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水稻细胞壁关联蛋白激酶(OsWAK)基因的克隆及激酶域的原核表达

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
英文缩略词第11-14页
第一章 细胞壁关联蛋白激酶的研究进展第14-24页
    引言第14页
    1. WAK的发现第14-15页
    2. WAK的结构第15-17页
    3. WAK基因家族的分类第17-19页
    4. 植物WAK基因的表达第19-20页
    5. WAK生物学功能第20-21页
        5.1 参与病原菌反应第20-21页
        5.2 参与细胞伸长调控第21页
        5.3 参与金属离子胁迫反应第21页
    6. WAK可能作用机理第21-22页
    7. 研究意义第22-24页
第二章 水稻细胞壁关联蛋白激酶OsWAK基因的克隆及表达第24-56页
    摘要第24页
    1 实验材料第24-26页
        1.1 植物材料第24页
        1.2 菌株与载体第24页
        1.3 酶、试剂盒第24-25页
        1.4 其他试剂第25页
        1.6 常用实验仪器第25-26页
    2 实验方法第26-36页
        2.1 植物材料准备第26页
        2.2 水稻幼苗总RNA的提取第26-27页
        2.3 cDNA第一链的合成第27-28页
        2.4 水稻基因组DNA提取第28-29页
        2.5 基因全长的获得第29-30页
        2.6 克隆载体构建第30-32页
        2.7 重组质粒的阳性鉴定第32-34页
        2.8 OsWAK生物信息学分析第34页
        2.9 OsWAK基因的表达特性分析第34-36页
    3 结果与分析第36-53页
        3.1 水稻幼苗总RNA的提取第36页
        3.2 OsWAK全长的PCR扩增结果第36页
        3.3 PCR产物的pMD18-T载体连接及验证第36-37页
        3.4 测序结果分析第37页
        3.5 OsWAK基因组结构第37-41页
        3.6 OsWAK生物信息学分析结果及分析第41-52页
        3.7 组织表达结果第52页
        3.8 信号物质对OsWAK表达的影响第52页
        3.9 过量金属对OsWAK表达的影响第52-53页
    4 讨论第53-56页
        4.1 基因克隆及序列分析第53-54页
        4.2 OsWAK基因表达模式分析第54-56页
第三章 水稻细胞壁关联蛋白激酶OsWAK基因激酶域原核表达分析第56-76页
    摘要第56页
    1 实验材料第56-58页
        1.1 质粒、菌株、载体第56页
        1.2 主要试剂第56-57页
        1.3 SDS-PAGE电泳相关试剂第57页
        1.4 菌细胞裂解及蛋白纯化相关试剂第57-58页
        1.5 主要仪器第58页
    2 实验方法第58-66页
        2.1 融合表达载体pSUMO-WAKD的构建第58-61页
        2.2 WAKD基因的原核表达鉴定第61-64页
        2.3 pSUMO-WAKD融合蛋白的纯化第64-66页
    3 结果与分析第66-73页
        3.1 pSUMO-WAKD融合表达载体的构建第66-69页
        3.2 融合蛋白pSUMO-WAKD的原核表达鉴定第69-72页
        3.3 融合蛋白SUMU-WAKD的大量表达与纯化第72-73页
        3.4 融合蛋白SUMO-WAKD的酶切第73页
    4 讨论第73-76页
        4.1 胞内激酶结构域扩增片段的选择第73页
        4.2 载体和宿主的选择第73-74页
        4.3 融合蛋白的大量表达与纯化第74-75页
        4.4 融合蛋白的复性与酶切第75-76页
第四章 全文总结第76-78页
参考文献第78-84页
致谢第84页

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