摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
·研究背景 | 第15-22页 |
·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
·研究的主要内容 | 第23-24页 |
·技术路线 | 第24-25页 |
第二章 研究材料与方法 | 第25-48页 |
·实验材料 | 第25-29页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25-26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·使用软件 | 第26-27页 |
·主要使用仪器 | 第27-28页 |
·引物 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-48页 |
·目的基因的选择 | 第29页 |
·毛竹叶片总RNA 提取与cDNA 第一链合成 | 第29-30页 |
·PCR 反应体系及产物的琼脂糖电泳 | 第30-31页 |
·PCR 产物回收 | 第31页 |
·PCR 产物与pMD18-T 载体的连接 | 第31-32页 |
·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第32-34页 |
·重组质粒的菌液PCR 鉴定 | 第34页 |
·质粒DNA 的小量提取与酶切分析 | 第34-36页 |
·序列的测定与分析 | 第36页 |
·不同处理对PheWRKY1 基因转录水平表达的影响 | 第36-39页 |
·植物过表达载体构建 | 第39-40页 |
·菌种保藏 | 第40页 |
·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
·重组质粒转化根癌农杆菌感受态细胞(电击法) | 第41页 |
·农杆菌菌液PCR 鉴定 | 第41页 |
·拟南芥培养 | 第41-42页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第42页 |
·拟南芥的抗性筛选 | 第42-43页 |
·转基因拟南芥基因组DNA 检测 | 第43-44页 |
·拟南芥种子萌发与表型观察 | 第44页 |
·细菌培养与拟南芥接种 | 第44-45页 |
·拟南芥病程相关基因表达变化 | 第45页 |
·拟南芥光合作用相关的叶绿素荧光参数差异 | 第45-46页 |
·原核表达载体构建与PheWRKY1 蛋白的制备 | 第46-48页 |
第三章 结果与分析 | 第48-73页 |
·基因片段的克隆 | 第48-49页 |
·生物信息学分析 | 第49-54页 |
·蛋白序列聚类分析、保守性分析与蛋白三级结构预测 | 第49-51页 |
·亚细胞定位分析 | 第51页 |
·跨膜结构域分析 | 第51-52页 |
·蛋白信号肽预测 | 第52-53页 |
·蛋白功能预测 | 第53-54页 |
·不同处理下PheWRKY1 基因的表达模式分析 | 第54-61页 |
·毛竹总RNA 的提取与反转录 | 第54-55页 |
·引物特异性检测 | 第55页 |
·实时荧光定量PCR 扩增曲线和溶解曲线分析 | 第55-58页 |
·几种处理在转录水平对PheWRKY1 基因表达的调控 | 第58-60页 |
·自然发病林感病植株基因表达分析 | 第60-61页 |
·目的基因原核表达 | 第61-62页 |
·利用转基因拟南芥对目的基因进行功能分析 | 第62-73页 |
·转基因拟南芥植株的获得 | 第62-64页 |
·拟南芥T_2 代植株表型观察 | 第64-65页 |
·DC3000 侵染对拟南芥表型特征的影响 | 第65页 |
·DC3000 侵染后拟南芥光合荧光特性的变化 | 第65-69页 |
·病程相关基因表达的变化 | 第69-73页 |
第四章 结论与讨论 | 第73-78页 |
·结论 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-77页 |
·展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录 | 第86-91页 |
在读期间的学术研究 | 第91-93页 |
致谢 | 第93页 |