| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献研究 | 第13-18页 |
| 1. HBV病原学 | 第13页 |
| 2. RNAI的概念及作用机制 | 第13-14页 |
| 3. RNAI在乙肝发病机理的研究 | 第14-15页 |
| 4. 诊断 | 第15页 |
| 5. 治疗 | 第15-17页 |
| 5.1 HBV感染的体外研究 | 第16页 |
| 5.2 HBV感染的体内研究 | 第16页 |
| 5.3 siRNA治疗的安全性 | 第16-17页 |
| 6. MiR-146A的生物学作用 | 第17页 |
| 7. 小结 | 第17-18页 |
| 第二章 MIR-146A真核表达载体的构建、鉴定及表达 | 第18-37页 |
| 1. 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1 细胞系 | 第18页 |
| 1.2 菌株与载体 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂及试剂盒 | 第18-19页 |
| 1.4 常用溶液的配制 | 第19-20页 |
| 1.5 主要仪器 | 第20页 |
| 2. 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.1 pmiR-146a真核表达载体的构建 | 第20-26页 |
| 2.2 鉴定pmiR-146a真核表达质粒 | 第26-27页 |
| 2.3 qPCR法检测细胞中miR-146a的表达 | 第27-30页 |
| 2.4 统计分析 | 第30页 |
| 3. 实验结果 | 第30-35页 |
| 3.1 鉴定pmiR-146a真核表达载体 | 第30-34页 |
| 3.2 荧光显微镜检测细胞内荧光蛋白表达情况 | 第34页 |
| 3.3 pmiR-146a真核表达质粒的表达 | 第34-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 MIR-146A对HBV复制的影响及机制研究 | 第37-47页 |
| 1. 实验材料 | 第37-38页 |
| 1.1 细胞及质粒 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第37-38页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第38页 |
| 1.4 主要仪器 | 第38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.1 乙型肝炎病毒表面抗原定量检测 | 第38-39页 |
| 2.2 乙型肝炎病毒e抗原定量检测 | 第39页 |
| 2.3 Western blot检测各组NF-κ B蛋白变化 | 第39-41页 |
| 2.4 ELISA检测各组细胞TGF-β分泌量变化 | 第41页 |
| 2.5 统计分析 | 第41-42页 |
| 3. 实验结果 | 第42-45页 |
| 3.1 miR-146a对HBsAg的作用 | 第42页 |
| 3.2 miR-146a对HBeAg的作用 | 第42-43页 |
| 3.3 miR-146a对NF-κ b蛋白影响 | 第43-44页 |
| 3.4 TGF-β表达量 | 第44-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 MIR-146A对肝癌细胞的影响 | 第47-56页 |
| 1. 实验材料 | 第47-48页 |
| 1.1 细胞系及质粒 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第47页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第47-48页 |
| 1.4 主要仪器 | 第48页 |
| 2. 实验方法 | 第48-52页 |
| 2.1 RT-PCR检测各组c-Myc mRNA变化 | 第48-50页 |
| 2.2 Western blot检测各组c-Myc蛋白变化 | 第50-51页 |
| 2.3 CCK-8检测细胞增殖活性 | 第51页 |
| 2.4 统计学分析 | 第51-52页 |
| 3. 结果 | 第52-54页 |
| 3.1 qPCR检测c-Myc mRNA表达量 | 第52-53页 |
| 3.2 western blot检测c-Myc蛋白表达量 | 第53页 |
| 3.3 HepG2.2.15细胞増殖能力 | 第53-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-56页 |
| 结语 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 在校期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 统计学审核证明 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
