| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 植物GH3 基因的研究进展 | 第10-20页 |
| 1.1 植物GH3 蛋白的结构与分类 | 第10-12页 |
| 1.2 植物GH3 蛋白的功能研究概况 | 第12-19页 |
| 1.2.1 GH3 蛋白具有IAA 等植物生长素氨基酸化合成酶活性 | 第12-14页 |
| 1.2.2 GH3 基因功能具有多重效应 | 第14-15页 |
| 1.2.3 GH3 基因参与了茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)介导的植物防卫反应 | 第15-16页 |
| 1.2.4 GH3 基因受某些植物生长素反应因子的特异性调控 | 第16-17页 |
| 1.2.5 GH3 基因参与了光信号传导途径 | 第17-19页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 细菌和植物培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.4 酶与试剂盒 | 第21页 |
| 2.1.5 实验试剂 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 棉花RNA 的抽提及RNA 质量检测 | 第23页 |
| 2.2.2 基因克隆及功能分析 | 第23-26页 |
| 2.2.3 目的片段纯化回收 | 第26-27页 |
| 2.2.4 回收片段与pMD18-T Vector 载体的连接 | 第27页 |
| 2.2.5 大肠杆菌（DH5α）感受态细胞的制备和连接反应物的转化 | 第27-28页 |
| 2.2.6 转化重组载体后的单菌落培养和质粒的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.7 转化重组子的鉴定、测序 | 第29-30页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.2.9 基因表达特征分析 | 第30-31页 |
| 2.2.10 IAA 诱导基因表达情况分析 | 第31页 |
| 2.2.11 含目的基因的植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.12 冻融法转化农杆菌 | 第32页 |
| 2.2.13 花浸染法转化拟南芥 | 第32-33页 |
| 2.2.14 拟南芥转化子的筛选 | 第33页 |
| 2.2.15 拟南芥转化子的PCR 检测 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-54页 |
| 3.1 海岛棉中GbGH3 基因的克隆及生物信息学分析 | 第35-45页 |
| 3.1.1 海岛棉总DNA 的提取 | 第35页 |
| 3.1.2 海岛棉总DNA 的限制酶酶切反应 | 第35-36页 |
| 3.1.3 GbGH3 基因特异片断的克隆 | 第36-37页 |
| 3.1.4 海岛棉GbGH3 全长基因的克隆 | 第37-40页 |
| 3.1.5 海岛棉GbGH3 基因的生物信息学分析 | 第40-45页 |
| 3.1.6 小结 | 第45页 |
| 3.2 海岛棉GbGH3 基因的组织表达分析 | 第45-48页 |
| 3.2.1 GbGH3 基因在不同组织中的表达差异分析 | 第45-46页 |
| 3.2.2 海岛棉GbGH3 基因在不同时期的胚珠中表达的情况 | 第46-47页 |
| 3.2.3 小结 | 第47-48页 |
| 3.3 GbGH3 基因在海岛棉相关组织中受IAA 诱导表达的情况 | 第48-49页 |
| 3.4 GbGH3 超表达转化拟南芥的研究 | 第49-54页 |
| 3.4.1 表达载体的构建和拟南芥的遗传转化 | 第49-51页 |
| 3.4.2 拟南芥阳性转化植株的筛选 | 第51-52页 |
| 3.4.3 T1 代转基因植株中GbGH3 基因的RT-PCR 检测 | 第52-53页 |
| 3.4.4 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 用Genome Walking 法克隆基因 | 第54页 |
| 4.2 棉花RNA 的提取 | 第54-55页 |
| 4.3 农杆菌转化拟南芥及阳性种子的筛选 | 第55-57页 |
| 第五章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 后续工作展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
