| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 植物启动子的结构特点 | 第10-11页 |
| 1.1.1 转录起始位点 | 第10页 |
| 1.1.2 TATA盒(TATA-box) | 第10-11页 |
| 1.1.3 CAAT盒(CAAT-box) | 第11页 |
| 1.1.4 GC-box保守序列(GC-box conserved sequence,G盒) | 第11页 |
| 1.2 植物基因启动子的类型 | 第11-16页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 诱导型启动子 | 第13页 |
| 1.2.3 组织或器官特异性启动子 | 第13-16页 |
| 1.3 报告基因 | 第16-18页 |
| 1.3.1 荧光素酶 | 第16-17页 |
| 1.3.2 报告基因GUS(β-葡糖苷酸酶基因) | 第17页 |
| 1.3.3 荧光蛋白 | 第17-18页 |
| 1.4 启动子功能分析 | 第18-19页 |
| 1.4.1 生物信息学法 | 第18页 |
| 1.4.2 实验分析法 | 第18-19页 |
| 2 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 3 材料和方法 | 第20-32页 |
| 3.1 材料 | 第20-22页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第20-21页 |
| 3.1.3 工具酶及生化试剂 | 第21页 |
| 3.1.4 培养基和抗生素 | 第21-22页 |
| 3.1.5 GUS检测试剂 | 第22页 |
| 3.1.6 DNA琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第22页 |
| 3.1.7 主要仪器设备 | 第22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 3.2.1 DNA的提取及目的启动子的克隆 | 第23-25页 |
| 3.2.2 RNA的提取与cDNA的合成 | 第25页 |
| 3.2.3 DNA片段的回收和纯化 | 第25-27页 |
| 3.2.4 DNA片段与克隆载体的连接 | 第27页 |
| 3.2.5 大肠杆菌DH5a感受态的制备及转化 | 第27-28页 |
| 3.2.6 重组质粒的筛选及鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.7 瞬时表达分析 | 第29-32页 |
| 3.2.8 瞬时表达产物的定量检测 | 第32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-47页 |
| 4.1 目的启动子的内源表达检测 | 第32-36页 |
| 4.1.1 玉米内源基因的半定量检测 | 第32-33页 |
| 4.1.2 玉米内源基因表达的影响因子分析 | 第33-36页 |
| 4.2 目的启动子外源表达检测 | 第36-47页 |
| 4.2.1 目的启动子片段克隆 | 第36-38页 |
| 4.2.2 目的启动子片段生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 4.2.3 目的启动子的表达载体构建 | 第40-42页 |
| 4.2.4 目的启动子表达载体的鉴定 | 第42页 |
| 4.2.5 目的启动子与Ubiquitin启动子活性的比较 | 第42-43页 |
| 4.2.6 目的启动子在不同组织中的表达活性分析 | 第43-45页 |
| 4.2.7 目的启动子的调控因子分析 | 第45-47页 |
| 5 讨论 | 第47-51页 |
| 5.1 目的启动子的启动活性分析 | 第47-49页 |
| 5.1.1 关于启动子表达组织特异性分析 | 第47-48页 |
| 5.1.2 关于启动活性检测方法 | 第48-49页 |
| 5.2 外源诱导因素分析 | 第49页 |
| 5.3 后续实验研究思路 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附件 | 第56-58页 |