| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| 1.1 香蕉枯萎病的研究现状 | 第8-9页 |
| 1.2 尖孢镰刀菌的侵染过程 | 第9-10页 |
| 1.3 无土栽培的评述 | 第10-12页 |
| 1.3.1 无土栽培的发展历史 | 第10-11页 |
| 1.3.2 中国无土栽培的发展历史 | 第11页 |
| 1.3.3 无土栽培技术的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.4 水培概况 | 第12-16页 |
| 1.4.1 水培的发展历史 | 第12-13页 |
| 1.4.2 水培的特点 | 第13-15页 |
| 1.4.3 水培技术的研究 | 第15-16页 |
| 1.5 香蕉研究概况 | 第16-17页 |
| 1.5.1 香蕉的产业及分布 | 第16页 |
| 1.5.2 香蕉种苗生产技术发展 | 第16-17页 |
| 1.6 基因敲除在真菌基因功能中的研究 | 第17-18页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.8 技术路线 | 第19-20页 |
| 1.8.1 香蕉枯萎病水培致病检测体系 | 第19页 |
| 1.8.2 FOC4B-007基因功能分析 | 第19-20页 |
| 2 香蕉枯萎病菌水培致病体系的构建 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 香蕉巴西苗静置水培方法的建立 | 第20-21页 |
| 2.2.1.1 水培香蕉巴西苗不同营养液配方筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.1.2 BXM配方不同离子强度筛选 | 第21页 |
| 2.2.1.3 不同pH筛选 | 第21页 |
| 2.2.1.4 不同时间间隔更新培养液实验 | 第21页 |
| 2.2.1.5 指标参数的测定 | 第21页 |
| 2.2.2 病原菌在土壤、土壤浸出液、水、营养液条件下的存活 | 第21-22页 |
| 2.2.3 水培致病性体系的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.3.1 病原菌浇菌浓度、周期的选择 | 第22页 |
| 2.2.3.2 水培与土培条件下的致病性比较 | 第22-23页 |
| 2.3 试验结果与分析 | 第23-35页 |
| 2.3.1 水培香蕉巴西苗静置水培体系的构建 | 第23-31页 |
| 2.3.1.1 水培香蕉巴西苗不同营养液配方筛选 | 第23-26页 |
| 2.3.1.2 BXM配方不同离子强度筛选 | 第26-28页 |
| 2.3.1.3 不同PH筛选 | 第28-29页 |
| 2.3.1.4 不同时间间隔更新培养液实验 | 第29-31页 |
| 2.3.2 香蕉枯萎病菌水培致病体系 | 第31-35页 |
| 2.3.2.1 病原菌在土壤、土壤浸出液、水、营养液条件下的存活 | 第31-32页 |
| 2.3.2.2 水培治病体系病原菌浇菌浓度、周期的筛选 | 第32页 |
| 2.3.2.3 水培和土培的致病性比较 | 第32-35页 |
| 3 尖孢镰刀菌FOC4-007基因的敲除及功能探讨 | 第35-59页 |
| 3.1 材料、试剂、仪器及培养基 | 第35-37页 |
| 3.1.1 材料 | 第35页 |
| 3.1.2 试剂、仪器及耗材 | 第35-36页 |
| 3.1.3 培养基及主要试剂配方 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-50页 |
| 3.2.1 FOC4B_007基因缺失突变体的获得 | 第37-50页 |
| 3.2.1.1 PCR验证目的基因 | 第37-38页 |
| 3.2.1.2 目的基因序列分析 | 第38页 |
| 3.2.1.3 FOC4B_007基因的敲除载体构建 | 第38-43页 |
| 3.2.1.4 敲除载体的FOC4转化 | 第43-45页 |
| 3.2.1.5 转化子的PCR鉴定及保存 | 第45-49页 |
| 3.2.1.6 FOC4B_007基因缺失突变体表型分析 | 第49-50页 |
| 3.2.1.6.1 FOC4B_007基因的缺失突变体的菌落形态和生长速率的测定 | 第49页 |
| 3.2.1.6.2 FOC4B-007基因缺失突变体的孢子、菌丝形态观察 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-59页 |
| 3.3.1 基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分析结果 | 第50页 |
| 3.3.2 基因敲除载体的构建 | 第50-52页 |
| 3.3.2.1 目的基因PCR验证 | 第50-51页 |
| 3.3.2.2 同源臂的克隆 | 第51-52页 |
| 3.3.2.3 FOC4B_007AB-pCX62的酶切鉴定 | 第52页 |
| 3.3.3 原生质体转化 | 第52-56页 |
| 3.3.3.1 原生质体转化片段的获得 | 第52-53页 |
| 3.3.3.2 转化子的PCR验证 | 第53-55页 |
| 3.3.3.3 突变体的RT-PCR检测 | 第55-56页 |
| 3.3.4 突变体的生物学特性分析 | 第56-59页 |
| 3.3.4.1 突变体菌落形态观察及生长速率的测定 | 第56-57页 |
| 3.3.4.2 突变体的孢子及菌丝的形态观察 | 第57页 |
| 3.3.4.3 突变体菌液及其粗提液的致病力测定 | 第57-58页 |
| 3.3.4.4 香蕉枯萎病菌水培致病体系检测基因敲除转化子的致病力 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 4.1 香蕉苗水培体系的构建 | 第59页 |
| 4.2 病原菌在不同条件下的存活 | 第59-60页 |
| 4.3 水培致病体系的构建 | 第60页 |
| 4.4 转化子的获得和验证 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 6 参考文献 | 第62-65页 |
| 附录1 本文所用的引物列表 | 第65-66页 |
| 附录2 香蕉水培相关图片 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
