| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-34页 |
| 1.1 IL-11研究概况 | 第12-27页 |
| 1.1.1 IL-11的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 IL-11的基因结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 IL-11蛋白质和生化性质 | 第13页 |
| 1.1.4 IL-11蛋白质的可能空间结构 | 第13-14页 |
| 1.1.5 IL-11的基因克隆和重组表达 | 第14-15页 |
| 1.1.6 IL-11的生物活性检定 | 第15页 |
| 1.1.7 IL-11的受体蛋白和信号传导 | 第15-16页 |
| 1.1.8 生物学活性 | 第16-26页 |
| 1.1.8.1 促进巨核细胞及血小板生成和成熟 | 第16-18页 |
| 1.1.8.1.1 体外调控 | 第17页 |
| 1.1.8.1.2 体内作用 | 第17-18页 |
| 1.1.8.2 促进白细胞和红细胞生成 | 第18-19页 |
| 1.1.8.3 刺激T细胞依赖的B细胞发育 | 第19页 |
| 1.1.8.4 调节脂肪细胞分化 | 第19页 |
| 1.1.8.5 促进消化道上皮损伤的恢复 | 第19-20页 |
| 1.1.8.6 诱导止血和止血蛋白 | 第20-21页 |
| 1.1.8.7 对系统感染条件的作用 | 第21-22页 |
| 1.1.8.8 在体外对增殖、基因表达及肿瘤细胞的作用 | 第22-23页 |
| 1.1.8.9 体外对于巨噬细胞的作用 | 第23页 |
| 1.1.8.10 炎症性肠疾模型的研究 | 第23-24页 |
| 1.1.8.11 药代动力学特性 | 第24页 |
| 1.1.8.12 毒理学研究 | 第24-25页 |
| 1.1.8.13 临床研究 | 第25-26页 |
| 1.1.9 IL-11的开发情况 | 第26-27页 |
| 1.2 利用巴斯德毕赤酵母表达生产外源蛋白技术发展概况 | 第27-33页 |
| 1.3 本文研究的目的和内容 | 第33-34页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第34-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.1 菌种 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂 | 第34页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 培养基配方 | 第34-35页 |
| 2.2.2 菌种构建 | 第35页 |
| 2.2.3 摇瓶培养方法 | 第35页 |
| 2.2.4 菌体的显微镜观察 | 第35-36页 |
| 2.2.5 菌体浓度的测定 | 第36页 |
| 2.2.6 rhIL-11目的蛋白表达浓度测定 | 第36页 |
| 2.2.7 甲醇浓度测定 | 第36页 |
| 2.2.8 发酵罐培养方法 | 第36页 |
| 2.2.9 发酵上清的收集和浓缩 | 第36-37页 |
| 2.2.10 初步纯化 | 第37页 |
| 2.2.11 高度纯化 | 第37页 |
| 2.2.12 蛋白含量测定 | 第37页 |
| 2.2.13 蛋白纯度测定 | 第37页 |
| 2.2.14 生物活性测定 | 第37-40页 |
| 第三章 巴斯德毕赤酵母表达重组人白细胞介素11发酵工艺的优化 | 第40-55页 |
| 3.1 前言 | 第40页 |
| 3.2 摇瓶培养 | 第40-45页 |
| 3.2.1 温度对菌体生长和蛋白表达的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.2 pH对菌体生长和蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
| 3.2.3 甲醇诱导浓度对菌体生长和蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 发酵罐培养 | 第45-53页 |
| 3.3.1 诱导时机(起始菌浓OD_(600))对蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 诱导时间长短对蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 溶氧对菌体生长和蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.4 培养基对蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
| 3.3.5 甲醇诱导模式对菌体生长和蛋白表达的影响 | 第50-53页 |
| 3.4 小结 | 第53-55页 |
| 第四章 巴斯德毕赤酵母表达重组人白细胞介素11纯化工艺的优化 | 第55-62页 |
| 4.1 前言 | 第55页 |
| 4.2 高度纯化 | 第55-61页 |
| 4.2.1 填料对疏水层析的影响 | 第55-56页 |
| 4.2.2 盐浓度对疏水层析的影响 | 第56-59页 |
| 4.2.3 线流速对疏水层析的影响 | 第59-60页 |
| 4.2.4 洗脱梯度对疏水层析的影响 | 第60-61页 |
| 4.2.5 纯化工艺优化前后的结果比较 | 第61页 |
| 4.3 小结 | 第61-62页 |
| 第五章 巴斯德毕赤酵母表达重组人白细胞介素11优化工艺的生产 | 第62-68页 |
| 5.1 前言 | 第62页 |
| 5.2 连续3批发酵生产 | 第62-63页 |
| 5.3 连续3批纯化生产 | 第63页 |
| 5.4 连续3批原液质量鉴定 | 第63页 |
| 5.5 连续3批成品鉴定 | 第63页 |
| 5.6 生产工艺优化前后的结果比较 | 第63页 |
| 5.7 小结 | 第63-68页 |
| 第六章 总结 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表学术论文情况 | 第81页 |
