| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第1章 绪论 | 第17-31页 |
| 1.1 植物氮素营养概述 | 第17-18页 |
| 1.1.1 生物中氮的重要作用 | 第17页 |
| 1.1.2 提高植物氮利用效率的研究 | 第17-18页 |
| 1.2 植物细胞自噬研究进展 | 第18-27页 |
| 1.2.1 植物细胞自噬的分子机制 | 第19-23页 |
| 1.2.2 植物细胞自噬与环境胁迫 | 第23-27页 |
| 1.3 异源三聚体G蛋白组成及调控 | 第27-28页 |
| 1.4 谷子的研究进展 | 第28-29页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.6 技术路线 | 第30-31页 |
| 第2章 谷子自噬基因家族全基因组分析 | 第31-57页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第31-32页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第32页 |
| 2.2.3 培养基组分 | 第32-33页 |
| 2.2.4 实验引物 | 第33-34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.3.1 谷子自噬基因家族检索 | 第34页 |
| 2.3.2 谷子自噬基因家族染色体分布及结构分析 | 第34-35页 |
| 2.3.3 谷子自噬基因属性分析 | 第35页 |
| 2.3.4 谷子自噬家族蛋白序列比对及进化树构建 | 第35页 |
| 2.3.5 谷子自噬基因串联复制，Ka/Ks值，与水稻共线性分析 | 第35页 |
| 2.3.6 谷子材料培养条件及胁迫处理 | 第35-36页 |
| 2.3.7 植物总RNA提取，实时定量PCR | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-55页 |
| 2.4.1 自噬基因家族分析及染色体定位 | 第37-41页 |
| 2.4.2 谷子自噬基因进化分析及基因结构 | 第41-44页 |
| 2.4.3 谷子与水稻ATG基因共线性分析 | 第44-45页 |
| 2.4.4 谷子ATG基因复制与扩张度 | 第45-49页 |
| 2.4.5 谷子ATG基因在不同组织中表达分析 | 第49-51页 |
| 2.4.6 谷子ATG基因在不同胁迫处理下的表达谱分析 | 第51-55页 |
| 2.5 本章小结 | 第55-57页 |
| 第3章 SiATG8a转基因水稻功能分析 | 第57-85页 |
| 3.1 引言 | 第57页 |
| 3.2 实验材料 | 第57-58页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第57页 |
| 3.2.2 实验菌株及载体 | 第57-58页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第58页 |
| 3.2.4 引物及测序 | 第58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-71页 |
| 3.3.1 谷子自噬基因SiATG8a的克隆 | 第58-62页 |
| 3.3.2 植物表达载体构建 | 第62-65页 |
| 3.3.3 蛋白亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 3.3.4 水稻遗传转化 | 第67-68页 |
| 3.3.5 转基因水稻的分子生物学检测 | 第68-70页 |
| 3.3.6 转基因水稻氮饥饿胁迫 | 第70页 |
| 3.3.7 植物总氮及蛋白含量的测定 | 第70-71页 |
| 3.4 实验结果 | 第71-84页 |
| 3.4.1 谷子自噬基因SiATG8a的克隆 | 第71-72页 |
| 3.4.2 SiATG8a进化分析 | 第72-73页 |
| 3.4.3 SiATG8a基因表达分析 | 第73-74页 |
| 3.4.4 SiATG8a亚细胞定位 | 第74-76页 |
| 3.4.5 表达载体pMWB014：SiATG8a的构建 | 第76-77页 |
| 3.4.6 转基因水稻的获得 | 第77-79页 |
| 3.4.7 转基因水稻的检测 | 第79-81页 |
| 3.4.8 转SiATG8a基因水稻对氮饥饿有耐受性 | 第81-84页 |
| 3.5 本章小结 | 第84-85页 |
| 第4章 SiATG8a在拟南芥中功能及调控机制的分析 | 第85-109页 |
| 4.1 引言 | 第85页 |
| 4.2 实验材料 | 第85-86页 |
| 4.2.1 植物材料及cDNA文库 | 第85页 |
| 4.2.2 实验菌株及载体 | 第85-86页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第86页 |
| 4.2.4 引物及测序 | 第86页 |
| 4.3 实验方法 | 第86-93页 |
| 4.3.1 载体构建及转基因拟南芥的获得 | 第86-88页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥对氮的响应 | 第88页 |
| 4.3.3 泛素分离系统筛选文库 | 第88-91页 |
| 4.3.4 蛋白互作验证 | 第91-92页 |
| 4.3.5 突变体检测 | 第92-93页 |
| 4.3.6 透射电镜观察亚显微结构 | 第93页 |
| 4.4 实验结果 | 第93-107页 |
| 4.4.1 SiATG8a提高转基因拟南芥对氮饥饿的耐受性 | 第93-99页 |
| 4.4.2 泛素分离系统筛选文库 | 第99-101页 |
| 4.4.3 AtATG8a与AtGPA1互作验证 | 第101-104页 |
| 4.4.4 纯合突变体鉴定 | 第104-105页 |
| 4.4.5 G蛋白 α 亚基影响植物自噬途径 | 第105-107页 |
| 4.5 本章小结 | 第107-109页 |
| 第5章 讨论 | 第109-117页 |
| 5.1 谷子自噬基因家族及进化分析 | 第109-110页 |
| 5.2 谷子自噬基因的表达分析 | 第110-113页 |
| 5.3 SiATG8a对氮素利用的调控 | 第113-115页 |
| 5.4 论文创新点 | 第115-117页 |
| 结论 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-137页 |
| 攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第137-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
