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硫化叶菌病毒STSV2在感染过程中基因的时序表达研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第16-37页
    1.1 硫化叶菌概述第19-22页
        1.1.1 硫化叶菌属第19页
        1.1.2 硫化叶菌属结构与代谢第19-20页
        1.1.3 硫化叶菌的分类、命名与生态学特性第20页
        1.1.4 硫化叶菌的基因组特征第20-21页
        1.1.5 硫化叶菌H5-2的分离和初步鉴定第21-22页
    1.2 古菌病毒概述第22-23页
    1.3 硫化叶菌的病毒简介第23-33页
        1.3.1 Rudiviridae病毒科第23-24页
        1.3.2 Lipothrixviridae病毒科第24-25页
        1.3.3 Fuselloviridae病毒科第25页
        1.3.4 水滴状病毒(droplet-shaped viruses)第25-26页
        1.3.5 线状病毒(Linear viruses)第26页
        1.3.6 球状病毒(Spherical viruses)第26-27页
        1.3.7 纺锤型病毒(Fusiform viruses)第27-28页
        1.3.8 未分类的纺锤型硫化叶菌病毒STSV1第28-29页
        1.3.9 STSV2病毒的特征与电镜图第29-33页
    1.4 病毒基因时序表达研究进展第33-35页
    1.5 技术路线第35页
    1.6 研究目的和意义第35-37页
第二章 硫化叶菌病毒STSV2的基因组解析第37-54页
    2.1 STSV2病毒基因组的测序第37页
    2.2 STSV2病毒基因组分析第37页
        2.2.1 基因组一般特性分析第37页
        2.2.2 开放阅读框(open reading frame,ORF)分析第37页
    2.4 结果与讨论第37-52页
        2.4.1 基因组一般特性第37-38页
        2.4.2 基因组中ORFs预测及可能编码功能基因分析第38-52页
    2.5 讨论第52-54页
第三章 硫化叶菌病毒STSV2时序性研究第54-89页
    3.1 材料第54-56页
        3.1.1 菌种第54页
        3.1.2 培养基的配制第54-56页
    3.2 方法第56页
        3.2.1 菌硫化叶菌H5-2的培养第56页
        3.2.2 硫化叶菌病毒STSV2的培养第56页
        3.2.3 试剂与仪器第56页
    3.3 方法第56-61页
        3.3.1 宿主菌硫化叶菌的培养第56页
        3.3.2 硫化叶菌病毒STSV2的培养及感染硫化叶菌H5-2第56-57页
        3.3.3 PCR检测病毒的增殖过程第57页
        3.3.4 病毒STSV2的RNA提取和检测第57-58页
        3.3.5 STSV2病毒总RNA反转录第58页
        3.3.6 STSV2基因RT-PCR扩增条件第58-59页
        3.3.7 STSV2基因Real Time PCR第59-61页
    3.4 结果与分析第61-87页
        3.4.1 感染时病毒的用量第61-62页
        3.4.2 PCR检测病毒的增殖过程第62-63页
        3.4.3 STSV2病毒对宿主硫化叶菌H5-2的影响第63页
        3.4.4 不同基因的PCR检测结果第63-84页
        3.4.5 不同基因相同时间点的表达量比较第84-85页
        3.4.6 总结硫化叶菌H5-2病毒STSV2在感染过程中基因转录的时序调节第85-87页
    3.5 讨论第87-89页
        3.5.1 硫化叶菌病毒基因时序表达规律探讨第87-89页
第四章 STSV2病毒的启动子和操纵子分析第89-101页
    4.1 材料第89页
        4.1.1 菌种第89页
        4.1.2 培养基的配制第89页
    4.2 STSV2启动子结构分析第89-90页
    4.3 STSV2病毒操纵子分析第90页
    4.4 结果第90-99页
        4.4.1 STSV2病毒的启动子分析第90-92页
        4.4.2 STSV2中操纵子分析第92-99页
            4.4.2.1 操纵子结构分析第92-94页
            4.4.2.2 操纵子表达验证结果第94-99页
    4.5 讨论第99-101页
第五章 利福平试验及病毒STSV2对宿主的影响第101-108页
    5.1 材料和方法第101-102页
        5.1.1 菌株病毒第101页
        5.1.2 引物设计方案和RNA提取第101页
        5.1.3 STSV2增殖对宿主菌的宏观影响第101-102页
        5.1.4 利福平抗性试验第102页
        5.1.5 病毒STSV2侵染后宿主基因的表达第102页
    5.2 试验结果第102-106页
        5.2.1 利福平对病毒STSV2基因表达的影响第102-105页
        5.2.2 病毒STSV2侵染后宿主基因表达的影响第105-106页
    5.3 讨论第106-108页
第六章 总结与展望第108-110页
致谢第110-111页
参考文献第111-118页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第118-119页
附录B 试验药品与设备第119-121页
    B.1 主要溶液及其配制第119-120页
        B.1.1 PBS(1L,pH7.4)第119页
        B.1.2 硫酸(2.5M,1L)第119页
        B.1.3 溴化乙锭溶液第119页
        B.1.4 1%琼脂糖凝胶的配制第119页
        B.1.5 TAE电泳缓冲液第119页
        B.1.6 TBE电泳缓冲液第119-120页
    B.2 主要仪器第120-121页
    B.3 试剂及酶制品第121页

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