摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-18页 |
1.1 Harpin蛋白与植物防卫反应 | 第10-13页 |
1.1.1 hrp基因与harpin蛋白 | 第10-11页 |
1.1.2 HarpinX_oo与HarpinX_m蛋白研究背景 | 第11页 |
1.1.3 植物防卫反应 | 第11-12页 |
1.1.4 Harpin蛋白诱导的HR信号传导通路 | 第12-13页 |
1.2 Harpin蛋白诱导的植物细胞程序性死亡 | 第13-16页 |
1.2.1 植物细胞程序性死亡 | 第13-14页 |
1.2.2 植物抗病过程的PCD | 第14-15页 |
1.2.3 植物PCD的信号传导分子机理 | 第15-16页 |
1.3 生长素的信号传导及其在植物防卫中的作用 | 第16-18页 |
1.3.1 生长素信号传导途径 | 第16-17页 |
1.3.2 生长素在植物防卫反应中的作用 | 第17-18页 |
本论文研究的目的和意义 | 第18-20页 |
本试验路线图 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 材料 | 第21-23页 |
2.1.1 植物材料、供试菌株及病毒 | 第21页 |
2.1.2 培养基 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第21-22页 |
2.1.4 缓冲液 | 第22-23页 |
2.1.5 主要仪器 | 第23页 |
2.2 蛋白提取 | 第23-26页 |
2.2.1 粗蛋白提取 | 第23-24页 |
2.2.2 蛋白纯化 | 第24页 |
2.2.3 蛋白SDS-PAGE分析 | 第24-25页 |
2.2.4 纯化harpin_(X∞)和harpin_(Xm)蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
2.3 蛋白活性测定 | 第26页 |
2.4 烟草表型试验 | 第26页 |
2.4.1 IAA分别与harpin_(X∞)、harpin_(Xm)互作测定 | 第26页 |
2.4.2 TIBA作为IAA抑制剂参与IAA与harpin互作测定 | 第26页 |
2.5 染色质DNA降解检测 | 第26-27页 |
2.5.1 烟草叶组织细胞核的DAPI法显微观察 | 第26页 |
2.5.2 DNA Laddering法检测染色质DNA断裂情况 | 第26-27页 |
2.6 烟草氧爆发检测 | 第27-28页 |
2.6.1 烟草叶组织内H_2O_2含量测定 | 第27-28页 |
2.6.2 H_2O_2定位检测 | 第28页 |
2.7 RNA的提取、反转录以及PCR检测 | 第28-31页 |
2.7.1 RNA的提取 | 第28-29页 |
2.7.2 反转录 | 第29-30页 |
2.7.3 PCD相关基因检测 | 第30页 |
2.7.4 PCR扩增反应体系 | 第30页 |
2.7.5 PCR产物的检测 | 第30-31页 |
2.8 IAA与Harpin蛋白互作诱导烟草对TMV的抗病性分析 | 第31页 |
3 结果与分析 | 第31-45页 |
3.1 纯化harpin_(X∞)和harpin_(Xm)蛋白分析 | 第31-32页 |
3.2 烟草表型试验结果 | 第32-34页 |
3.2.1 IAA能抑制harpin_(X∞)和harpin_(Xm)诱导的PCD坏死斑 | 第32-33页 |
3.2.2 TIBA缓解IAA抑制的PCD坏死斑 | 第33-34页 |
3.3 染色质DNA降解检测结果 | 第34-38页 |
3.3.1 烟草叶片内细胞核DAPI染色法观察结果 | 第34-36页 |
3.3.2 DNA Laddering法检测DNA断裂情况 | 第36-38页 |
3.4 烟草氧爆发检测结果 | 第38-40页 |
3.5 PCD相关基因的表达分析 | 第40-43页 |
3.6 IAA与Harpin蛋白互作诱导烟草对TMV抗病性的分析结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
结论 | 第48-49页 |
创新点 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
攻读硕士期间发表或待发表的文章 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |