中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
1.1 国内外研究现状 | 第10-15页 |
1.1.1 肿瘤细胞的能量代谢重编程 | 第10-12页 |
1.1.2 肿瘤微环境与肿瘤细胞脂代谢调控 | 第12-13页 |
1.1.3 YY1与肿瘤发生发展 | 第13-14页 |
1.1.4 YY1与脂质合成代谢 | 第14-15页 |
1.2 本文的研究目的和研究内容 | 第15-18页 |
1.2.1 本文研究目的 | 第15-16页 |
1.2.2 本文的主要研究内容 | 第16-18页 |
2 YY1对低氧条件下肝癌细胞脂质代谢的影响 | 第18-28页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 细胞材料 | 第18页 |
2.1.2 主要药品、试剂 | 第18页 |
2.1.3 主要的试验仪器设备 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 HepG2细胞的培养 | 第19-21页 |
2.2.2 质粒转染实验 | 第21-22页 |
2.2.4 Nile Red染色 | 第22页 |
2.2.5 TG检测 | 第22-24页 |
2.2.6 低氧的实现 | 第24-25页 |
2.3 实验结果 | 第25-28页 |
2.3.1 YY1对脂质积累的影响 | 第25-26页 |
2.3.2 YY1对甘油三酯积累的影响 | 第26-28页 |
3 YY1对低氧条件下脂质代谢因子的影响 | 第28-46页 |
3.1 实验材料 | 第28-30页 |
3.1.1 实验细胞 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
3.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-42页 |
3.2.1 HepG2细胞脂质代谢相关因子mRNA的检测 | 第30-32页 |
3.2.2 HepG2细胞脂质代谢相关因子蛋白表达水平的检测 | 第32-36页 |
3.2.3 shMCAD,shLCAD质粒构建 | 第36-41页 |
3.2.4 Nile Red染色 | 第41-42页 |
3.2.5 TG检测 | 第42页 |
3.2.6 实验结果的分析 | 第42页 |
3.3 实验结果 | 第42-46页 |
3.3.1 YY1敲减对肝癌细胞脂质代谢相关因子的影响 | 第42-44页 |
3.3.2 YY1调控脂质代谢因子MCAD、LCAD对脂质代谢的影响 | 第44-46页 |
4 YY1对PGC-1β的MRNA与蛋白表达的影响 | 第46-52页 |
4.1 实验材料 | 第46-48页 |
4.1.1 实验细胞 | 第46页 |
4.1.2 实验试剂 | 第46-47页 |
4.1.3 实验仪器 | 第47-48页 |
4.2 实验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 PGC-1β质粒的构建 | 第48页 |
4.2.2 YY1敲减对PGC-1β的mRNA表达的影响 | 第48页 |
4.2.3 YY1敲减对PGC-1β的蛋白表达的影响 | 第48页 |
4.2.4 Nile Red染色 | 第48-49页 |
4.2.5 TG检测 | 第49页 |
4.3 实验结果 | 第49-52页 |
4.3.1 YY1敲减对PGC-1β的mRNA与蛋白表达的影响 | 第49页 |
4.3.2 YY1通过PGC-1β对低氧条件下MCAD、LCAD表达以及脂质代谢的影响 | 第49-52页 |
5 YY1对PGC-1β的调控机制研究 | 第52-58页 |
5.1 实验材料 | 第52-53页 |
5.1.1 实验细胞 | 第52页 |
5.1.2 实验试剂 | 第52页 |
5.1.3 实验仪器 | 第52-53页 |
5.2 实验方法 | 第53页 |
5.2.1 PGC-1βmRNA的测定 | 第53页 |
5.3 实验结果 | 第53-58页 |
5.3.1 YY1对PGC-1β的mRNA表达影响 | 第53-55页 |
5.3.2 YY1调控PGC-1β的非HIF依赖性考察 | 第55-58页 |
6 低氧条件下YY1对PGC-1β调控的分子机制研究 | 第58-74页 |
6.1 实验材料 | 第58-59页 |
6.1.1 实验细胞 | 第58页 |
6.1.2 实验试剂 | 第58页 |
6.1.3 实验仪器 | 第58-59页 |
6.2 实验方法 | 第59-69页 |
6.2.1 双荧光素酶报告基因检测 | 第59-64页 |
6.2.2 染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第64-67页 |
6.2.3 点变异 | 第67-69页 |
6.3 实验结果 | 第69-74页 |
6.3.1 YY1对PGC-1β的转录活性调控 | 第69-70页 |
6.3.2 YY1对PGC-1β转录区域的结合 | 第70-71页 |
6.3.3 YY1对PGC-1β调控的直接位点的确定 | 第71-74页 |
7 讨论与展望 | 第74-76页 |
7.1 讨论 | 第74-75页 |
7.2 展望 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
附录 | 第82页 |