| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-34页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 辅酶Q_(10)的结构与理化性质 | 第13-14页 |
| 1.3 辅酶Q_(10)的生理功能及应用 | 第14-16页 |
| 1.3.1 辅酶Q_(10)的生理功能 | 第14-15页 |
| 1.3.2 辅酶Q_(10)的应用 | 第15-16页 |
| 1.3.2.1 保护心肌 | 第15页 |
| 1.3.2.3 辅助治疗充血性心力衰竭 | 第15-16页 |
| 1.3.2.4 治疗心脏病 | 第16页 |
| 1.3.2.5 治疗肿瘤 | 第16页 |
| 1.3.2.6 其它方面的应用 | 第16页 |
| 1.4 辅酶Q_(10)生产方法 | 第16-20页 |
| 1.4.1 化学合成法 | 第17页 |
| 1.4.2 提取法 | 第17页 |
| 1.4.3 微生物合成法 | 第17-20页 |
| 1.5 生物合成辅酶Q_(10)机制 | 第20-25页 |
| 1.5.1 辅酶Q_(10)的生物合成途径 | 第20-21页 |
| 1.5.2 辅酶Q_(10)生物合成关键酶及其基因 | 第21-23页 |
| 1.5.3 诱变育种 | 第23-24页 |
| 1.5.4 基因工程菌构建 | 第24-25页 |
| 1.5.5 基因工程植物产辅酶Q_(10) | 第25页 |
| 1.6 论文研究背景及意义 | 第25-26页 |
| 1.7 论文研究内容及创新点 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 产辅酶Q_(10)微生物菌种的筛选、鉴定 | 第34-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-38页 |
| 2.1.1 菌种来源 | 第34-35页 |
| 2.1.2 主要药品 | 第35-36页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.5 培养基 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.2.1 平板初选 | 第38页 |
| 2.2.2 摇瓶复筛 | 第38页 |
| 2.2.3 辅酶Q_(10)的提取方法 | 第38-39页 |
| 2.2.4 产品检测 | 第39页 |
| 2.2.4.1 辅酶Q_(10)检测方法 | 第39页 |
| 2.2.4.2 辅酶Q_(10)标准曲线的制作 | 第39页 |
| 2.2.5 菌体生物量的测定 | 第39页 |
| 2.2.6 产辅酶Q_(10)菌株的鉴定 | 第39-43页 |
| 2.2.6.1 菌种的形态观察 | 第39-40页 |
| 2.2.6.1.1 革兰氏染色 | 第39-40页 |
| 2.2.6.1.2 透射电镜观察 | 第40页 |
| 2.2.6.2 菌种常规生理生化反应研究 | 第40-42页 |
| 2.2.6.3 Biolog微生物鉴定系统鉴定 | 第42页 |
| 2.2.6.4 16S rDNA的扩增及序列测定 | 第42-43页 |
| 2.2.6.5 系统发育树的构建 | 第43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-51页 |
| 2.3.1 辅酶Q_(10)标准曲线 | 第43-44页 |
| 2.3.2 筛选结果 | 第44页 |
| 2.3.3 CA8菌株的鉴定 | 第44-51页 |
| 2.3.3.1 形态观察 | 第44-46页 |
| 2.3.3.1.1 菌落形态 | 第44-45页 |
| 2.3.3.1.2 革兰氏染色 | 第45页 |
| 2.3.3.1.3 透射电镜观察 | 第45-46页 |
| 2.3.3.2 生理生化特征 | 第46-47页 |
| 2.3.3.3 生长条件 | 第47页 |
| 2.3.3.4 Biolog微生物鉴定系统结果 | 第47-49页 |
| 2.3.3.5 16S rDNA序列测定结果 | 第49-51页 |
| 2.3.3.6 基于16S rDNA的系统进化分析结果 | 第51页 |
| 2.4 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第三章 CA8菌株产辅酶Q_(10)摇瓶发酵条件优化 | 第53-68页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-56页 |
| 3.1.1 菌种来源 | 第53-54页 |
| 3.1.2 主要药品 | 第54-55页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 3.1.4 培养基 | 第55-56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.2.1 辅酶Q_(10)的提取与检测 | 第56页 |
| 3.2.2 生物量标准曲线的制作 | 第56页 |
| 3.2.3 培养基条件对发酵的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.3.1 碳源对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.3.2 氮源对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第57页 |
| 3.2.4 发酵条件对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.4.1 温度对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第57页 |
| 3.2.4.2 接种量对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.4.3 装液量对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第58页 |
| 3.2.4.4 初始pH值对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第58页 |
| 3.2.4.5 发酵时间对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第58页 |
| 3.3 实验结果 | 第58-66页 |
| 3.3.1 生物量标准曲线 | 第58-59页 |
| 3.3.2 培养基条件对发酵的影响 | 第59-62页 |
| 3.3.2.1 碳源对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.2.2 氮源对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第60-62页 |
| 3.3.3 发酵条件对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第62-65页 |
| 3.3.3.1 温度对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第62页 |
| 3.3.3.2 接种量对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.3.3 装液量对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.3.4 初始pH值对辅酶Q_(10)产量的影响 | 第64页 |
| 3.3.3.5 发酵时间对辅酶Q_(10)发酵的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.4 产辅酶Q_(10)菌种比较 | 第65-66页 |
| 3.4 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| 第四章 产辅酶Q_(10)菌种代谢途径中关键酶基因的克隆研究 | 第68-84页 |
| 4.1 实验材料 | 第69-72页 |
| 4.1.1 菌种和质粒 | 第69-70页 |
| 4.1.2 主要药品 | 第70-71页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第71页 |
| 4.1.4 主要试剂和培养基 | 第71-72页 |
| 4.1.5 生物化学试剂及工具酶 | 第72页 |
| 4.2 实验方法 | 第72-78页 |
| 4.2.1 基因组DNA提取 | 第72-73页 |
| 4.2.2 辅酶Q_(10)生物合成关键酶基因dps、ubiA引物设计 | 第73-74页 |
| 4.2.3 辅酶Q_(10)生物合成关键酶基因dps、ubiA的PCR扩增 | 第74-75页 |
| 4.2.4 电泳检测PCR产物 | 第75页 |
| 4.2.5 凝胶回收纯化PCR产物 | 第75页 |
| 4.2.6 E.coli DH5α感受态的制备 | 第75-76页 |
| 4.2.7 目的基因转化 | 第76-77页 |
| 4.2.8 蓝白斑筛选阳性单菌落 | 第77页 |
| 4.2.9 菌落PCR验证及目的基因测序 | 第77页 |
| 4.2.10 目的基因测序比较分析 | 第77-78页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第78-82页 |
| 4.3.1 基因组DNA的提取及PCR扩增 | 第78-79页 |
| 4.3.2 辅酶Q_(10)生物合成关键酶基因dps和ubiA的克隆 | 第79-81页 |
| 4.3.3 测序结果与序列分析 | 第81-82页 |
| 4.4 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第五章 总结与展望 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 研究生阶段发表论文情况 | 第86页 |
