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运用CALI技术研究中间纺锤体的组装对胞质分裂和有丝分裂退出事件的调控功能

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 绪论第10-24页
   ·中间纺锤体组装研究进展第10-19页
     ·中间纺锤体的稳定性和自主装第10-11页
     ·调控中间纺锤体组装的微管相关蛋白MAPs第11-12页
     ·其他的中间纺锤体微管相关蛋白和马达蛋白第12-13页
     ·中间纺锤体各组件之间复杂的相互调节关系第13-15页
     ·中间纺锤体的组装受到时间和空间的调控第15-16页
     ·胞质分裂中收缩环的形成机制第16页
     ·肌球蛋白Ⅱ的活化调控肌动蛋白-肌球蛋白环的收缩第16-18页
     ·中间纺锤体和收缩环的协同关系第18-19页
   ·有丝分裂退出的研究进展第19-21页
     ·APC~(cdc20)触发有丝分裂的最终事件第19页
     ·细胞周期中APC受到多个层次的严密调控第19-20页
     ·有丝分裂后半段APC~(Cdhl)的激活第20-21页
     ·有丝分裂末期的主要事件第21页
   ·CALI实验技术进展第21-24页
     ·CALI技术简介第21-22页
     ·CALI技术在细胞生物学领域的应用进展第22页
     ·CALI灭活靶蛋白的光化学分子机制第22-24页
第2章 染色体桥导致中间纺锤体缺陷第24-29页
   ·材料与方法第24-25页
     ·细胞培养第24页
     ·免疫荧光第24-25页
     ·细胞松弛素诱导三极细胞第25页
     ·激光共聚焦显微镜观察第25页
   ·实验结果与分析第25-27页
     ·具有染色体桥的细胞内中间纺锤体微管荧光强度较弱第25页
     ·三极细胞内染色体桥侧中间纺锤体微管结构出现缺陷第25-27页
   ·讨论第27-29页
第3章 中间纺锤体的组装调控分裂沟形成和末期核膜重构事件第29-43页
   ·材料与方法第29-31页
     ·细胞培养第29页
     ·活细胞观察第29页
     ·CALI激光灭活实验第29-30页
     ·CALI处理网格玻片定位单细胞及跟踪免疫荧光实验流程第30页
     ·DNA活体染色第30页
     ·免疫荧光第30-31页
     ·激光共聚焦显微镜观察第31页
   ·实验结果与分析第31-40页
     ·CALI激光灭活系统的稳定性和专一性检测第31-33页
     ·中间纺锤体微管骨架在胞质分裂进程中的动态变化第33-34页
     ·后期B破坏中间纺锤体组装导致胞质分裂速度减慢第34-35页
     ·后期A破坏中间纺锤体组装造成细胞周期后期阻滞第35-37页
     ·中间纺锤体微管骨架参与调控分裂沟内移速度第37-39页
     ·中间纺锤体结构的完整性对核膜重建事件的发生是必须的第39-40页
   ·讨论第40-43页
第4章 中间纺锤体的组装调控胞质分裂和有丝分裂退出的分子机制第43-57页
   ·材料与方法第44-46页
     ·细胞培养第44页
     ·免疫荧光第44页
     ·CALI处理网格玻片定位单细胞及跟踪免疫荧光实验流程第44页
     ·脱氧胸苷双阻断法细胞周期同步化和siRNA转染实验流程第44-45页
     ·激光共聚焦显微镜观察第45页
     ·免疫印记分析第45-46页
   ·实验结果与分析第46-54页
     ·后期A破坏中间纺锤体结构的组装导致RhoA定位紊乱第46-47页
     ·中间纺锤体结构的完整性和CyclinB1没有直接关系第47-49页
     ·后期破坏中间纺锤体结构的组装导致周期蛋白B3延迟降解第49-51页
     ·后期破坏中间纺锤体结构可引起AuroraB和INCENP定位紊乱,导致染色体无法解凝缩第51-54页
   ·讨论第54-57页
全文小结第57-58页
参考文献第58-67页
附录一 实验仪器第67-68页
附录二 主要试剂配方第68-69页
附录三 主要试剂及材料第69-70页
在读期间发表的学术论文及研究成果第70-71页
致谢第71页

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