摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-21页 |
1.1 miRNA的研究进展 | 第8-13页 |
1.1.1 miRNA的发现历程 | 第8-9页 |
1.1.2 miRNA的产生过程 | 第9-10页 |
1.1.3 miRNA的表达差异性 | 第10-11页 |
1.1.4 miRNA的功能与作用机制 | 第11-12页 |
1.1.5 miRNA的进化和保守性研究 | 第12-13页 |
1.2 miRNA及其靶标研究 | 第13-16页 |
1.2.1 生物信息学预测 | 第13-15页 |
1.2.2 双荧光素酶报告系统 | 第15-16页 |
1.2.3 检测靶标mRNA或蛋白水平的变化 | 第16页 |
1.3 果蝇及其miRNA的研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 果蝇的研究进展 | 第16-17页 |
1.3.2 miRNA的研究 | 第17页 |
1.3.3 miRNA-92的研究 | 第17-18页 |
1.3.4 靶基因kay的研究背景 | 第18页 |
1.4 研究意义及创新点 | 第18-19页 |
1.5 论文技术路线 | 第19-21页 |
第二章 果蝇miRNA-92a进化保守性分析 | 第21-29页 |
2.1 前言 | 第21页 |
2.2 数据获取与分析 | 第21-23页 |
2.2.1 数据的收集 | 第21-22页 |
2.2.2 miRNA-92a保守性分析流程 | 第22-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-28页 |
2.3.1 miRNA-92a的保守性分析 | 第23-24页 |
2.3.2 Dme-miRNA-92a不同物种中同源基因定位 | 第24-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 miRNA-92a靶基因功能的生物信息学分析 | 第29-36页 |
3.1 前言 | 第29页 |
3.2 数据获取与分析 | 第29-31页 |
3.2.1 数据的收集 | 第29页 |
3.2.2 靶基因功能注释的生物信息学分析流程 | 第29-31页 |
3.2.3 不同软件对靶标关系的检验 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-35页 |
3.3.1 靶基因同源性分析结果 | 第31-32页 |
3.3.2 靶基因分类与功能注释 | 第32-33页 |
3.3.3 不同软件对靶关系的验证结果 | 第33-35页 |
3.4 讨论 | 第35-36页 |
第四章 Dme-miRNA-92a和kay靶标关系的验证 | 第36-56页 |
4.1 实验材料和仪器 | 第36-38页 |
4.1.1 实验材料培养 | 第36-37页 |
4.1.2 实验试剂和仪器 | 第37-38页 |
4.2 实验方法 | 第38-50页 |
4.2.1 果蝇基因组DNA和RNA的提取 | 第38-42页 |
4.2.2 分子克隆与构建载体 | 第42-47页 |
4.2.3 双荧光素酶报告系统实验 | 第47-50页 |
4.2.4 荧光定量PCR | 第50页 |
4.3 结果与分析 | 第50-55页 |
4.3.1 提取黑腹果蝇总RNA | 第50-51页 |
4.3.2 miRNA-92a前体和靶基因kay3'UTR的克隆 | 第51-52页 |
4.3.3 酶切实验 | 第52-53页 |
4.3.4 转染PAC-miRNA-92a后的miRNA-92a定量 | 第53-54页 |
4.3.5 双荧光素酶报告系统 | 第54-55页 |
4.4 讨论 | 第55-56页 |
第五章 结论及展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |