| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1. 引言 | 第17-34页 |
| 1.1 癌症 | 第17-21页 |
| 1.1.1 癌症概述 | 第17页 |
| 1.1.2 癌症特征 | 第17-20页 |
| 1.1.3 乳腺癌 | 第20-21页 |
| 1.2 癌症微环境 | 第21-25页 |
| 1.2.1 癌症微环境概述 | 第21-22页 |
| 1.2.2 癌症干细胞 | 第22-23页 |
| 1.2.3 内皮细胞 | 第23页 |
| 1.2.4 免疫细胞 | 第23-24页 |
| 1.2.5 成纤维细胞 | 第24页 |
| 1.2.6 癌症微环境信号通路 | 第24-25页 |
| 1.3 癌症转移 | 第25-27页 |
| 1.3.1 癌症转移概述 | 第25-26页 |
| 1.3.2 癌症转移机制 | 第26页 |
| 1.3.3 癌症转移与上皮细胞间质化 | 第26-27页 |
| 1.4 PI3K信号通路 | 第27-29页 |
| 1.4.1 PI3K信号通路概述 | 第27页 |
| 1.4.2 PI3K信号通路机制 | 第27-28页 |
| 1.4.3 PI3K信号通路与癌症 | 第28-29页 |
| 1.5 Wnt信号通路 | 第29-31页 |
| 1.5.1 Wnt信号通路概述 | 第29页 |
| 1.5.2 经典Wnt信号通路机制 | 第29-30页 |
| 1.5.3 Wnt信号通路与癌症 | 第30-31页 |
| 1.6 胞外体 | 第31-33页 |
| 1.6.1 胞外体概述 | 第31-32页 |
| 1.6.2 胞外体形成机制 | 第32页 |
| 1.6.3 胞外体与癌症 | 第32-33页 |
| 1.7 本研究出发点 | 第33-34页 |
| 2. 材料与方法 | 第34-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-38页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第34页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第34页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.4 组织芯片 | 第35页 |
| 2.1.5 实验仪器设备 | 第35-36页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第36页 |
| 2.1.7 实验所用抗体 | 第36-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-54页 |
| 2.2.1 细胞复苏、传代及冻存 | 第38-39页 |
| 2.2.2 蛋白提取 | 第39页 |
| 2.2.3 Western Blot | 第39-41页 |
| 2.2.4 细胞增殖检测 | 第41页 |
| 2.2.5 平板克隆形成实验 | 第41页 |
| 2.2.6 Matrigel细胞3D培养 | 第41页 |
| 2.2.7 细胞划痕愈合实验 | 第41-42页 |
| 2.2.8 Transwell细胞迁移实验 | 第42页 |
| 2.2.9 Transwell细胞侵袭实验 | 第42页 |
| 2.2.10 条件培养基(Conditioned Medium)的制备 | 第42页 |
| 2.2.11 ELISA检测细胞上清 | 第42-43页 |
| 2.2.12 基因表达数据库分析 | 第43页 |
| 2.2.13 免疫组化 | 第43-44页 |
| 2.2.14 激光共聚焦成像 | 第44页 |
| 2.2.15 胶原凝胶收缩实验 | 第44-45页 |
| 2.2.16 流式细胞术 | 第45-46页 |
| 2.2.17 胞外体提取 | 第46-47页 |
| 2.2.18 胞外体粒径分析 | 第47页 |
| 2.2.19 RNA的提取 | 第47页 |
| 2.2.20 反转录PCR | 第47-48页 |
| 2.2.21 半定量PCR | 第48-49页 |
| 2.2.22 核酸凝胶电泳 | 第49页 |
| 2.2.23 定量PCR | 第49-50页 |
| 2.2.24 质粒构建 | 第50-51页 |
| 2.2.25 制备大肠杆菌DH5 α感受态细胞 | 第51-52页 |
| 2.2.26 感受态细胞转化 | 第52页 |
| 2.2.27 质粒提取 | 第52-53页 |
| 2.2.28 透射电子显微镜 | 第53页 |
| 2.2.29 动物实验 | 第53-54页 |
| 2.2.30 统计学分析 | 第54页 |
| 3. 实验结果 | 第54-105页 |
| 3.1 p85α在乳腺癌基质中的表达情况 | 第54-58页 |
| 3.2 p85α基因缺失的成纤维细胞促进肿瘤生长和转移 | 第58-61页 |
| 3.3 p85α基因缺失可以激活成纤维细胞转变为癌症相关的成纤维细胞 | 第61-66页 |
| 3.4 p85α基因缺失的成纤维细胞可以促进癌细胞的增殖 | 第66-68页 |
| 3.5 p85α基因缺失的成纤维细胞可以促进癌细胞的运动 | 第68-72页 |
| 3.6 p85α基因缺失的成纤维细胞可以介导癌细胞发生EMT | 第72-75页 |
| 3.7 p85α基因缺失的成纤维细胞通过旁分泌途径激活癌细胞Wnt通路 | 第75-76页 |
| 3.8 p85α基因缺失的成纤维细胞大量表达Wnt10b | 第76-81页 |
| 3.9 p85α基因缺失的成纤维细胞分泌的胞外体具有促癌功能 | 第81-89页 |
| 3.10 p85α基因缺失的成纤维细胞分泌的胞外体携带有丰富的Wnt10b | 第89-94页 |
| 3.11 p85α基因缺失的成纤维细胞增强癌细胞干性 | 第94-97页 |
| 3.12 p85α基因缺失的成纤维细胞增强癌细胞的耐药性 | 第97-99页 |
| 3.13 p85α基因缺失的成纤维细胞增强癌细胞的代谢能力 | 第99-101页 |
| 3.14 p85α基因回复与敲降实验 | 第101-104页 |
| 3.15 小结 | 第104-105页 |
| 4. 讨论 | 第105-113页 |
| 4.1 研究背景 | 第105-106页 |
| 4.2 肿瘤微环境的研究 | 第106-107页 |
| 4.3 癌症转移的机制 | 第107-109页 |
| 4.4 Wnt信号通路与癌症发生发展紧密相关 | 第109-111页 |
| 4.5 胞外体参与细胞通讯调控 | 第111-112页 |
| 4.6 研究展望 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-121页 |
| 缩略词表 | 第121-123页 |
| 攻博期间已发表和待发表的科研论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
