摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
前言 | 第8-10页 |
第一部分:PVT1在胃癌患者血液中的表达及其临床意义 | 第10-19页 |
1 材料与方法 | 第10-12页 |
1.1 研究对象 | 第10页 |
1.2 主要试剂和耗材 | 第10-11页 |
1.3 主要仪器设备 | 第11-12页 |
2 方法 | 第12-16页 |
2.1 总RNA的提取及鉴定 | 第12-13页 |
2.2 RNA逆转录合成cDNA | 第13-14页 |
2.3 引物设计与合成 | 第14页 |
2.4 实时定量PCR | 第14-15页 |
2.5 统计学分析 | 第15-16页 |
3 结果 | 第16-18页 |
3.1 PVT1在血液中的表达量 | 第16-17页 |
3.2 PVT1的表达与胃癌患者临床特征的关系 | 第17-18页 |
讨论 | 第18-19页 |
第二部分:胃癌组织中PVT1与c-myc蛋白的表达及其临床意义 | 第19-28页 |
1 材料与方法 | 第19页 |
1.1 研究对象 | 第19页 |
1.2 主要试剂和耗材(同第一部分) | 第19页 |
1.3 主要仪器设备(同第一部分) | 第19页 |
2 方法 | 第19-23页 |
2.1 组织芯片的制备 | 第19-20页 |
2.2 c-myc蛋白免疫组织化学染色 | 第20页 |
2.3 原位杂交(ISH)检测胃癌组织中PVT1的表达 | 第20-21页 |
2.4 原位杂交和免疫组织化学染色结果判定标准 | 第21-22页 |
2.5 统计学分析 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-27页 |
3.1 PVT1在正常胃粘膜组织和胃癌组织中的表达以及与临床病理分期的相关性 | 第23-24页 |
3.2 c-myc蛋白在正常胃粘膜组织和胃癌组织中的表达以及与临床病理分期的相关性 | 第24-26页 |
3.3 PVT1与c-myc两者之间的相关性分析 | 第26-27页 |
讨论 | 第27-28页 |
第三部分:干扰PVT1对胃癌细胞增殖、迁袭和c-myc表达的影响 | 第28-46页 |
1 材料与方法 | 第28-29页 |
1.1 研究对象 | 第28-29页 |
1.2 主要试剂与耗材(同第一部分) | 第29页 |
1.3 主要仪器设备(同第一部分) | 第29页 |
2 方法 | 第29-38页 |
2.1 细胞的培养 | 第29-30页 |
2.2 质粒的获取 | 第30-32页 |
2.3 质粒的转染 | 第32页 |
2.4 CCK8法检测细胞增殖 | 第32页 |
2.5 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第32-33页 |
2.6 Transwell迁移实验检测细胞迁移能力 | 第33页 |
2.7 Western Blot检测c-myc蛋白的表达水平 | 第33-37页 |
2.8 统计学分析 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-44页 |
3.1 PVT1在6种胃癌细胞中的表达量 | 第38页 |
3.2 检测sh-PVT1在BGC823细胞中的转染效率 | 第38-39页 |
3.3 检测sh-PVT1在BGC823细胞中的干扰效率 | 第39-40页 |
3.4 检测sh-PVT1-6 质粒在AGS胃癌细胞中的转染效率 | 第40-41页 |
3.5 检测sh-PVT1-6 质粒在AGS胃癌细胞中的干扰效率 | 第41页 |
3.6 CCK8检测sh-PVT1-6 对BGC823和AGS胃癌细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
3.7 sh-PVT1-6 对BGC823和AGS胃癌细胞侵袭和迁移的影响 | 第42页 |
3.8 Western Blot检测PVT1干扰后c-myc蛋白的表达 | 第42-44页 |
讨论 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
文献综述 | 第52-58页 |
参考文献 | 第55-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附录 | 第59-63页 |
作者简介 | 第63-64页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第64页 |