摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第14-32页 |
1.1 植物细胞壁的研究 | 第14-19页 |
1.1.1 纤维素 | 第14-15页 |
1.1.2 半纤维素 | 第15-17页 |
1.1.3 果胶 | 第17-18页 |
1.1.4 细胞壁蛋白 | 第18-19页 |
1.2 棉花纤维和细胞壁 | 第19-25页 |
1.2.1 棉花纤维发育的过程和特点 | 第19-23页 |
1.2.2 棉花纤维细胞壁及研究进展 | 第23-25页 |
1.3 Expansin蛋白的研究进展 | 第25-31页 |
1.3.1 Expansin的分类与蛋白结构 | 第26-27页 |
1.3.2 Expansin的作用机制 | 第27-28页 |
1.3.3 Expansin功能的研究进展 | 第28-30页 |
1.3.4 Expansin在棉花中的研究进展 | 第30-31页 |
1.4 本研究的目的、意义及技术路线 | 第31-32页 |
2 实验材料与方法 | 第32-48页 |
2.1 实验材料 | 第32-33页 |
2.1.1 植物材料 | 第32页 |
2.1.2 实验菌株及载体 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-48页 |
2.2.1 数据收集及分析 | 第33-34页 |
2.2.2 棉花基因组DNA的提取及Southern杂交 | 第34-35页 |
2.2.3 基因组DNA序列的克隆 | 第35-36页 |
2.2.4 棉纤维总RNA的提取及Northern杂交 | 第36-37页 |
2.2.5 实时定量PCR | 第37-38页 |
2.2.6 表达载体的构建 | 第38-42页 |
2.2.7 棉花的遗传转化及检测 | 第42页 |
2.2.8 拟南芥的遗传转化及检测 | 第42页 |
2.2.9 转基因植株GUS蛋白的分析 | 第42-44页 |
2.2.10 石蜡切片 | 第44-45页 |
2.2.11 外源激素处理拟南芥转基因植株 | 第45页 |
2.2.12 棉花胚珠离体培养 | 第45-46页 |
2.2.13 拟南芥初生根及根毛长度的测量 | 第46页 |
2.2.14 纤维的长度测量及成熟纤维的品质鉴定 | 第46-47页 |
2.2.15 X-射线分析纤维素的结晶度 | 第47页 |
2.2.16 棉花纤维细胞壁多糖的成分分析 | 第47页 |
2.2.17 棉花转基因株系的Solexa测序 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-85页 |
3.1 GbEXPA2 和GbEXPATR基因的结构及表达分析 | 第48-52页 |
3.1.1 GbEXPA2 和GbEXPATR基因结构分析 | 第48-50页 |
3.1.2 GbEXPA2 和GbEXPATR的表达分析 | 第50-52页 |
3.2 GbEXPA2 和GbEXPATR基因的进化分析 | 第52-59页 |
3.2.1 Ga和Gr基因组中expansin家族成员分析 | 第52-54页 |
3.2.2 陆地棉 α-expansin基因的表达分析 | 第54-56页 |
3.2.3 GbEXPA2 和GbEXPATR是同源基因 | 第56-59页 |
3.3 GbEXPA2 和GbEXPATR的启动子分析 | 第59-69页 |
3.3.1 GbEXPA2 和GbEXPATR启动子的克隆和序列分析 | 第59-62页 |
3.3.2 GbEXPA2 和GbEXPATR启动子转录模式的分析 | 第62-65页 |
3.3.3 GbEXPA2 和GbEXPATR核心启动子区域的确定 | 第65-67页 |
3.3.4 拟南芥中GA和ABA对proGbEXPA2 的调控 | 第67-69页 |
3.4 GbEXPA2 和GbEXPATR在棉花纤维中的功能及作用机制 | 第69-85页 |
3.4.1 GbEXPA2 和GbEXPATR的亚细胞定位 | 第69-71页 |
3.4.2 超量表达GbEXPA2 和GbEXPATR能增加拟南芥初生根及根毛的长度 | 第71-72页 |
3.4.3 棉花expansin转基因材料分析 | 第72-75页 |
3.4.4 棉花expansin转基因材料的表型鉴定 | 第75-79页 |
3.4.5 GbEXPATR能恢复EXPA下调表达所引起的纤维变短 | 第79-80页 |
3.4.6 异源表达GbEXPATR影响棉花纤维次生壁相关基因的表达 | 第80-82页 |
3.4.7 异源表达GbEXPATR和Gb EXPA2 影响棉花纤维次生壁的结构及成分 | 第82-85页 |
4 讨论 | 第85-92页 |
4.1 关于棉花中expansin超家族的分析 | 第85页 |
4.2 关于GbEXPA2 和GbEXPATR启动子的分析 | 第85-87页 |
4.3 α-expansin在棉花纤维细胞壁重塑过程中的作用 | 第87-89页 |
4.4 GbEXPATR可能是海岛棉纤维品质优于陆地棉的原因之一 | 第89-90页 |
4.5 展望 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-105页 |
Protocols | 第105-110页 |
附录 | 第110-135页 |
攻读学位期间所发表的论文及专利申请 | 第135-136页 |
致谢 | 第136-137页 |