| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第14-30页 |
| 1.1 低温微生物 | 第14-18页 |
| 1.1.1 低温微生物的简介 | 第14-15页 |
| 1.1.2 国内外低温微生物研究现状 | 第15-17页 |
| 1.1.3 低温沙雷氏菌研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2 低温启动子 | 第18-22页 |
| 1.2.1 细菌启动子的简介 | 第18-19页 |
| 1.2.2 研究启动子的意义与目的 | 第19-20页 |
| 1.2.3 低温菌启动子的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3 报告基因 | 第22-28页 |
| 1.3.1 报告基因的概述 | 第22-27页 |
| 1.3.2 报告基因的应用 | 第27页 |
| 1.3.3 报告基因的问题与展望 | 第27-28页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 启动子活性的初步分析 | 第30-42页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 培养基 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株 | 第30-31页 |
| 2.1.3 质粒 | 第31页 |
| 2.1.4 试剂与仪器 | 第31页 |
| 2.2 技术路线 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.3.1 含启动子片段重组质粒的DH5α的卡那霉素耐受性实验 | 第32-33页 |
| 2.3.2 重组质粒转化MY1402 | 第33-36页 |
| 2.3.3 含启动子片段重组质粒的MY1402的卡那霉素耐受性实验 | 第36-37页 |
| 2.4 结果 | 第37-41页 |
| 2.4.1 含启动子片段重组质粒的DH5α的卡那霉素耐受性实验 | 第37-39页 |
| 2.4.2 重组质粒电转化MY1402 | 第39-40页 |
| 2.4.3 含启动子片段重组质粒的MY1402的卡那霉素耐受性实验 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 启动子核心序列的预测与验证 | 第42-67页 |
| 3.1 材料 | 第42-44页 |
| 3.1.1 培养基 | 第42-43页 |
| 3.1.2 菌株 | 第43页 |
| 3.1.3 质粒 | 第43页 |
| 3.1.4 试剂与仪器 | 第43-44页 |
| 3.2 技术路线 | 第44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-52页 |
| 3.3.1 启动子核心序列的预测及分析 | 第44页 |
| 3.3.2 启动子核心序列的合成 | 第44-45页 |
| 3.3.3 含启动子核心序列重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| 3.3.4 含启动子核心序列重组质粒的卡那霉素耐受性实验 | 第47-49页 |
| 3.3.5 MY1402重组子卡那霉素耐受性的荧光定量实验 | 第49-52页 |
| 3.4 结果 | 第52-64页 |
| 3.4.1 启动子核心序列的预测结果及分析 | 第52-57页 |
| 3.4.2 含启动子核心序列重组质粒的卡那霉素耐受性实验 | 第57-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 pUG启动子探针质粒的构建和核心序列的再次验证 | 第67-86页 |
| 4.1 材料 | 第67-68页 |
| 4.1.1 培养基 | 第67-68页 |
| 4.1.2 菌株 | 第68页 |
| 4.1.3 质粒 | 第68页 |
| 4.1.4 试剂与仪器 | 第68页 |
| 4.2 技术路线 | 第68-69页 |
| 4.3 实验方法 | 第69-77页 |
| 4.3.1 pUG探针质粒的构建 | 第69-72页 |
| 4.3.2 含启动子完整片段的pUG重组质粒的构建 | 第72-73页 |
| 4.3.3 含启动子核心序列的pUG重组质粒的构建 | 第73-74页 |
| 4.3.4 p3启动子核心序列的再验证 | 第74-76页 |
| 4.3.5 对表达绿色荧光蛋白重组子的初步定量实验 | 第76-77页 |
| 4.4 结果 | 第77-82页 |
| 4.4.1 pUG探针质粒的构建结果 | 第77-78页 |
| 4.4.2 含完整启动子片段pUG重组质粒的重组子的发光情况 | 第78-79页 |
| 4.4.3 含启动子核心序列的pUG重组质粒的构建 | 第79页 |
| 4.4.4 p3启动子核心序列的再验证 | 第79-80页 |
| 4.4.5 p3启动子核心序列的探索 | 第80-81页 |
| 4.4.6 表达绿色荧光蛋白重组子的初步定量结果 | 第81-82页 |
| 4.5 讨论 | 第82-86页 |
| 第五章 总结与展望 | 第86-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第97-98页 |
| 附录B 实验药品与设备 | 第98-104页 |
| B.1 主要溶液及其配制 | 第98-101页 |
| B.2 主要仪器 | 第101-102页 |
| B.3 试剂及酶制品 | 第102-104页 |
| 附录C 符号说明 | 第104-105页 |
