| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-33页 |
| 1.1 腈水合酶 | 第12-20页 |
| 1.1.1 NHase的研究历史 | 第12-13页 |
| 1.1.2 NHase的种类 | 第13-15页 |
| 1.1.3 腈水合酶的结构和催化机理 | 第15-17页 |
| 1.1.4 腈水合酶的催化特性 | 第17-18页 |
| 1.1.5 腈水合酶的应用实例 | 第18-20页 |
| 1.1.5.1 应用于大规模化工原料的生成 | 第18页 |
| 1.1.5.2 区域选择性催化 | 第18-19页 |
| 1.1.5.3 光学选择性催化 | 第19-20页 |
| 1.1.5.4 腈废弃物的降解 | 第20页 |
| 1.2 2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺 | 第20-23页 |
| 1.2.1 咪唑啉酮除草剂 | 第20-22页 |
| 1.2.2 咪唑啉酮化合物的合成方法 | 第22-23页 |
| 1.3 2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的制备方法 | 第23-25页 |
| 1.3.1 2-氨基-2,3-二甲基丁腈的合成 | 第24页 |
| 1.3.2 2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的合成 | 第24-25页 |
| 1.4 腈水合酶在生产α-氨基酰胺中的应用 | 第25-27页 |
| 1.5 本论文研究内容 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-33页 |
| 第二章 腈水合酶产生菌株的筛选与鉴定 | 第33-46页 |
| 2.1 引言 | 第33-34页 |
| 2.2 材料和方法 | 第34-37页 |
| 2.2.1 土样 | 第34页 |
| 2.2.2 化学试剂和主要仪器 | 第34页 |
| 2.2.3 培养基及培养条件 | 第34页 |
| 2.2.4 菌种筛选方案 | 第34-35页 |
| 2.2.5 气相检测方法 | 第35-36页 |
| 2.2.6 菌种鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 2.3.1 检测方法及标准曲线 | 第37-40页 |
| 2.3.2 耐氰基腈水合酶的筛选 | 第40-41页 |
| 2.3.3 菌株鉴定 | 第41-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-46页 |
| 第三章 腈水合酶产生菌Nocardia globerula ZJB-09141培养条件的优化 | 第46-65页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 供试菌株 | 第46-47页 |
| 3.2.2 培养基 | 第47页 |
| 3.2.3 菌种培养 | 第47页 |
| 3.2.4 主要仪器和试剂 | 第47页 |
| 3.2.5 细胞生物量的测定 | 第47页 |
| 3.2.6 腈水合酶活力的测定 | 第47-48页 |
| 3.2.7 响应面实验设计 | 第48-49页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第49-62页 |
| 3.3.1 发酵培养基成分的单因素优化 | 第49-55页 |
| 3.3.2 Box-Behnken响应面实验设计 | 第55-60页 |
| 3.3.3 培养条件对菌体生长和产酶的影响 | 第60-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 第四章 Nocardia globerula ZJB-09141静息细胞转化条件的研究 | 第65-79页 |
| 4.1 引言 | 第65-66页 |
| 4.2 材料与方法 | 第66-68页 |
| 4.2.1 菌种与培养基 | 第66页 |
| 4.2.2 材料与方法 | 第66页 |
| 4.2.3 游离氰基检测方法 | 第66页 |
| 4.2.4 静息细胞的制备 | 第66-67页 |
| 4.2.5 转化反应 | 第67页 |
| 4.2.6 不同底物处理方式对氰基解离的影响 | 第67页 |
| 4.2.7 反应介质pH对酶活力的影响 | 第67页 |
| 4.2.8 转化温度对腈水合酶的影响 | 第67页 |
| 4.2.9 KCN溶液对酶活的影响 | 第67-68页 |
| 4.2.10 反应动力学参数的测定 | 第68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-77页 |
| 4.3.1 不同温度对底物解离的影响 | 第68-69页 |
| 4.3.2 不同底物处理方式对底物解离的影响 | 第69页 |
| 4.3.3 pH对静息细胞转化能力的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.4 菌体浓度对转化反应的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.5 反应温度对腈水合酶活力的影响 | 第71页 |
| 4.3.6 产物积累进程 | 第71-73页 |
| 4.3.7 腈水合酶的温度稳定性的研究 | 第73-74页 |
| 4.3.8 KCN溶液对腈水合酶酶活的影响 | 第74-76页 |
| 4.3.9 腈水合酶动力学参数的研究 | 第76-77页 |
| 4.4 本章小节 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 第五章 总结与展望 | 第79-81页 |
| 5.1 结论 | 第79-80页 |
| 5.2 展望 | 第80-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 1.实验涉及的主要仪器设备 | 第81页 |
| 2.实验涉及的缓冲液配方 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |