| 摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 沙门氏菌的研究概况 | 第14-18页 |
| 1.1.1 沙门氏菌的病原学特征 | 第14-15页 |
| 1.1.2 沙门氏菌的致病机制 | 第15页 |
| 1.1.3 沙门氏菌主要毒力因子的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.4 细菌细胞内的第二信使及其信号传导 | 第17-18页 |
| 1.2 Red重组系统 | 第18-19页 |
| 1.2.1 Red重组系统的组成与作用机理 | 第18-19页 |
| 1.2.2 Red重组的相关质粒与Red重组的应用 | 第19页 |
| 1.3 沙门氏菌基因突变体疫苗 | 第19-22页 |
| 1.3.1 沙门氏菌基因突变体疫苗研究背景 | 第19-21页 |
| 1.3.2 沙门氏菌基因突变体疫苗的研究概况 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A的构建 | 第25-29页 |
| 2.2.2 基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.3 基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A和SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B的生长和生化特性 | 第31-33页 |
| 2.2.4 基因缺失株作为候选疫苗的可行性研究 | 第33-38页 |
| 3 结果 | 第38-83页 |
| 3.1 SM6△cpx R/lon/hil A基因缺失株的构建 | 第38-39页 |
| 3.1.1 同源重组打靶PCR片段的获得 | 第38页 |
| 3.1.2 hil A基因的敲除及PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2 SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B基因缺失株的构建 | 第39-41页 |
| 3.2.1 同源重组打靶PCR片段的获得 | 第39-40页 |
| 3.2.2 cpd B基因的敲除及PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A和SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B的生物学特性 | 第41-47页 |
| 3.3.1 生长特性 | 第41-42页 |
| 3.3.2 生化特性 | 第42-45页 |
| 3.3.3 基因缺失株的遗传稳定性 | 第45-46页 |
| 3.3.4 SM6△cpx R/lon/hil A, SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B和SM6侵入率的差异 | 第46-47页 |
| 3.3.5 细菌形态的变化 | 第47页 |
| 3.4 基因缺失株作为候选疫苗的可行性研究 | 第47-83页 |
| 3.4.1 三基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A的致病力测定 | 第47-48页 |
| 3.4.2 四基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B的致病力测定 | 第48-49页 |
| 3.4.3 细菌在体内定植清除情况及对组织病理损伤的检测 | 第49-62页 |
| 3.4.4 免疫途径的确定 | 第62-64页 |
| 3.4.5 免疫剂量的确定 | 第64-65页 |
| 3.4.6 SPF鸡免疫后血清特异性抗体的动态变化 | 第65-66页 |
| 3.4.7 SPF鸡免疫后鸡脾脏CD4+、CD8+T细胞亚群百分比的动态变化 | 第66-68页 |
| 3.4.8 SPF鸡免疫后外周血细胞因子的动态变化 | 第68-70页 |
| 3.4.9 SPF鸡攻菌后的保护情况 | 第70页 |
| 3.4.10 SPF鸡攻菌后荷菌数的变化及各脏器组织学病变 | 第70-82页 |
| 3.4.11 SM6△cpx R/lon/hil A和SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B免疫鸡只的抗体持续期试验 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-89页 |
| 4.1 基因缺失株的构建、生长、生化特性和安全性评价 | 第83-85页 |
| 4.2 沙门氏菌基因缺失株疫苗SM6△cpx R/lon/hil A和SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B的免疫效果评价 | 第85-89页 |
| 4.2.1 沙门氏菌三基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A和 四基因缺失株SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B免疫后对鸡的保护效果 | 第85-86页 |
| 4.2.2 沙门氏菌三基因缺失疫苗株SM6△cpx R/lon/hil A和 四基因缺失疫苗株SM6△cpx R/lon/hil A/cpd B对体液免疫和细胞免疫的影响 | 第86-89页 |
| 5 结论 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第98页 |
