摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第10页 |
第一章 文献综述 | 第10-15页 |
1. 鱼类IGF的结构及功能 | 第11-12页 |
1.1 IGF的结构 | 第11页 |
1.2 IGF-I 的功能 | 第11-12页 |
2. 鱼类IGF的受体及结合蛋白 | 第12-13页 |
3. 鱼类IGF的制备技术 | 第13-14页 |
4. 哲罗鲑的研究现状 | 第14-15页 |
第二章 哲罗鲑胰岛素样生长因子-I(IGF-I)cDNA分子克隆、序列分析及组织表达 | 第15-26页 |
1 实验材料 | 第16-18页 |
1.1 实验用鱼 | 第16页 |
1.2 仪器 | 第16页 |
1.3 试剂用品 | 第16页 |
1.4 试剂配方 | 第16-18页 |
2 实验方法 | 第18-20页 |
2.1 引物设计与合成 | 第18页 |
2.2 IGF-I基因克隆 | 第18-19页 |
2.3 IGF-I基因的序列分析 | 第19-20页 |
2.4 IGF-I组织表达情况分析 | 第20页 |
3 结果与分析 | 第20-25页 |
3.1 哲罗鲑IGF-I基因片段的克隆 | 第20-21页 |
3.2 哲罗鲑IGF-I基因的氨基酸结构分析 | 第21-22页 |
3.3 哲罗鲑IGF-I基因序列的系统进化分析 | 第22-24页 |
3.4 哲罗鲑IGF-I的组织表达分析 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
第三章 哲罗鲑胰岛素样生长因子-I的原核表达及活性鉴定 | 第26-37页 |
1 实验材料 | 第27页 |
1.1 实验用鱼 | 第27页 |
1.2 仪器 | 第27页 |
1.3 试剂用品 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-31页 |
2.1 引物设计与合成 | 第27-29页 |
2.2 IGF-I基因的克隆 | 第29页 |
2.3 IGF-I/pS重组表达质粒的构建 | 第29页 |
2.4 重组IGF-I蛋白的表达 | 第29页 |
2.5 重组IGF-I蛋白的纯化 | 第29-30页 |
2.6 IGF-I蛋白免疫学检测 | 第30页 |
2.7 IGF-I蛋白生物活性检测 | 第30页 |
2.8 IGF-I蛋白细胞水平实验 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-36页 |
3.1 IGF-I基因的克隆 | 第31-32页 |
3.2 IGF-I/pS重组质粒的构建 | 第32-33页 |
3.3 重组IGF-I蛋白在E.coli Rosetta中的表达 | 第33-34页 |
3.4 重组IGF-I蛋白的纯化 | 第34页 |
3.5 IGF-I蛋白的免疫学鉴定 | 第34-35页 |
3.6 IGF-I蛋白的生物活性鉴定 | 第35页 |
3.7 IGF-I蛋白细胞水平实验 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-37页 |
4.1 蛋白的诱导表达分析 | 第36-37页 |
4.2 蛋白的定性及生物活性分析 | 第37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
硕士研究生期间发表的论文 | 第48页 |