| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 苹果炭疽叶枯病及其病原菌研究概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 苹果炭疽叶枯病概况 | 第12页 |
| 1.1.2 苹果炭疽叶枯病菌研究概述 | 第12-14页 |
| 1.2 植物病原炭疽菌致病基因研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 与侵染结构代谢和功能发育相关的基因研究概况 | 第14-15页 |
| 1.2.2 炭疽菌致病相关信号传导途径研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.3 苹果炭疽叶枯病菌致病相关基因研究基础 | 第17页 |
| 1.3 本论文研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 苹果炭疽叶枯病菌致病突变体的筛选 | 第18-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 苹果炭疽叶枯病菌菌株及苹果材料 | 第18页 |
| 2.1.2 培养基 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 菌株活化与培养 | 第19页 |
| 2.2.2 突变体生物学性状分析 | 第19页 |
| 2.2.3 突变体致病性测定 | 第19页 |
| 2.2.4 突变体DNA小量提取 | 第19-20页 |
| 2.2.5 突变体潮霉素抗性基因检测 | 第20页 |
| 2.2.6 突变体T-DNA插入拷贝数分析 | 第20-21页 |
| 2.2.7 T-DNA侧翼序列的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.8 侧翼序列测序及序列分析 | 第22页 |
| 2.2.9 突变体中致病相关基因的RT-PCR分析 | 第22-24页 |
| 2.3 试验结果 | 第24-32页 |
| 2.3.1 突变体的生物学性状比较 | 第24-25页 |
| 2.3.2 突变体潮霉素基因PCR验证 | 第25页 |
| 2.3.3 突变体T-DNA插入拷贝数分析 | 第25-26页 |
| 2.3.4 突变体T-DNA侧翼序列的克隆 | 第26-29页 |
| 2.3.5 突变体T-DNA侧翼序列与基因组比对分析 | 第29页 |
| 2.3.6 突变体T-DNA侧翼基因的核苷酸序列及氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| 2.3.7 突变体T-DNA侧翼基因RT-PCR分析 | 第30-32页 |
| 第三章 苹果炭疽叶枯病菌致病相关基因GCVIR1的克隆及功能互补验证 | 第32-41页 |
| 3.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 供试菌株、质粒及苹果材料 | 第32页 |
| 3.1.2 试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 仪器 | 第32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 GcVIR1基因的克隆 | 第32-33页 |
| 3.2.2 GcVIR1基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| 3.2.3 GcVIR1功能恢复表达载体构建 | 第33-34页 |
| 3.2.4 GcVIR1功能恢复表达载体导入农杆菌 | 第34页 |
| 3.2.5 农杆菌介导的苹果炭疽叶枯病菌的遗传转化 | 第34页 |
| 3.2.6 转化子的筛选、纯化及PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2.7 转化子的RT-PCR及qRT-PCR | 第35页 |
| 3.2.8 GcVIR1突变体生长表型分析 | 第35-36页 |
| 3.3 试验结果 | 第36-41页 |
| 3.3.1 苹果炭疽叶枯病菌GcVIR1基因生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 GcVIR1基因恢复表达载体及恢复菌株的获得 | 第37-38页 |
| 3.3.3 GcVIR1基因在M285及恢复菌株R-GcVIR1中表达分析 | 第38页 |
| 3.3.4 GcVIR1基因参与营养生长并影响菌落形态 | 第38-39页 |
| 3.3.5 GcVIR1基因参与分生孢子形成过程并影响孢子形态 | 第39-40页 |
| 3.3.6 GcVIR1基因参与附着胞形态建成 | 第40页 |
| 3.3.7 GcVIR1基因是苹果炭疽叶枯病菌致病性所必需的 | 第40-41页 |
| 第四章 GCVIR1基因致病分子机制研究 | 第41-46页 |
| 4.1 试验材料 | 第41页 |
| 4.1.1 供试菌株及质粒 | 第41页 |
| 4.1.2 试剂 | 第41页 |
| 4.1.3 仪器 | 第41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-43页 |
| 4.2.1 GcVIR1基因与RFP基因融合表达载体的构建及融合表达菌株的获得 | 第41-42页 |
| 4.2.2 GcVIR1基因在不同生长发育阶段的时空表达分析 | 第42页 |
| 4.2.3 突变体M285中果胶酶合成基因表达情况 | 第42页 |
| 4.2.4 突变体M285中附着胞形成相关基因表达情况 | 第42-43页 |
| 4.3 试验结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 GcVIR1基因表达定位分析 | 第43页 |
| 4.3.2 GcVIR1基因在苹果炭疽病菌各生长发育阶段的表达情况 | 第43-44页 |
| 4.3.3 附着胞形成相关基因在GcVIR1基因突变菌株中的表达情况 | 第44页 |
| 4.3.4 果胶酶合成相关基因在GcVIR1基因突变菌株中的表达情况 | 第44-46页 |
| 第五章 全文讨论 | 第46-48页 |
| 第六章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
