| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 毛囊生长发育中相关信号通路的研究 | 第13-20页 |
| 1 毛囊的结构 | 第13页 |
| 2 毛囊的发育过程 | 第13-14页 |
| 3 毛囊周期性的形态变化 | 第14-15页 |
| 4 与毛囊形态发生相关的信号通路 | 第15-19页 |
| 5 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 Lef1和Msx2在阿尔巴斯绒山羊毛乳头细胞增殖中的调控作用 | 第20-59页 |
| 1 引言 | 第20-24页 |
| 1.1 Lef1和Msx2基因过表达载体和干扰载体的构建 | 第20-21页 |
| 1.2 阿尔巴斯绒山羊初级和次级毛乳头细胞的培养与鉴定 | 第21-22页 |
| 1.3 Lef1过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第22-23页 |
| 1.4 Msx2过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第23-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-38页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 主要实验设备及耗材 | 第24页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 目的基因Lef1和Msx2的获得 | 第25-30页 |
| 2.2.2 过表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.3 干扰载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.4 毛乳头细胞的培养 | 第33-34页 |
| 2.2.5 细胞免疫荧光检测 | 第34页 |
| 2.2.6 绘制毛乳头细胞的生长曲线 | 第34页 |
| 2.2.7 过表达载体和干扰载体的脂质体转染及筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.8 毛乳头细胞总RNA的提取和qRT-PCR | 第35-36页 |
| 2.2.9 各实验组细胞总蛋白提取 | 第36页 |
| 2.2.10 Western blot | 第36-38页 |
| 3 结果 | 第38-52页 |
| 3.1 Lef1和Msx2基因过表达载体和干扰载体的构建 | 第38-43页 |
| 3.1.1 克隆Lef1和Msx2基因片段 | 第38-40页 |
| 3.1.2 构建Lef1和Msx2基因的过表达载体完成 | 第40页 |
| 3.1.3 构建Lef1和Msx2基因的干扰载体完成 | 第40-43页 |
| 3.2 阿尔巴斯绒山羊初级和次级毛乳头细胞的培养与鉴定 | 第43-45页 |
| 3.2.1 阿尔巴斯绒山羊初级毛乳头和次级毛乳头细胞的体外培养 | 第43-44页 |
| 3.2.2 初级和次级毛乳头细胞的荧光免疫鉴定 | 第44页 |
| 3.2.3 细胞生长曲线 | 第44-45页 |
| 3.3 Lef1过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第45-48页 |
| 3.3.1 Lef1过表达载体和干扰载体对初级、次级毛乳头细胞的转染 | 第45-46页 |
| 3.3.2 Lef1基因和其他相关基因的mRNA的表达检测 | 第46页 |
| 3.3.3 毛乳头中Lef1基因对cyclin D1和C-myc基因表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.4 检测各实验组细胞中Lef1、cyclin D1、C-myc、β-catenin和β-actin基因的蛋白表达 | 第47-48页 |
| 3.3.5 Lef1基因对毛乳头细胞增殖的影响 | 第48页 |
| 3.4 Msx2过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第48-52页 |
| 3.4.1 Msx2过表达载体和干扰载体对初级、次级毛乳头细胞的转染 | 第48-49页 |
| 3.4.2 Msx2基因和其他相关基因的mRNA的表达检测 | 第49-50页 |
| 3.4.3 毛乳头中Msx2基因对Lef1和BMP-2基因表达的影响 | 第50页 |
| 3.4.4 各实验组细胞中Lef1、BMP-2和β-actin基因的蛋白表达 | 第50-51页 |
| 3.4.5 Msx2基因对毛乳头细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-58页 |
| 4.1 Lef1和Msx2基因过表达载体和干扰载体的构建 | 第52-53页 |
| 4.2 阿尔巴斯绒山羊初级和次级毛乳头细胞的培养与鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3 Lef1过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第54-56页 |
| 4.4 Msx2过表达载体和干扰载体转染及检测 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
