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吲哚乙酸对harpin蛋白诱导PCD功能的影响作用研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 引言第10-18页
    1.1 Harpin蛋白与植物防卫反应第10-13页
        1.1.1 hrp基因与harpin蛋白第10-11页
        1.1.2 HarpinX_oo与HarpinX_m蛋白研究背景第11页
        1.1.3 植物防卫反应第11-12页
        1.1.4 Harpin蛋白诱导的HR信号传导通路第12-13页
    1.2 Harpin蛋白诱导的植物细胞程序性死亡第13-16页
        1.2.1 植物细胞程序性死亡第13-14页
        1.2.2 植物抗病过程的PCD第14-15页
        1.2.3 植物PCD的信号传导分子机理第15-16页
    1.3 生长素的信号传导及其在植物防卫中的作用第16-18页
        1.3.1 生长素信号传导途径第16-17页
        1.3.2 生长素在植物防卫反应中的作用第17-18页
本论文研究的目的和意义第18-20页
本试验路线图第20-21页
2 材料与方法第21-31页
    2.1 材料第21-23页
        2.1.1 植物材料、供试菌株及病毒第21页
        2.1.2 培养基第21页
        2.1.3 主要试剂及试剂盒第21-22页
        2.1.4 缓冲液第22-23页
        2.1.5 主要仪器第23页
    2.2 蛋白提取第23-26页
        2.2.1 粗蛋白提取第23-24页
        2.2.2 蛋白纯化第24页
        2.2.3 蛋白SDS-PAGE分析第24-25页
        2.2.4 纯化harpin_(X∞)和harpin_(Xm)蛋白浓度的测定第25-26页
    2.3 蛋白活性测定第26页
    2.4 烟草表型试验第26页
        2.4.1 IAA分别与harpin_(X∞)、harpin_(Xm)互作测定第26页
        2.4.2 TIBA作为IAA抑制剂参与IAA与harpin互作测定第26页
    2.5 染色质DNA降解检测第26-27页
        2.5.1 烟草叶组织细胞核的DAPI法显微观察第26页
        2.5.2 DNA Laddering法检测染色质DNA断裂情况第26-27页
    2.6 烟草氧爆发检测第27-28页
        2.6.1 烟草叶组织内H_2O_2含量测定第27-28页
        2.6.2 H_2O_2定位检测第28页
    2.7 RNA的提取、反转录以及PCR检测第28-31页
        2.7.1 RNA的提取第28-29页
        2.7.2 反转录第29-30页
        2.7.3 PCD相关基因检测第30页
        2.7.4 PCR扩增反应体系第30页
        2.7.5 PCR产物的检测第30-31页
    2.8 IAA与Harpin蛋白互作诱导烟草对TMV的抗病性分析第31页
3 结果与分析第31-45页
    3.1 纯化harpin_(X∞)和harpin_(Xm)蛋白分析第31-32页
    3.2 烟草表型试验结果第32-34页
        3.2.1 IAA能抑制harpin_(X∞)和harpin_(Xm)诱导的PCD坏死斑第32-33页
        3.2.2 TIBA缓解IAA抑制的PCD坏死斑第33-34页
    3.3 染色质DNA降解检测结果第34-38页
        3.3.1 烟草叶片内细胞核DAPI染色法观察结果第34-36页
        3.3.2 DNA Laddering法检测DNA断裂情况第36-38页
    3.4 烟草氧爆发检测结果第38-40页
    3.5 PCD相关基因的表达分析第40-43页
    3.6 IAA与Harpin蛋白互作诱导烟草对TMV抗病性的分析结果第43-45页
4 讨论第45-48页
结论第48-49页
创新点第49-50页
参考文献第50-56页
攻读硕士期间发表或待发表的文章第56-57页
致谢第57页

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