| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 缩略语表(ABBREVIATION) | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-30页 |
| 1 胆囊收缩素(CCK) | 第17-19页 |
| 1.1 CCK的性质 | 第17页 |
| 1.2 CCK的化学结构 | 第17-18页 |
| 1.3 CCK的分布 | 第18-19页 |
| 2 CCK受体及其分布 | 第19页 |
| 3 CCK调节采食的机制 | 第19-22页 |
| 3.1 早期CCK调节采食的假说 | 第19-20页 |
| 3.2 CCK调节采食的生理机制 | 第20-21页 |
| 3.3 CCK调节采食的神经机制 | 第21-22页 |
| 4 CCK主动免疫与动物采食的调节 | 第22-23页 |
| 5 CCK抗体对动物采食的影响 | 第23-24页 |
| 6 CCK调节动物采食的应用研究 | 第24-27页 |
| 6.1 CCK主动免疫调节动物采食的应用 | 第24-25页 |
| 6.2 CCK卵黄抗体被动免疫改善饲料利用率的应用研究 | 第25-27页 |
| 7 胆囊收缩素(CCK)基因的克隆表达 | 第27-29页 |
| 7.1 CCK基因的克隆 | 第27页 |
| 7.2 CCK基因在真核细胞中的表达 | 第27-28页 |
| 7.3 CCK基因在原核细胞中的表达 | 第28-29页 |
| 本研究的目的与意义 | 第29-30页 |
| 第二章 猪CCK-33基因多串联体的克隆表达 | 第30-55页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-44页 |
| 2.1 菌株和质粒载体 | 第30-31页 |
| 2.2 试剂 | 第31页 |
| 2.3 培养基 | 第31页 |
| 2.4 溶液 | 第31-34页 |
| 2.5 CCK-33目的基因的扩增 | 第34-36页 |
| 2.6 重组质粒CCK-33一串联体的构建 | 第36-38页 |
| 2.7 重组质粒CCK-33二串联体的构建 | 第38-39页 |
| 2.8 重组质粒CCK-33三串联体的构建 | 第39-40页 |
| 2.9 重组质粒CCK-33五串联体的构建 | 第40-41页 |
| 2.10 重组质粒pRSET B-Z7CCK七串联体的构建 | 第41页 |
| 2.11 重组质粒pRSET B-Z9CCK九串联体的构建 | 第41页 |
| 2.12 CCK-33多串联体构建过程如图2-2所示 | 第41页 |
| 2.13 目的蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第41-43页 |
| 2.14 表达产物可溶性分析 | 第43页 |
| 2.15 Z9CCK重组蛋白诱导表达条件优化 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-52页 |
| 3.1 CCK、Z1CCK的PCR扩增 | 第44页 |
| 3.2 pRSET B-1CCK和pRSET B-Z1CCK质粒的PCR检测 | 第44-45页 |
| 3.3 BH1CCK和BHZ1CCK的PCR扩增 | 第45页 |
| 3.4 CCK-33多串联体的PCR检测 | 第45页 |
| 3.5 pRSET B质粒的酶切 | 第45页 |
| 3.6 pRSET B-2CCK、pRSET B-Z3CCK的酶切 | 第45页 |
| 3.7 pRSET B-Z5CCK、pRSET B-Z7CCK的酶切 | 第45页 |
| 3.8 pRSET B-Z9CCK的酶切鉴定 | 第45-48页 |
| 3.9 猪CCK-33多串联体重组蛋白的表达 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 猪CCK-33大肠杆菌偏爱密码子序列的设计 | 第52-53页 |
| 4.2 CCK-33多串联体的克隆 | 第53-54页 |
| 4.3 CCK-33多串联体的表达 | 第54-55页 |
| 第三章 Z9CCK重组蛋白抗原性研究 | 第55-61页 |
| 1 前言 | 第55-56页 |
| 2 材料和方法 | 第56-58页 |
