中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1.1 稻瘟病与稻瘟菌 | 第11-13页 |
1.1.1 稻瘟菌概述 | 第11-12页 |
1.1.2 稻瘟菌的生活史及侵染循环 | 第12-13页 |
1.2 真菌黑色素概述 | 第13-16页 |
1.2.1 黑色素的种类和性质 | 第13-14页 |
1.2.2 黑色素的作用 | 第14页 |
1.2.3 与黑色素合成相关基因 | 第14-15页 |
1.2.4 黑色素与病原菌致病性的关系 | 第15-16页 |
1.3 天冬氨酸及天冬氨酸半缩脱氢酶研究进展 | 第16-20页 |
1.3.1 天冬氨酸家族氨基酸 | 第16页 |
1.3.2 天冬氨酸族氨基酸的合成途径 | 第16-18页 |
1.3.3 天冬氨酸半缩脱氢酶 | 第18-19页 |
1.3.4 天冬氨酸半缩脱氢酶基因拷贝数 | 第19-20页 |
1.3.5 天冬氨酸半缩脱氢酶的应用价值 | 第20页 |
1.4 活性氧在植物与病原物互作中的作用 | 第20-21页 |
1.4.1 活性氧 | 第20页 |
1.4.2 活性氧在植物防卫反应中的作用 | 第20-21页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
1.6 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 稻瘟病菌致病相关基因 MoASADH 的鉴定及克隆 | 第24-36页 |
2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
2.1.1 试验所用菌株及载体 | 第24页 |
2.1.2 试验所用培养基 | 第24-25页 |
2.1.3 CTAB 法提取稻瘟菌基因组 DNA | 第25-26页 |
2.1.4 TAIL-PCR 反应 | 第26-27页 |
2.1.5 TAIL-PCR 产物的连接反应 | 第27页 |
2.1.6 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
2.1.7 重组质粒的菌落 PCR 鉴定 | 第28-29页 |
2.1.8 基因插入位点鉴定及生物信息学分析 | 第29页 |
2.1.9 突变体 ATMT13 对过氧化氢敏感性研究 | 第29页 |
2.1.10 菌落生长速度及菌落特性 | 第29页 |
2.1.11 产孢量分析 | 第29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-35页 |
2.2.1 突变体 ATMT13 的 T-DNA 插入到 ASADH 中 | 第29-30页 |
2.2.2 突变体 ATMT13 突变基因生物信息学分析 | 第30-32页 |
2.2.3 突变体 ATMT13 生物学性状研究 | 第32-35页 |
2.3 小结 | 第35-36页 |
第三章 MoASADH 基因的敲除与互补 | 第36-54页 |
3.1 材料与方法 | 第36-48页 |
3.1.1 试验所用菌株及载体 | 第36页 |
3.1.2 试验所用培养基 | 第36-38页 |
3.1.3 构建敲除载体 | 第38-39页 |
3.1.4 质粒 DNA 的提取 | 第39-40页 |
3.1.5 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第40-41页 |
3.1.6 农杆菌介导的稻瘟菌遗传转化法 | 第41-42页 |
3.1.7 敲除转化子的验证 | 第42-45页 |
3.1.8 互补载体的构建 | 第45-46页 |
3.1.9 稻瘟菌原生质体的制备和转化 | 第46-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-53页 |
3.2.1 MoASADH 基因敲除载体的构建 | 第48-49页 |
3.2.2 MoASADH 基因敲除突变体的筛选及验证 | 第49-51页 |
3.2.3 MoASADH 基因互补载体的构建 | 第51-52页 |
3.2.4 MoASADH 基因的互补及互补突变体的获得 | 第52-53页 |
3.3 小结 | 第53-54页 |
第四章 MoASADH 在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析 | 第54-73页 |
4.1 材料与方法 | 第54-58页 |
4.1.1 供试菌株及寄主 | 第54页 |
4.1.2 试验所用培养基 | 第54-56页 |
4.1.3 稻瘟菌敲除突变体性状研究 | 第56-58页 |
4.2 结果与分析 | 第58-72页 |
4.2.1 MoASADH 基因缺失影响菌丝的营养生长 | 第58-59页 |
4.2.2 MoASADH 参与稻瘟菌黑色素的合成代谢 | 第59-62页 |
4.2.3 △MoASADH 对过氧化氢敏感性增强 | 第62-63页 |
4.2.4 MoASADH 基因缺失不影响细胞壁完整性 | 第63-64页 |
4.2.5 MoASADH 基因缺失不影响渗透压 | 第64-66页 |
4.2.6 MoASADH 参与分生孢子的形成和发育 | 第66-67页 |
4.2.7 MoASADH 基因参与附着胞的形成、发育和黑色素化 | 第67-68页 |
4.2.8 洋葱表皮侵染实验 | 第68-71页 |
4.2.9 MoASADH 基因影响菌丝的形态建成 | 第71页 |
4.2.10 MoASADH 参与稻瘟病菌的致病过程 | 第71-72页 |
4.3 小结 | 第72-73页 |
第五章 研究结论与展望 | 第73-76页 |
参考文献 | 第76-85页 |
附录 | 第85-86页 |
作者简介 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |