摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英文缩写对照 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 乙型肝炎病毒(HBV) | 第15-16页 |
1.2 HBV的复制过程及急、慢性乙型肝炎研究现状 | 第16-18页 |
1.3 APOBEC3G基因 | 第18页 |
1.4 APOBEC3G基因与HIV、HCV、HBV的研究现状 | 第18-19页 |
1.5 干扰素及干扰素的抗病毒机理 | 第19-20页 |
1.6 干扰素的作用受体及JAK-STAT信号通路 | 第20-22页 |
1.7 本实验的研究目的 | 第22-23页 |
第2章 材料和方法 | 第23-35页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 细胞系和菌株 | 第23页 |
2.1.2 血液样本 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.5 试剂配制 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-35页 |
2.2.1 构建APOBEC3G基因真核表达载体 | 第26-29页 |
2.2.2 构建STAT3的sgRNA表达载体 | 第29-30页 |
2.2.3 细胞培养和转染 | 第30页 |
2.2.4 筛选STAT3基因敲除细胞系 | 第30-31页 |
2.2.5 质粒提取 | 第31页 |
2.2.6 qPCR | 第31-32页 |
2.2.7 Western Blot | 第32-33页 |
2.2.8 ELISA检测HBeAg、HBsAg | 第33-34页 |
2.2.9 从全血中分离血清和PBMC | 第34页 |
2.2.10 统计学方法 | 第34-35页 |
第3章 结果 | 第35-44页 |
3.1 Ⅰ型干扰素诱导A3G基因表达的机制 | 第35-39页 |
3.1.1 Ⅰ型干扰素上调A3G基因表达 | 第35-36页 |
3.1.2 运用CRISPR/Cas9技术构建STAT3敲除细胞系 | 第36-37页 |
3.1.3 抑制STAT3减弱I型干扰素对A3G的诱导作用 | 第37-38页 |
3.1.4 敲除STAT3基因A3G的诱导表达下降 | 第38-39页 |
3.2 A3G抑制HBV复制 | 第39-41页 |
3.2.1 构建真核基因表达载体HA-VR1012-A3G | 第39-40页 |
3.2.2 在HepG2细胞中过表达A3G能够抑制HBV复制 | 第40-41页 |
3.3 HBV对A3G的调控机制 | 第41-44页 |
3.3.1 在乙肝患者体内A3G的表达比正常人低 | 第41页 |
3.3.2 HBsAg通过作用于STAT3-Ser727抑制A3G表达 | 第41-44页 |
第4章 讨论 | 第44-46页 |
第5章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |