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稻瘟菌天冬氨酸半缩脱氢酶基因(MoASADH)的生物功能鉴定

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-24页
    1.1 稻瘟病与稻瘟菌第11-13页
        1.1.1 稻瘟菌概述第11-12页
        1.1.2 稻瘟菌的生活史及侵染循环第12-13页
    1.2 真菌黑色素概述第13-16页
        1.2.1 黑色素的种类和性质第13-14页
        1.2.2 黑色素的作用第14页
        1.2.3 与黑色素合成相关基因第14-15页
        1.2.4 黑色素与病原菌致病性的关系第15-16页
    1.3 天冬氨酸及天冬氨酸半缩脱氢酶研究进展第16-20页
        1.3.1 天冬氨酸家族氨基酸第16页
        1.3.2 天冬氨酸族氨基酸的合成途径第16-18页
        1.3.3 天冬氨酸半缩脱氢酶第18-19页
        1.3.4 天冬氨酸半缩脱氢酶基因拷贝数第19-20页
        1.3.5 天冬氨酸半缩脱氢酶的应用价值第20页
    1.4 活性氧在植物与病原物互作中的作用第20-21页
        1.4.1 活性氧第20页
        1.4.2 活性氧在植物防卫反应中的作用第20-21页
    1.5 研究的目的和意义第21-23页
    1.6 技术路线第23-24页
第二章 稻瘟病菌致病相关基因 MoASADH 的鉴定及克隆第24-36页
    2.1 材料与方法第24-29页
        2.1.1 试验所用菌株及载体第24页
        2.1.2 试验所用培养基第24-25页
        2.1.3 CTAB 法提取稻瘟菌基因组 DNA第25-26页
        2.1.4 TAIL-PCR 反应第26-27页
        2.1.5 TAIL-PCR 产物的连接反应第27页
        2.1.6 大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备与转化第27-28页
        2.1.7 重组质粒的菌落 PCR 鉴定第28-29页
        2.1.8 基因插入位点鉴定及生物信息学分析第29页
        2.1.9 突变体 ATMT13 对过氧化氢敏感性研究第29页
        2.1.10 菌落生长速度及菌落特性第29页
        2.1.11 产孢量分析第29页
    2.2 结果与分析第29-35页
        2.2.1 突变体 ATMT13 的 T-DNA 插入到 ASADH 中第29-30页
        2.2.2 突变体 ATMT13 突变基因生物信息学分析第30-32页
        2.2.3 突变体 ATMT13 生物学性状研究第32-35页
    2.3 小结第35-36页
第三章 MoASADH 基因的敲除与互补第36-54页
    3.1 材料与方法第36-48页
        3.1.1 试验所用菌株及载体第36页
        3.1.2 试验所用培养基第36-38页
        3.1.3 构建敲除载体第38-39页
        3.1.4 质粒 DNA 的提取第39-40页
        3.1.5 农杆菌感受态细胞的制备及转化第40-41页
        3.1.6 农杆菌介导的稻瘟菌遗传转化法第41-42页
        3.1.7 敲除转化子的验证第42-45页
        3.1.8 互补载体的构建第45-46页
        3.1.9 稻瘟菌原生质体的制备和转化第46-48页
    3.2 结果与分析第48-53页
        3.2.1 MoASADH 基因敲除载体的构建第48-49页
        3.2.2 MoASADH 基因敲除突变体的筛选及验证第49-51页
        3.2.3 MoASADH 基因互补载体的构建第51-52页
        3.2.4 MoASADH 基因的互补及互补突变体的获得第52-53页
    3.3 小结第53-54页
第四章 MoASADH 在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能分析第54-73页
    4.1 材料与方法第54-58页
        4.1.1 供试菌株及寄主第54页
        4.1.2 试验所用培养基第54-56页
        4.1.3 稻瘟菌敲除突变体性状研究第56-58页
    4.2 结果与分析第58-72页
        4.2.1 MoASADH 基因缺失影响菌丝的营养生长第58-59页
        4.2.2 MoASADH 参与稻瘟菌黑色素的合成代谢第59-62页
        4.2.3 △MoASADH 对过氧化氢敏感性增强第62-63页
        4.2.4 MoASADH 基因缺失不影响细胞壁完整性第63-64页
        4.2.5 MoASADH 基因缺失不影响渗透压第64-66页
        4.2.6 MoASADH 参与分生孢子的形成和发育第66-67页
        4.2.7 MoASADH 基因参与附着胞的形成、发育和黑色素化第67-68页
        4.2.8 洋葱表皮侵染实验第68-71页
        4.2.9 MoASADH 基因影响菌丝的形态建成第71页
        4.2.10 MoASADH 参与稻瘟病菌的致病过程第71-72页
    4.3 小结第72-73页
第五章 研究结论与展望第73-76页
参考文献第76-85页
附录第85-86页
作者简介第86-87页
致谢第87页

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