| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩写一览表 | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-18页 |
| 第2章 2型猪链球菌htpsC与宿主细胞外基质作用的研究 | 第18-32页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第18-21页 |
| 2.1.1 实验菌株、质粒和培养基 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.1 S.suis 2 05ZYH33基因组htpsC基因序列分析 | 第21页 |
| 2.2.2 htpsC基因的克隆和表达 | 第21-22页 |
| 2.2.3 重组蛋白HtpsC的纯化 | 第22页 |
| 2.2.4 兔抗HtpsC多克隆抗体的制备 | 第22页 |
| 2.2.5 Western blot分析兔抗HtpsC多克隆抗体 | 第22-23页 |
| 2.2.6 重组HtpsC蛋白与宿主细胞外基质的相互作用 | 第23页 |
| 2.2.7 菌体粘附宿主细胞外基质ECM的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第24页 |
| 2.3 结果 | 第24-31页 |
| 2.3.1 S.suis 2 05ZYH33基因组htpsC序列分析 | 第24-25页 |
| 2.3.2 获得高纯度的重组蛋白HtpsC | 第25-26页 |
| 2.3.3 获得高效价的兔抗HtpsC多克隆抗体 | 第26页 |
| 2.3.4 Western blot鉴定HtpsC与兔抗HtpsC多克隆抗体的反应 | 第26-27页 |
| 2.3.5 HtpsC是S.suis 2的一个表面粘附素,属于微生物MSCRAMMs家族 | 第27-28页 |
| 2.3.6 HtpsC是一个纤连蛋白和层粘连蛋白结合蛋白 | 第28-29页 |
| 2.3.7 htpsC能够介导S.suis 2粘附宿主纤连蛋白和层粘连蛋白 | 第29-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-32页 |
| 第3章 HtpsC蛋白C端LRR结构域功能的研究 | 第32-44页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.1 实验菌株、质粒和培养基 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 S.suis 2 htpsC基因C端LRR结构域(lrr)片段的引物设计 | 第33页 |
| 3.2.2 lrr片段的PCR克隆 | 第33页 |
| 3.2.3 lrr片段的T克隆 | 第33-34页 |
| 3.2.4 重组表达载体pET28a-lrr的构建与鉴定 | 第34页 |
| 3.2.5 重组结构域蛋白rLRR的诱导表达与纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.6 兔抗rLRR多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.7 Western blot分析兔抗rLRR多克隆抗体 | 第36页 |
| 3.2.8 rLRR蛋白与宿主细胞外基质的相互作用 | 第36-37页 |
| 3.2.9 统计学分析 | 第37页 |
| 3.3 结果 | 第37-42页 |
| 3.3.1 S.suis 2 htpsC基因C端lrr的编码区设计特异性引物 | 第37页 |
| 3.3.2 构建pET28a-lrr重组表达载体 | 第37-38页 |
| 3.3.3 获得高纯度的重组结构域蛋白rLRR | 第38-40页 |
| 3.3.4 获得高效价的兔抗rLRR多克隆抗体 | 第40页 |
| 3.3.5 rLRR重组蛋白与兔抗rLRR多克隆抗体的反应 | 第40-41页 |
| 3.3.6 LRR结构域能够介导HtpsC与宿主细胞外基质ECM结合 | 第41页 |
| 3.3.7 LRR结构域主要结合纤连蛋白 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 HtpsC蛋白N端组氨酸三聚体结构域功能的研究 | 第44-55页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 S.suis 2 htpsC基因N端HTP结构域(htp)片段的引物设计 | 第44页 |
| 4.2.2 htp片段的PCR克隆 | 第44-45页 |
| 4.2.3 htp片段的T克隆 | 第45页 |
| 4.2.4 重组表达载体pET28a-htp的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.5 重组结构域蛋白rHTP的诱导表达与纯化 | 第46-47页 |
| 4.2.6 兔抗rHTP多克隆抗体的制备 | 第47页 |
| 4.2.7 Western blot分析兔抗rHTP多克隆抗体 | 第47页 |
| 4.2.8 重组rHTP蛋白与宿主细胞外基质的相互作用 | 第47-48页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第48页 |
| 4.3 结果 | 第48-53页 |
| 4.3.1 S.suis2 htpsC基因N端htp的编码区设计特异性引物 | 第48页 |
| 4.3.2 构建pET28a-htp重组表达载体 | 第48-49页 |
| 4.3.3 获得高纯度的重组结构域蛋白rHTP | 第49-51页 |
| 4.3.4 获得高效价的兔抗rHTP多克隆抗体 | 第51页 |
| 4.3.5 rHTP重组蛋白与兔抗rHTP多克隆抗体的反应 | 第51页 |
| 4.3.6 rHTP能够介导HtpsC与宿主细胞外基质ECM结合 | 第51-52页 |
| 4.3.7 rHTP结构域主要结合层粘连蛋白 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
