摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
英文缩略词 | 第11-14页 |
第一章 细胞壁关联蛋白激酶的研究进展 | 第14-24页 |
引言 | 第14页 |
1. WAK的发现 | 第14-15页 |
2. WAK的结构 | 第15-17页 |
3. WAK基因家族的分类 | 第17-19页 |
4. 植物WAK基因的表达 | 第19-20页 |
5. WAK生物学功能 | 第20-21页 |
5.1 参与病原菌反应 | 第20-21页 |
5.2 参与细胞伸长调控 | 第21页 |
5.3 参与金属离子胁迫反应 | 第21页 |
6. WAK可能作用机理 | 第21-22页 |
7. 研究意义 | 第22-24页 |
第二章 水稻细胞壁关联蛋白激酶OsWAK基因的克隆及表达 | 第24-56页 |
摘要 | 第24页 |
1 实验材料 | 第24-26页 |
1.1 植物材料 | 第24页 |
1.2 菌株与载体 | 第24页 |
1.3 酶、试剂盒 | 第24-25页 |
1.4 其他试剂 | 第25页 |
1.6 常用实验仪器 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-36页 |
2.1 植物材料准备 | 第26页 |
2.2 水稻幼苗总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.3 cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
2.4 水稻基因组DNA提取 | 第28-29页 |
2.5 基因全长的获得 | 第29-30页 |
2.6 克隆载体构建 | 第30-32页 |
2.7 重组质粒的阳性鉴定 | 第32-34页 |
2.8 OsWAK生物信息学分析 | 第34页 |
2.9 OsWAK基因的表达特性分析 | 第34-36页 |
3 结果与分析 | 第36-53页 |
3.1 水稻幼苗总RNA的提取 | 第36页 |
3.2 OsWAK全长的PCR扩增结果 | 第36页 |
3.3 PCR产物的pMD18-T载体连接及验证 | 第36-37页 |
3.4 测序结果分析 | 第37页 |
3.5 OsWAK基因组结构 | 第37-41页 |
3.6 OsWAK生物信息学分析结果及分析 | 第41-52页 |
3.7 组织表达结果 | 第52页 |
3.8 信号物质对OsWAK表达的影响 | 第52页 |
3.9 过量金属对OsWAK表达的影响 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
4.1 基因克隆及序列分析 | 第53-54页 |
4.2 OsWAK基因表达模式分析 | 第54-56页 |
第三章 水稻细胞壁关联蛋白激酶OsWAK基因激酶域原核表达分析 | 第56-76页 |
摘要 | 第56页 |
1 实验材料 | 第56-58页 |
1.1 质粒、菌株、载体 | 第56页 |
1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
1.3 SDS-PAGE电泳相关试剂 | 第57页 |
1.4 菌细胞裂解及蛋白纯化相关试剂 | 第57-58页 |
1.5 主要仪器 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-66页 |
2.1 融合表达载体pSUMO-WAKD的构建 | 第58-61页 |
2.2 WAKD基因的原核表达鉴定 | 第61-64页 |
2.3 pSUMO-WAKD融合蛋白的纯化 | 第64-66页 |
3 结果与分析 | 第66-73页 |
3.1 pSUMO-WAKD融合表达载体的构建 | 第66-69页 |
3.2 融合蛋白pSUMO-WAKD的原核表达鉴定 | 第69-72页 |
3.3 融合蛋白SUMU-WAKD的大量表达与纯化 | 第72-73页 |
3.4 融合蛋白SUMO-WAKD的酶切 | 第73页 |
4 讨论 | 第73-76页 |
4.1 胞内激酶结构域扩增片段的选择 | 第73页 |
4.2 载体和宿主的选择 | 第73-74页 |
4.3 融合蛋白的大量表达与纯化 | 第74-75页 |
4.4 融合蛋白的复性与酶切 | 第75-76页 |
第四章 全文总结 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
致谢 | 第84页 |