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番茄SlRCHY3基因的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略字母表第11-13页
1 绪论第13-21页
    1.1 锌指蛋白的背景第13页
    1.2 锌指蛋白的组成和分类第13页
    1.3 锌指蛋白的结构第13-14页
    1.4 锌指蛋白在植物中的功能第14-18页
        1.4.1 C_2H_2型锌指蛋白研究进展第14-15页
        1.4.2 C_3HC_4型(RING型)锌指蛋白研究进展第15-18页
    1.5 课题的提出与研究意义第18页
    1.6 课题研究内容和技术路线第18-19页
        1.6.1 课题研究的主要内容第18-19页
        1.6.2 课题的技术路线第19页
    1.7 课题的创新点第19-20页
    1.8 本章总结第20-21页
2 番茄锌指蛋白SlRCHY3基因的生物信息学分析第21-29页
    2.1 材料与方法第21-22页
        2.1.1 生物信息软件和数据库第21-22页
        2.1.2 SlRCHY3蛋白一级结构分析第22页
        2.1.3 SlRCHY3蛋白的理化性质分析第22页
        2.1.4 SlRCHY3基因的上游启动子预测分析第22页
        2.1.5 SlRCHY3的氨基酸序列比对分析第22页
        2.1.6 SlRCHY3基因的进化树分析第22页
    2.2 结果与分析第22-28页
        2.2.1 SlRCHY3蛋白一级结构第22-24页
        2.2.2 SlRCHY3蛋白的理化性质第24页
        2.2.3 SlRCHY3基因启动子第24-26页
        2.2.4 SlRCHY3基因的氨基酸序列比对第26页
        2.2.5 SlRCHY3基因的进化树第26-28页
    2.3 本章讨论第28页
    2.4 本章小结第28-29页
3 番茄中锌指蛋白SlRCHY3基因表达模式分析第29-35页
    3.1 材料与方法第29-31页
        3.1.1 植物材料第29页
        3.1.2 植物样品收取第29页
        3.1.3 RNA的提取第29-30页
        3.1.4 cDNA的合成第30页
        3.1.5 定量第30-31页
    3.2 仪器与设备第31页
    3.3 试剂第31-32页
    3.4 结果与分析第32-34页
        3.4.1 SlRCHY3基因在AC++各个组织和器官中的表达模式第32-33页
        3.4.2 SlRCHY3基因在AC、Nr、rin果实中的表达模式第33-34页
    3.5 本章讨论第34页
    3.6 本章小结第34-35页
4 SlRCHY3基因的克隆第35-47页
    4.1 实验材料和方法第35-40页
        4.1.1 实验材料第35页
        4.1.2 大肠杆菌感受态的制备方法第35-36页
        4.1.3 PCR引物的设计方法第36页
        4.1.4 目的片段的扩增方法第36页
        4.1.5 电泳检测的方法第36-37页
        4.1.6 PCR产物的纯化方法第37-38页
        4.1.7 连接T载体方法第38页
        4.1.8 将连接产物转化到大肠杆菌的方法第38-39页
        4.1.9 PCR产物验证方法第39-40页
    4.2 实验仪器和设备第40页
    4.3 实验所需试剂和培养基第40-44页
    4.4 本章结果与分析第44-45页
        4.4.1 SlRCHY3基因的 扩增引物第44页
        4.4.2 PCR验证片段第44页
        4.4.3 测序结果第44-45页
    4.5 本章小结第45-47页
5 SlRCHY3超表达载体的构建和转基因番茄的培育第47-55页
    5.1 材料与方法第47-52页
        5.1.1 构建超表达SlRCHY3基因的终载体第47-48页
        5.1.2 SlRCHY3-pBIN121转化到农杆菌中第48-49页
        5.1.3 含有SlRCHY3-pBIN121的农杆菌侵染子叶第49-50页
        5.1.4 转基因番茄的培育及鉴定第50-52页
    5.2 实验仪器和设备第52页
    5.3 实验所需试剂和培养基第52页
    5.4 结果与分析第52-54页
        5.4.1 构建超表达SlRCHY3基因的终载体第52页
        5.4.2 SlRCHY3转基因苗的培育第52-53页
        5.4.3 转基因苗阳性鉴定第53-54页
        5.4.4 转基因苗效率鉴定第54页
    5.5 本章小结第54-55页
6 SlRCHY3基因功能的研究第55-63页
    6.1 材料与方法第55-56页
        6.1.1 SlRCHY3转基因株系叶片衰老实验方法第55-56页
        6.1.2 转基因SlRCHY3番茄根的发育的实验方法第56页
    6.2 实验仪器和设备第56页
    6.3 实验所需试剂和培养基第56页
    6.4 结果与分析第56-60页
        6.4.1 超表达SlRCHY3基因延缓叶片衰老第56-59页
        6.4.2 超表达SlRCHY3基因影响番茄根的发育第59-60页
    6.5 本章讨论第60-61页
        6.5.1 SlRCHY3基因在番茄叶片衰老中的讨论第60-61页
        6.5.2 SlRCHY3基因在番茄根发育的讨论第61页
    6.6 本章小结第61-63页
7 SlRCHY3基因在非生物胁迫和激素的研究第63-71页
    7.1 材料与方法第63-65页
        7.1.1 激素及非生物胁迫处理AC幼苗后SlRCHY3基因表达模式第63-64页
        7.1.2 盐胁迫处理方法第64页
        7.1.3 脱水处理方法第64-65页
    7.2 实验仪器和设备第65页
    7.3 实验试剂和培养基第65页
    7.4 实验结果第65-69页
        7.4.1 激素及非生物胁迫处理AC幼苗后SlRCHY3基因表达模式第65-67页
        7.4.2 超表达SlRCHY3基因减弱对盐的抗性第67-68页
        7.4.3 超表达SlRCHY3基因减弱了干旱胁迫的抗性第68-69页
    7.5 本章讨论第69-70页
        7.5.1 SlRCHY3基因对盐胁迫的响应的讨论第69-70页
        7.5.2 SlRCHY3基因对干旱胁迫的响应的讨论第70页
    7.6 本章小结第70-71页
8 结论与展望第71-73页
    8.1 主要结论第71页
    8.2 后续展望第71-73页
致谢第73-75页
参考文献第75-81页
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录第81页

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