| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一篇 金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白Set11的结构与功能研究 | 第12-68页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 超抗原蛋白和超抗原样蛋白 | 第13-15页 |
| 1.2.1 超抗原蛋白和超抗原样蛋白概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 超抗原样蛋白的分类 | 第14-15页 |
| 1.3 超抗原样蛋白SSL的结构与功能研究 | 第15-23页 |
| 1.3.1 超抗原样蛋白Set3的结构与功能研究 | 第15-16页 |
| 1.3.2 SSL5、SSL11、SSLA及唾液酸路易斯酸X的结构与功能研究 | 第16-19页 |
| 1.3.3 SSL7与免疫球蛋白IgA1的Fc片段及补体C5的结构与功能研究 | 第19-21页 |
| 1.3.4 超抗原样蛋白SSL3与Toll样受体2(TLR2)的结构与功能研究 | 第21-23页 |
| 1.4 选题意义和研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第24-40页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1.1 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.1.2 实验质粒、菌株和培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 Sa-Set11表达质粒的构建 | 第26-30页 |
| 2.2.1 PCR反应体系和程序 | 第27-28页 |
| 2.2.2 PCR产物和载体的双酶切反应 | 第28页 |
| 2.2.3 连接反应 | 第28页 |
| 2.2.4 转化反应 | 第28-29页 |
| 2.2.5 重组质粒菌落PCR鉴定、质粒DNA的提取和质粒PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 Set11截短体质粒构建 | 第30-31页 |
| 2.4 蛋白表达 | 第31-34页 |
| 2.4.1 可溶性蛋白表达条件的筛选和优化 | 第31-33页 |
| 2.4.2 蛋白的大量表达 | 第33-34页 |
| 2.5 Set11及其截短体蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| 2.6 蛋白酶解实验 | 第35页 |
| 2.7 蛋白质赖氨酸甲基化处理 | 第35-36页 |
| 2.8 Set11晶体的初筛和优化 | 第36-37页 |
| 2.8.1 Set11晶体的初筛 | 第36页 |
| 2.8.2 晶体生长条件的优化 | 第36-37页 |
| 2.9 鉴定Set11可能的相互作用蛋白 | 第37-40页 |
| 2.9.1 CNBr-Pull down实验 | 第37-40页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第40-64页 |
| 3.1 重组表达质粒的构建和蛋白试表达 | 第40-41页 |
| 3.2 Set11蛋白、截短体蛋白的纯化 | 第41-44页 |
| 3.3 Set11晶体生长 | 第44-49页 |
| 3.4 Set11与SSL1-14多序列比对 | 第49-51页 |
| 3.5 Set11同源结构模型的构建 | 第51-52页 |
| 3.6 Set11-C5复合物同源结构模型的构建 | 第52-53页 |
| 3.7 鉴定人血/血清中Set11可能的相互作用蛋白 | 第53-62页 |
| 3.7.1 通过CNBr-Pull down实验鉴定相互作用蛋白 | 第54-62页 |
| 3.8 本章小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 第二篇 E3泛素连接酶TRAIP蛋白RING Domain结构和功能研究 | 第68-94页 |
| 第一章 绪论 | 第68-78页 |
| 1.1 引言 | 第68-69页 |
| 1.2 E3泛素连接酶TRAIP蛋白 | 第69-74页 |
| 1.2.1 E3泛素连接酶TRAIP蛋白概述 | 第69-71页 |
| 1.2.2 E3泛素连接酶参与蛋白泛素化过程 | 第71-73页 |
| 1.2.3 E3泛素连接酶TRAIP蛋白在增殖和分化中的作用 | 第73-74页 |
| 1.3 E3泛素连接酶TRAIP蛋白RING Domain | 第74-76页 |
| 1.3.1 E3泛素连接酶TRAIP蛋白RING Domain在不同物种中的保守性 | 第74页 |
| 1.3.2 E3泛素连接酶TRAIP蛋白RING Domain在自泛素化中的作用 | 第74-76页 |
| 1.4 选题意义和研究内容 | 第76-78页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第78-82页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第78页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第78页 |
| 2.1.1.1 实验试剂 | 第78页 |
| 2.1.1.2 实验质粒、菌株和培养基 | 第78页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第78页 |
| 2.2 TRAIP蛋白RING Domain表达质粒的构建 | 第78页 |
| 2.3 TRAIP蛋白RING Domain截短体质粒构建 | 第78-79页 |
| 2.4 蛋白表达 | 第79页 |
| 2.4.1 可溶性蛋白表达条件的筛选和优化 | 第79页 |
| 2.4.2 小量试表达检测 | 第79页 |
| 2.5 蛋白表达及纯化 | 第79-80页 |
| 2.6 蛋白酶解实验 | 第80页 |
| 2.7 晶体筛选 | 第80-82页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第82-92页 |
| 3.1 重组表达质粒的构建和蛋白试表达 | 第82-83页 |
| 3.2 TRAIP蛋白RING Domain截短体蛋白纯化 | 第83-87页 |
| 3.3 TRAIP蛋白RING Domain晶体生长 | 第87-90页 |
| 3.4 本章小结 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
