摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
引言 | 第7-9页 |
第一章 实验材料 | 第9-13页 |
1.1 细胞株 | 第9页 |
1.2 菌株 | 第9页 |
1.3 实验器材 | 第9-10页 |
1.4 主要试剂耗材 | 第10页 |
1.5 主要试剂配制 | 第10-11页 |
1.6 Western blotting试剂配制 | 第11-13页 |
第二章 实验方法 | 第13-26页 |
2.1 IPTG诱导大肠杆菌中目的蛋白的表达及纯化 | 第13-17页 |
2.1.1 大肠杆菌的复苏 | 第13-14页 |
2.1.2 用Ni2+亲和柱对重组载脂蛋白进行纯化 | 第14页 |
2.1.3 分析表达的目的蛋白为何种形式存在 | 第14页 |
2.1.4 对浓缩后蛋白进行透析和蛋白浓度的测定 | 第14-15页 |
2.1.5 BCA法测蛋白 | 第15-16页 |
2.1.6 树脂再生 | 第16页 |
2.1.7 重组蛋白去内毒素 | 第16-17页 |
2.1.8 脂质体的包装 | 第17页 |
2.2 重组高密度脂蛋白抗炎作用的研究 | 第17-24页 |
2.2.1 实验细胞 | 第17-18页 |
2.2.2 实验分组 | 第18页 |
2.2.3 细胞形态学观察 | 第18页 |
2.2.4 荧光定量PCR引物设计 | 第18-19页 |
2.2.5 总RNA的提取 | 第19页 |
2.2.6 RNA琼脂糖电泳检测RNA纯度和完整性 | 第19页 |
2.2.7 cDNA的合成方法 | 第19-21页 |
2.2.8 Real-time PCR检测mRNA相对表达 | 第21页 |
2.2.9 ELISA试剂盒检测细胞培养夜中TNF-α 和IL-6 炎症因子的表达 | 第21-22页 |
2.2.10 Western blot检测ATF3在不同的重组HDL中的表达情况 | 第22-24页 |
2.3 统计学方法检测 | 第24-26页 |
第三章 实验结果 | 第26-31页 |
3.1 重组高密度脂蛋白的表达纯化分析 | 第26页 |
3.2 RAW264.7 细胞经LPS刺激后加入不同的高密度脂蛋白处理后细胞的形态学变化 | 第26-27页 |
3.3 重组高密度脂蛋白对细胞培养液中炎症因子TNF-ɑ和IL-6 表达水平的影响 | 第27-28页 |
3.4 不同高密度脂蛋白对RAW264.7 细胞中ATF3 mRNA相对表达量的影响 | 第28-29页 |
3.5 不同高密度脂蛋白对RAW264.7 细胞中ATF3mRNA相对表达量的影响 | 第29-31页 |
第四章 讨论 | 第31-34页 |
结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-41页 |
综述 | 第41-64页 |
参考文献 | 第51-64页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第64-65页 |
英文缩略词表 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |