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棉花纤维伸长相关基因GbEXPA2和GbEXPATR的克隆及功能分析

摘要第7-10页
Abstract第10-12页
缩略语表第13-14页
1 文献综述第14-32页
    1.1 植物细胞壁的研究第14-19页
        1.1.1 纤维素第14-15页
        1.1.2 半纤维素第15-17页
        1.1.3 果胶第17-18页
        1.1.4 细胞壁蛋白第18-19页
    1.2 棉花纤维和细胞壁第19-25页
        1.2.1 棉花纤维发育的过程和特点第19-23页
        1.2.2 棉花纤维细胞壁及研究进展第23-25页
    1.3 Expansin蛋白的研究进展第25-31页
        1.3.1 Expansin的分类与蛋白结构第26-27页
        1.3.2 Expansin的作用机制第27-28页
        1.3.3 Expansin功能的研究进展第28-30页
        1.3.4 Expansin在棉花中的研究进展第30-31页
    1.4 本研究的目的、意义及技术路线第31-32页
2 实验材料与方法第32-48页
    2.1 实验材料第32-33页
        2.1.1 植物材料第32页
        2.1.2 实验菌株及载体第32-33页
    2.2 实验方法第33-48页
        2.2.1 数据收集及分析第33-34页
        2.2.2 棉花基因组DNA的提取及Southern杂交第34-35页
        2.2.3 基因组DNA序列的克隆第35-36页
        2.2.4 棉纤维总RNA的提取及Northern杂交第36-37页
        2.2.5 实时定量PCR第37-38页
        2.2.6 表达载体的构建第38-42页
        2.2.7 棉花的遗传转化及检测第42页
        2.2.8 拟南芥的遗传转化及检测第42页
        2.2.9 转基因植株GUS蛋白的分析第42-44页
        2.2.10 石蜡切片第44-45页
        2.2.11 外源激素处理拟南芥转基因植株第45页
        2.2.12 棉花胚珠离体培养第45-46页
        2.2.13 拟南芥初生根及根毛长度的测量第46页
        2.2.14 纤维的长度测量及成熟纤维的品质鉴定第46-47页
        2.2.15 X-射线分析纤维素的结晶度第47页
        2.2.16 棉花纤维细胞壁多糖的成分分析第47页
        2.2.17 棉花转基因株系的Solexa测序第47-48页
3 结果与分析第48-85页
    3.1 GbEXPA2 和GbEXPATR基因的结构及表达分析第48-52页
        3.1.1 GbEXPA2 和GbEXPATR基因结构分析第48-50页
        3.1.2 GbEXPA2 和GbEXPATR的表达分析第50-52页
    3.2 GbEXPA2 和GbEXPATR基因的进化分析第52-59页
        3.2.1 Ga和Gr基因组中expansin家族成员分析第52-54页
        3.2.2 陆地棉 α-expansin基因的表达分析第54-56页
        3.2.3 GbEXPA2 和GbEXPATR是同源基因第56-59页
    3.3 GbEXPA2 和GbEXPATR的启动子分析第59-69页
        3.3.1 GbEXPA2 和GbEXPATR启动子的克隆和序列分析第59-62页
        3.3.2 GbEXPA2 和GbEXPATR启动子转录模式的分析第62-65页
        3.3.3 GbEXPA2 和GbEXPATR核心启动子区域的确定第65-67页
        3.3.4 拟南芥中GA和ABA对proGbEXPA2 的调控第67-69页
    3.4 GbEXPA2 和GbEXPATR在棉花纤维中的功能及作用机制第69-85页
        3.4.1 GbEXPA2 和GbEXPATR的亚细胞定位第69-71页
        3.4.2 超量表达GbEXPA2 和GbEXPATR能增加拟南芥初生根及根毛的长度第71-72页
        3.4.3 棉花expansin转基因材料分析第72-75页
        3.4.4 棉花expansin转基因材料的表型鉴定第75-79页
        3.4.5 GbEXPATR能恢复EXPA下调表达所引起的纤维变短第79-80页
        3.4.6 异源表达GbEXPATR影响棉花纤维次生壁相关基因的表达第80-82页
        3.4.7 异源表达GbEXPATR和Gb EXPA2 影响棉花纤维次生壁的结构及成分第82-85页
4 讨论第85-92页
    4.1 关于棉花中expansin超家族的分析第85页
    4.2 关于GbEXPA2 和GbEXPATR启动子的分析第85-87页
    4.3 α-expansin在棉花纤维细胞壁重塑过程中的作用第87-89页
    4.4 GbEXPATR可能是海岛棉纤维品质优于陆地棉的原因之一第89-90页
    4.5 展望第90-92页
参考文献第92-105页
Protocols第105-110页
附录第110-135页
攻读学位期间所发表的论文及专利申请第135-136页
致谢第136-137页

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