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YY1对低氧环境下肝癌细胞脂质代谢的分子调控机制研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
1 绪论第10-18页
    1.1 国内外研究现状第10-15页
        1.1.1 肿瘤细胞的能量代谢重编程第10-12页
        1.1.2 肿瘤微环境与肿瘤细胞脂代谢调控第12-13页
        1.1.3 YY1与肿瘤发生发展第13-14页
        1.1.4 YY1与脂质合成代谢第14-15页
    1.2 本文的研究目的和研究内容第15-18页
        1.2.1 本文研究目的第15-16页
        1.2.2 本文的主要研究内容第16-18页
2 YY1对低氧条件下肝癌细胞脂质代谢的影响第18-28页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 细胞材料第18页
        2.1.2 主要药品、试剂第18页
        2.1.3 主要的试验仪器设备第18-19页
    2.2 实验方法第19-25页
        2.2.1 HepG2细胞的培养第19-21页
        2.2.2 质粒转染实验第21-22页
        2.2.4 Nile Red染色第22页
        2.2.5 TG检测第22-24页
        2.2.6 低氧的实现第24-25页
    2.3 实验结果第25-28页
        2.3.1 YY1对脂质积累的影响第25-26页
        2.3.2 YY1对甘油三酯积累的影响第26-28页
3 YY1对低氧条件下脂质代谢因子的影响第28-46页
    3.1 实验材料第28-30页
        3.1.1 实验细胞第28页
        3.1.2 实验试剂第28-29页
        3.1.3 实验仪器第29-30页
    3.2 实验方法第30-42页
        3.2.1 HepG2细胞脂质代谢相关因子mRNA的检测第30-32页
        3.2.2 HepG2细胞脂质代谢相关因子蛋白表达水平的检测第32-36页
        3.2.3 shMCAD,shLCAD质粒构建第36-41页
        3.2.4 Nile Red染色第41-42页
        3.2.5 TG检测第42页
        3.2.6 实验结果的分析第42页
    3.3 实验结果第42-46页
        3.3.1 YY1敲减对肝癌细胞脂质代谢相关因子的影响第42-44页
        3.3.2 YY1调控脂质代谢因子MCAD、LCAD对脂质代谢的影响第44-46页
4 YY1对PGC-1β的MRNA与蛋白表达的影响第46-52页
    4.1 实验材料第46-48页
        4.1.1 实验细胞第46页
        4.1.2 实验试剂第46-47页
        4.1.3 实验仪器第47-48页
    4.2 实验方法第48-49页
        4.2.1 PGC-1β质粒的构建第48页
        4.2.2 YY1敲减对PGC-1β的mRNA表达的影响第48页
        4.2.3 YY1敲减对PGC-1β的蛋白表达的影响第48页
        4.2.4 Nile Red染色第48-49页
        4.2.5 TG检测第49页
    4.3 实验结果第49-52页
        4.3.1 YY1敲减对PGC-1β的mRNA与蛋白表达的影响第49页
        4.3.2 YY1通过PGC-1β对低氧条件下MCAD、LCAD表达以及脂质代谢的影响第49-52页
5 YY1对PGC-1β的调控机制研究第52-58页
    5.1 实验材料第52-53页
        5.1.1 实验细胞第52页
        5.1.2 实验试剂第52页
        5.1.3 实验仪器第52-53页
    5.2 实验方法第53页
        5.2.1 PGC-1βmRNA的测定第53页
    5.3 实验结果第53-58页
        5.3.1 YY1对PGC-1β的mRNA表达影响第53-55页
        5.3.2 YY1调控PGC-1β的非HIF依赖性考察第55-58页
6 低氧条件下YY1对PGC-1β调控的分子机制研究第58-74页
    6.1 实验材料第58-59页
        6.1.1 实验细胞第58页
        6.1.2 实验试剂第58页
        6.1.3 实验仪器第58-59页
    6.2 实验方法第59-69页
        6.2.1 双荧光素酶报告基因检测第59-64页
        6.2.2 染色质免疫共沉淀(CHIP)第64-67页
        6.2.3 点变异第67-69页
    6.3 实验结果第69-74页
        6.3.1 YY1对PGC-1β的转录活性调控第69-70页
        6.3.2 YY1对PGC-1β转录区域的结合第70-71页
        6.3.3 YY1对PGC-1β调控的直接位点的确定第71-74页
7 讨论与展望第74-76页
    7.1 讨论第74-75页
    7.2 展望第75-76页
致谢第76-78页
参考文献第78-82页
附录第82页

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