| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要英文缩略词 | 第8-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-17页 |
| 1.1 耐辐射奇球菌简介 | 第13-15页 |
| 1.2 立项依据 | 第15-17页 |
| 第2章 耐辐射奇球菌PprM蛋白的表达与纯化 | 第17-33页 |
| 2.1 材料及仪器设备 | 第17-21页 |
| 2.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.4 培养基、生化试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 DR基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 E.coli质粒DNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 DNA片段的纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 大肠杆菌感受态的制备 | 第23页 |
| 2.2.5 大肠杆菌细胞的转化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 PprM蛋白过表达载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.7 PprM蛋白的表达与纯化 | 第27-29页 |
| 2.3 结果和分析 | 第29-32页 |
| 2.3.1 DR基因组DNA的提取结果 | 第29页 |
| 2.3.2 PprM蛋白过表达载体构建的结果 | 第29-30页 |
| 2.3.3 PprM蛋白的表达与纯化结果 | 第30-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 耐辐射奇球菌PprM蛋白靶RNA的筛选 | 第33-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第33-35页 |
| 3.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第33-34页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第34页 |
| 3.1.4 主要生化试剂的配制 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-43页 |
| 3.2.1 DR总RNA的提取 | 第35页 |
| 3.2.2 总RNA中DNA的去除 | 第35-36页 |
| 3.2.3 RNA pull-Down | 第36-37页 |
| 3.2.4 RNA 3'末端接头的连接 | 第37-38页 |
| 3.2.5 5'末端接头的连接 | 第38-40页 |
| 3.2.6 逆转录 | 第40-41页 |
| 3.2.7 PCR反应 | 第41-42页 |
| 3.2.8 TA克隆 | 第42-43页 |
| 3.3 结果和分析 | 第43-51页 |
| 3.3.1 PprM蛋白氨基酸序列分析 | 第43-44页 |
| 3.3.2 DR总RNA提取结果 | 第44页 |
| 3.3.3 Inner PCR结果 | 第44-45页 |
| 3.3.4 测序结果 | 第45-51页 |
| 3.4 本章小结 | 第51-53页 |
| 第4章 PprM蛋白与靶RNA相互作用的验证 | 第53-61页 |
| 4.1 材料和方法 | 第54页 |
| 4.1.1 实验所用菌株、质粒及培养条件 | 第54页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第54页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 PCR扩增体外转录模板 | 第54-55页 |
| 4.2.2 体外转录制备pprM的 5'UTR序列 | 第55-56页 |
| 4.2.3 凝胶阻滞实验 | 第56页 |
| 4.3 结果和分析 | 第56-59页 |
| 4.3.1 生物信息分析PprM与靶RNA的相互作用 | 第56-58页 |
| 4.3.2 体外转录模板PCR扩增结果 | 第58页 |
| 4.3.3 pprM 5'-UTR片段体外转录结果 | 第58-59页 |
| 4.3.4 凝胶迁移实验结果 | 第59页 |
| 4.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第5章 讨论 | 第61-65页 |
| 第6章 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 文献综述 | 第73-85页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
