| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1.前言 | 第11-27页 |
| 1.1 大麦遗传转化方法 | 第11-18页 |
| 1.1.1 农杆菌介导法 | 第11-15页 |
| 1.1.2 基因枪法 | 第15-17页 |
| 1.1.3 PEG法 | 第17页 |
| 1.1.4 显微注射法 | 第17-18页 |
| 1.2 转基因植物的安全性问题 | 第18-22页 |
| 1.2.1 标记基因的安全性问题 | 第18-20页 |
| 1.2.2 安全标记基因 | 第20-22页 |
| 1.3 甘露糖筛选 | 第22-27页 |
| 1.3.1 6-磷酸甘露糖异构酶基因 | 第22-24页 |
| 1.3.2 pmi基因在转基因植物筛选中的应用 | 第24-25页 |
| 1.3.3 PMI转基因植株的检测 | 第25-26页 |
| 1.3.4 PMI/甘露糖筛选体系的生物安全评估 | 第26页 |
| 1.3.5 对pmi基因作为选择标记基因的评价 | 第26-27页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第27页 |
| 2.材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27-28页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 主要生化试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 培养基、试剂配制 | 第28-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 大麦幼胚灭菌 | 第31页 |
| 2.2.2 转化农杆菌 | 第31-32页 |
| 2.2.3 菌体PCR方法鉴定转化子 | 第32页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的幼胚愈伤组织转化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 大麦幼胚愈伤组织的筛选及再生植株的移栽 | 第33页 |
| 2.2.6 转化苗的鉴定 | 第33-37页 |
| 2.2.7 甘露糖对未转化植株种子成熟胚的筛选 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 菌体PCR鉴定转化子 | 第37-38页 |
| 3.2 转化植株的获得 | 第38-40页 |
| 3.3 甘露糖对愈伤组织分化和生根的影响 | 第40-42页 |
| 3.4 高渗时间对转化的影响 | 第42-43页 |
| 3.5 辅助使用超声波和真空渗入处理对转化的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 分化阶段不同筛选压对转化的影响 | 第44页 |
| 3.7 氯酚红显色反应 | 第44-45页 |
| 3.8 PCR鉴定转化植株 | 第45-46页 |
| 3.9 Southem杂交 | 第46-48页 |
| 3.10 甘露糖对未转化植株种子成熟胚的筛选 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 大麦转化中标记基因的应用 | 第49-50页 |
| 4.2 甘露糖筛选体系的优化 | 第50-51页 |
| 4.3 氯酚红显色法快速鉴定转化植株 | 第51-52页 |
| 4.4 农杆菌转化过程中不同品种间的差异 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61页 |