| 2.1 抗体 | 第56页 |
| 2.2 溶液 | 第56页 |
| 2.3 Z9CCK重组蛋白抗原性预测 | 第56页 |
| 2.4 Western blot检测Z9CCK重组蛋白的抗原性 | 第56-57页 |
| 2.5 间接ELISA检测Z9CCK重组蛋白的抗原性 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-59页 |
| 3.1 Z9CCK重组蛋白抗原性预测 | 第58页 |
| 3.2 Z9CCK重组蛋白的Western blot检测 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 4.1 B细胞识别抗原表位预测 | 第59-60页 |
| 4.2 Western-blot检测Z9CCK重组蛋白的抗原性 | 第60-61页 |
| 第四章 Z9CCK重组蛋白主动免疫产蛋鸡及卵黄抗体的制备 | 第61-70页 |
| 1 前言 | 第61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-65页 |
| 2.1 试验动物 | 第61页 |
| 2.2 试剂 | 第61页 |
| 2.3 佐剂 | 第61页 |
| 2.4 抗体 | 第61-62页 |
| 2.5 缓冲液 | 第62页 |
| 2.6 包被抗原 | 第62页 |
| 2.7 Z9CCK重组蛋白提取纯化 | 第62-63页 |
| 2.8 Z9CCK重组蛋白油乳苗的制备 | 第63页 |
| 2.9 Z9CCK重组蛋白诱导卵黄抗体的产生 | 第63-64页 |
| 2.10 间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-66页 |
| 3.1 提纯Z9CCK重组蛋白 | 第65页 |
| 3.2 ELISA检测鸡蛋中CCK抗体效价 | 第65-66页 |
| 3.3 ELISA检测卵黄粉中CCK抗体效价 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 4.1 Z9CCK重组蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| 4.2 Z9CCK重组蛋白诱导卵黄抗体产生 | 第67-70页 |
| 第五章 Z9CCK重组蛋白主动免疫生长肥育猪及对生长性能的影响 | 第70-83页 |
| 1 前言 | 第70页 |
| 2 材料与方法 | 第70-73页 |
| 2.1 主要仪器 | 第70页 |
| 2.2 试验动物 | 第70页 |
| 2.3 试验日粮 | 第70-72页 |
| 2.4 饲喂管理 | 第72页 |
| 2.5 猪生长性能指标测定 | 第72页 |
| 2.6 Z9CCK重组蛋白油乳苗的制备 | 第72页 |
| 2.7 免疫程序及血液样品采集 | 第72页 |
| 2.8 用CCK-8作包被抗原对血清中CCK抗体效价的测定 | 第72-73页 |
| 2.9 动态采血及血液指标测定 | 第73页 |
| 2.10 数据分析 | 第73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-77页 |
| 3.1 Z9CCK重组蛋白主动免疫对猪生长性能的影响 | 第73-74页 |
| 3.2 Z9CCK重组蛋白主动免疫对生长猪血清中CCK抗体滴度的影响 | 第74页 |
| 3.3 Z9CCK重组蛋白主动免疫对猪部分血液生化指标的影响 | 第74-77页 |
| 4 讨论 | 第77-83页 |
| 4.1 Z9CCK主动免疫对生长猪生长性能的影响 | 第77-79页 |
| 4.2 CCK抗体滴度与动物生长性能的关系 | 第79-80页 |
| 4.3 CCK主动免疫对血清激素及其它指标的影响 | 第80-83页 |
| 第六章 结束语 | 第83-88页 |
| 1 结论 | 第83-86页 |
| 1.1 Z9CCK重组蛋白基因的克隆表达 | 第83-84页 |
| 1.2 Z9CCK重组蛋白的抗原性研究及调节猪采食量的功能研究 | 第84-86页 |
| 2 进一步研究CCK重组蛋白的表达及提高采食量的功能研究 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 附录 在读期间发表的主要研究论文 | 第98页 |
