-34页 |
| 1 前言 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24页 |
| 2.1 基因序列的生物信息学分析 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-32页 |
| 3.1 中国樱桃AP2/ERFs序列生物信息学分析 | 第24-30页 |
| 3.2 中国樱桃AP2/ERFs氨基酸序列保守基序分析 | 第30-31页 |
| 3.3 中国樱桃ERF转录因子保守结构域系统进化分析 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 冷积累过程对中国樱桃AP2/ERF转录因子的表达影响 | 第34-50页 |
| 1 前言 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 2.1.2 相关试剂盒及酶试剂 | 第35页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-39页 |
| 2.2.1 RNA的提取和纯化 | 第35-37页 |
| 2.2.2 RNA的反转录 | 第37页 |
| 2.2.3 定量引物的设计 | 第37-39页 |
| 2.2.4 中国樱桃ERF转录因子表达分析 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.1 中国樱桃总RNA提取与质量分析 | 第39-40页 |
| 3.2 冷积累过程对中国樱桃AP2/ERFs转录因子的表达影响 | 第40-44页 |
| 4 讨论 | 第44-50页 |
| 第三章 中国樱桃PpcERF1基因的表达分析 | 第50-67页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-59页 |
| 2.1 材料 | 第51-53页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 2.1.2 供菌体及载体 | 第51-52页 |
| 2.1.3 主要试剂及相关培养基的配制 | 第52-53页 |
| 2.1.3.1 培养基配制 | 第52页 |
| 2.1.3.2 渗透液配制 | 第52-53页 |
| 2.1.3.3 激素配制 | 第53页 |
| 2.1.3.4 相关试剂盒及酶试剂 | 第53页 |
| 2.2 实验方法 | 第53-59页 |
| 2.2.1 拟南芥表型观察 | 第53页 |
| 2.2.2 RNA的提取与纯化 | 第53页 |
| 2.2.3 cDNA单链合成 | 第53-54页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第54页 |
| 2.2.5 目的基因PCR扩增和产物回收检测 | 第54-55页 |
| 2.2.6 PCR回收产物连接T载体 | 第55页 |
| 2.2.7 连接产物转化感受态 | 第55页 |
| 2.2.8 菌落验证及测序 | 第55页 |
| 2.2.9 提取质粒 | 第55-56页 |
| 2.2.10 双酶切 | 第56页 |
| 2.2.11 酶切及产物回收 | 第56-57页 |
| 2.2.12 T4连接酶连接 | 第57页 |
| 2.2.13 农杆菌转化 | 第57页 |
| 2.2.14 菌落PCR验证 | 第57页 |
| 2.2.15 PpcERF1基因启动子瞬时表达分析 | 第57-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-65页 |
| 3.1 PpcERF1转基因拟南芥对种子萌发的影响 | 第59-60页 |
| 3.2 PpcERF1转基因拟南芥对开花时间的影响 | 第60-61页 |
| 3.3 中国樱桃PpcERF1基因启动子克隆 | 第61-63页 |
| 3.3.1 中国樱桃总RNA提取 | 第61页 |
| 3.3.2 PpcERF基因启动子的cDNA全长克隆 | 第61-62页 |
| 3.3.3 大肠杆菌转化及菌落验证 | 第62页 |
| 3.3.4 测序结果分析 | 第62-63页 |
| 3.4 PpcERF1启动子对低温诱导的响应 | 第63-65页 |
| 3.4.1 农杆菌转化及验证 | 第63页 |
| 3.4.2 双荧光素酶系统检测启动子表达特性 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 早花拟南芥转基因植株的转录组测序分析 | 第67-76页 |
| 1 前言 | 第67-68页 |
| 2. 材料与方法 | 第68-69页 |
| 2.1 试验材料 | 第68页 |
| 2.2 试验方法 | 第68-69页 |
| 2.2.1 转录组测序 | 第68页 |
| 2.2.2 实时荧光定量PCR引物设计 | 第68页 |
| 2.2.3 转录组测序基因定量验证分析 | 第68-69页 |
| 3. 结果与分析 | 第69-74页 |
| 3.1 整体测序质量 | 第69-70页 |
| 3.2 测序随机性分析 | 第70页 |
| 3.3 基因覆盖度分析 | 第70-71页 |
| 3.4 差异基因的RNA-Seq表达量和qPCR验证分析 | 第71-74页 |
| 3.5 拟南芥不同生长状态下相关基因的表达 | 第74页 |
| 4. 讨论 | 第74-76页 |
| 结果与展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 附录 | 第91-95页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
