| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 瓜类病毒的发生概况 | 第13页 |
| 1.2 瓜类蚜传黄化病毒的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 CABYV的分子生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 症状及分布 | 第14-15页 |
| 1.2.3 寄主范围、传播介体及传播方式 | 第15页 |
| 1.2.4 CABYV株系分化 | 第15-16页 |
| 1.3 CABYV的检测技术 | 第16页 |
| 1.3.1 生物学检测 | 第16页 |
| 1.3.2 血清学检测 | 第16页 |
| 1.3.3 分子生物学方法 | 第16页 |
| 1.4 防治策略 | 第16-17页 |
| 1.4.1 控制病毒传播介体昆虫 | 第17页 |
| 1.4.2 利用寄主植物的抗病性 | 第17页 |
| 1.4.3 交互保护作用 | 第17页 |
| 1.5 单克隆抗体在病毒检测中的应用 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 河南、甘肃和新疆西瓜甜瓜病毒检测 | 第19-25页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 样品采集 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 病毒样品的DAS-ELISA检测 | 第20-21页 |
| 2.2.4 病毒样品的RT-PCR检测 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-23页 |
| 2.3.1 花叶型的疑似病毒病样的DAS-ELISA检测结果 | 第21-22页 |
| 2.3.2 对黄化型疑似病毒病样的RT-PCR检测结果 | 第22页 |
| 2.3.3 检测结果汇总 | 第22-23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 新疆、甘肃和河南瓜类蚜传黄化病毒分子多样性分析 | 第25-34页 |
| 3.1 前言 | 第25页 |
| 3.2 试验材料 | 第25-27页 |
| 3.2.1 病毒样品采集 | 第25-26页 |
| 3.2.2 菌株和质粒 | 第26页 |
| 3.2.3 酶和主要试剂 | 第26页 |
| 3.2.4 试验仪器和设备 | 第26-27页 |
| 3.3 试验方法 | 第27-29页 |
| 3.3.1 总RNA提取 | 第27-29页 |
| 3.4 结果与分析 | 第29-33页 |
| 3.4.1 CABYV分离物序列扩增与克隆 | 第29-30页 |
| 3.4.2 CABYV部分片段的序列分析 | 第30-33页 |
| 3.5 讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 瓜类蚜传黄化病毒CP基因突变及原核表达 | 第34-39页 |
| 4.1 引言 | 第34页 |
| 4.2 材料与方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 质粒及菌株 | 第34页 |
| 4.2.2 主要的分子试剂 | 第34页 |
| 4.2.3 CP基因优化和合成 | 第34页 |
| 4.2.4 质粒双酶切 | 第34-35页 |
| 4.2.5 目的片段回收 | 第35页 |
| 4.2.6 连接转化 | 第35页 |
| 4.2.7 质粒提取及转化 | 第35-36页 |
| 4.2.8 突变CP基因的诱导表达与分析 | 第36页 |
| 4.3 结果与分析 | 第36-37页 |
| 4.3.1 CP基因突变及重组质粒构建 | 第36-37页 |
| 4.3.2 突变CP基因的诱导 | 第37页 |
| 4.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第五章 CABYV侵染性克隆的构建及侵染本生烟 | 第39-48页 |
| 5.1 引言 | 第39页 |
| 5.2 材料 | 第39-41页 |
| 5.2.1 感病样品 | 第39页 |
| 5.2.2 菌株及载体 | 第39页 |
| 5.2.3 分子试剂 | 第39-40页 |
| 5.2.4 引物 | 第40-41页 |
| 5.2.5 仪器设备 | 第41页 |
| 5.3 方法 | 第41-44页 |
| 5.3.1 总RNA的提取 | 第41页 |
| 5.3.2 反转录 | 第41页 |
| 5.3.3 PCR扩增 | 第41页 |
| 5.3.4 PCR产物电泳及回收 | 第41-42页 |
| 5.3.5 质粒提取及双酶切 | 第42页 |
| 5.3.6 片段连接载体及转化大肠杆菌 | 第42页 |
| 5.3.7 阳性克隆鉴定及测序 | 第42页 |
| 5.3.8 质粒提取及转化农杆菌 | 第42页 |
| 5.3.9 GV3101农杆菌浸润接种本生烟 | 第42-43页 |
| 5.3.10 侵染性检测 | 第43-44页 |
| 5.4 结果与分析 | 第44-47页 |
| 5.4.1 RT-PCR扩增 | 第44页 |
| 5.4.2 PXT1质粒提取及酶切鉴定 | 第44-45页 |
| 5.4.3 阳性克隆测序结果 | 第45页 |
| 5.4.4 农杆菌浸润接种本生烟的检测 | 第45页 |
| 5.4.5 农杆菌浸润接种本生烟的症状表现 | 第45-47页 |
| 5.5 讨论 | 第47-48页 |
| 第六章 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |
