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利用RNA-seq技术在云南山茶中解析重要分子通路与开发多态性EST-SSR

致谢第3-5页
摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第一章 引言第15-34页
    1.1 DNA测序技术发展第15-19页
        1.1.1 Sanger法测序第15页
        1.1.2 第二代测序技术(高通量测序技术)第15-19页
        1.1.3 第三代测序技术第19页
    1.2 基于二代测序技术的转录组研究概述第19-24页
        1.2.1 转录组研究概述第19-20页
        1.2.2 基于二代测序技术的转录组测序(RNA-seq)第20-21页
        1.2.3 RNA-seq的重要应用第21-24页
    1.3 云南山茶概况及研究进展概述第24-32页
        1.3.1 山茶属植物的分类与地理分布第24-26页
        1.3.2 山茶花产业的发展现状第26-27页
        1.3.3 油茶产业发展的现状第27-30页
        1.3.4 云南山茶简介第30-32页
    1.4 本研究的选题依据、研究内容、研究目的与意义第32-34页
第二章 山茶的实地考察及其它准备工作第34-52页
    2.1 引言第34-35页
    2.2 方法第35-40页
        2.2.1 实地考察与测量第35-36页
        2.2.2 云南山茶的人工繁殖第36-37页
        2.2.3 DNA和RNA提取方法第37-40页
    2.3 结果第40-50页
        2.3.1 实地考察与测量第40-47页
        2.3.2 云南山茶的繁殖第47-48页
        2.3.3 DNA和RNA提取方法的改进与比较第48-50页
    2.4 讨论第50-52页
第三章 云南山茶转录组测序、组装和分析第52-71页
    3.1 引言第52页
    3.2 材料与方法第52-58页
        3.2.1 植株材料和RNA样品制备第52-54页
        3.2.2 测序文库的制备和Illumina测序第54页
        3.2.3 转录组reads的前处理和de novo组装第54页
        3.2.4 转录组序列的拼装后处理(Post-assembly processing)第54-55页
        3.2.5 转录组序列的功能注释第55页
        3.2.6 表达量分析和差异表达基因的富集分析第55-56页
        3.2.7 荧光实时定量PCR检测(qRT-PCR)第56-58页
    3.3 结果与讨论第58-69页
        3.3.1 测序和de novo组装结果的统计第58-60页
        3.3.2 组装质量的评估第60-61页
        3.3.3 转录组序列的注释和GO分类第61-65页
        3.3.4 表达谱研究和差异表达分析第65-67页
        3.3.5 qRT-PCR的实验验证第67-69页
    3.4 小结第69-71页
第四章 云南山茶中与油脂、类黄酮、类胡萝卜素生物合成及光周期成花诱导相关的候选基因的鉴定和表达分析第71-91页
    4.1 引言第71-76页
    4.2 方法第76页
        4.2.1 候选基因的发掘第76页
        4.2.2 基因表达分析和qRT-PCR的实验验证第76页
    4.3 结果与讨论第76-89页
        4.3.1 云南山茶转录组中参与三酰甘油酯生物合成的候选基因第76-81页
        4.3.2 云南山茶转录组中与光周期成花途径相关的基因第81-83页
        4.3.3 云南山茶转录组中与类黄酮生物合成相关的基因第83-87页
        4.3.4 云南山茶转录组中与类胡萝卜素生物合成相关的基因第87-88页
        4.3.5 关于基因发掘与采样策略的讨论第88-89页
    4.4 小结第89-91页
第五章 单拷贝直系同源候选基因的发掘及其在云南山茶多倍体复合体起源进化研究中的应用初探第91-97页
    5.1 引言第91-92页
    5.2 方法第92-93页
        5.2.1 转录组序列数据集第92页
        5.2.2 单拷贝直系同源基因的数据集构建第92页
        5.2.3 系统发育树构建第92-93页
    5.3 结果与讨论第93-96页
        5.3.1 利用转录组数据进行单拷贝直系同源基因的构建第93-94页
        5.3.2 基于单拷贝直系同源基因联合数据集的系统发育树第94页
        5.3.3 基于全局相似性比对检验系统树中的矛盾分支第94-96页
    5.4 小结第96-97页
第六章 云南山茶SSR分子标记的开发第97-110页
    6.1 引言第97-98页
    6.2 材料和方法第98-102页
        6.2.1 材料第98页
        6.2.2 实验方法第98-102页
    6.3 结果第102-108页
        6.3.1 EST-SSR的查找和统计第102-103页
        6.3.2 云南山茶20个SSR的实验验证第103-105页
        6.3.3 预测多态性SSR的生物信息学软件CandiSSR的开发第105-107页
        6.3.4 利用CandiSSR在云南山茶转录组中批量预测多态性SSR第107-108页
    6.4 讨论第108-110页
参考文献第110-122页
附录第122-150页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第150-151页

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