| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 大豆异黄酮的功能 | 第11-12页 |
| 1.1.1 在人类健康和营养中的作用 | 第11页 |
| 1.1.2 在植物中的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 大豆异黄酮的结构和含量分布 | 第12-13页 |
| 1.2.1 大豆异黄酮的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 大豆异黄酮的含量分布 | 第13页 |
| 1.3 大豆异黄酮的生物合成途径 | 第13-17页 |
| 1.3.1 大豆异黄酮的代谢途径 | 第13-15页 |
| 1.3.2 大豆异黄酮合成的关键酶 | 第15-17页 |
| 1.4 农杆菌介导大豆遗传转化研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4.1 农杆菌介导大豆子叶节转化体系 | 第18页 |
| 1.4.2 影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素 | 第18-19页 |
| 1.4.3 大豆遗传转化在大豆异黄酮合成上的应用 | 第19页 |
| 1.5 立题依据 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-39页 |
| 2.1 试验材料及仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 仪器 | 第21页 |
| 2.1.5 引物 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-38页 |
| 2.2.1 PAL2-3 基因的克隆 | 第22-27页 |
| 2.2.2 植物pCAMBIA3301-GmPAL2-3 过量表达载体构建 | 第27-28页 |
| 2.2.3 植物pFGC5941-Gm PAL2-3 RNAi干扰载体构建 | 第28-32页 |
| 2.2.4 转化根癌农杆菌EHA105 | 第32-33页 |
| 2.2.5 根癌农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法 | 第33-35页 |
| 2.2.6 T1代转基因大豆植株的PPT抗性分析 | 第35页 |
| 2.2.7 T1代转基因大豆植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| 2.2.8 T1代转基因大豆植株的Real-time PCR检测 | 第36-37页 |
| 2.2.9 T1代转基因大豆籽粒中异黄酮含量 | 第37-38页 |
| 2.3 数据分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-51页 |
| 3.1 PAL2-3 基因的克隆和载体构建 | 第39-45页 |
| 3.1.1 大豆总RNA的提取 | 第39页 |
| 3.1.2 Gm PAL2-3 基因的克隆 | 第39-40页 |
| 3.1.3 植物p CAMBIA3301-Gm PAL2-3 过量表达载体构建 | 第40-41页 |
| 3.1.4 pCAMBIA3301-Gm PAL2-3 重组载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.1.5 pCAMBIA3301-Gm PAL2-3 重组载体转化农杆菌 | 第42-43页 |
| 3.1.6 植物RNAi干扰载体pFGC5941-Gm PAL2-3 的构建 | 第43页 |
| 3.1.7 pFGC5941-Gm PAL2-3 重组载体的构建 | 第43-44页 |
| 3.1.8 pFGC5941-Gm PAL2-3（正+反）重组干扰载体转化农杆菌 | 第44-45页 |
| 3.2 根癌农杆菌介导的大豆遗传转化及鉴定 | 第45-51页 |
| 3.2.1 子叶节法进行大豆遗传转化 | 第45-46页 |
| 3.2.2 T1代转基因大豆植株的PPT检测 | 第46-47页 |
| 3.2.3 T1代转基因大豆植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| 3.2.4 T1代转基因大豆植株的Real-time PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.2.5 PAL2-3 基因对大豆籽粒中异黄酮含量的影响 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 4.1 PAL2-3 基因表达量分析 | 第51页 |
| 4.2 PAL2-3 基因对大豆异黄酮含量的影响 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
