| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 植物启动子概述 | 第11页 |
| 1.2 启动子的结构与分类 | 第11-14页 |
| 1.2.1 启动子的结构 | 第11-12页 |
| 1.2.2 启动子的分类 | 第12-14页 |
| 1.3 植物组织特异性启动子的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.3.1 种子特异启动子 | 第14-15页 |
| 1.3.2 花特异启动子 | 第15-16页 |
| 1.3.3 果实特异启动子 | 第16-17页 |
| 1.3.4 其他组织器官特异启动子 | 第17-18页 |
| 1.4 转录组学技术 | 第18-19页 |
| 1.4.1 转录组学研究方法 | 第18-19页 |
| 1.4.2 转录组学在植物上的应用 | 第19页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 质粒及菌株材料 | 第21页 |
| 2.2 实验仪器设备与试剂 | 第21-25页 |
| 2.2.1 实验过程所需反应引物 | 第21-24页 |
| 2.2.2 实验室器材装备 | 第24页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法与步骤 | 第25-39页 |
| 2.3.1 甘蓝型油菜基因组DNA及cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 2.3.2 甘蓝型油菜组织特异表达基因的筛选和基因表达模式检测 | 第26-27页 |
| 2.3.3 甘蓝型油菜组织特异基因表达 5'RACE克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.4 组织特异性启动子连接T载体 | 第28-29页 |
| 2.3.5 阳性克隆子的筛选和菌液PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.3.6 克隆子测序与生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.3.7 构建组织特异性启动子表达载体 | 第30-31页 |
| 2.3.8 表达载体转化根癌农杆菌GV3101 | 第31-32页 |
| 2.3.9 浸花法转化拟南芥 | 第32-33页 |
| 2.3.10 转基因植株分子鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.11 启动子GUS活性分析 | 第34-36页 |
| 2.3.12 甘蓝型油菜花和种子特异表达基因的筛选 | 第36-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-73页 |
| 3.1 组织特异表达候选基因再次筛选 | 第39页 |
| 3.2 特异表达基因组织特异性检测 | 第39-41页 |
| 3.3 特异表达基因 5'RACE克隆 | 第41-42页 |
| 3.4 甘蓝型油菜组织特异启动子片段的克隆 | 第42-50页 |
| 3.4.1 甘蓝型油菜根特异启动子ST8-1 扩增与序列分析 | 第42-43页 |
| 3.4.2 甘蓝型油菜叶片特异启动子SC-2 扩增与序列分析 | 第43-45页 |
| 3.4.3 甘蓝型油菜花特异启动子FL-2 扩增与序列分析 | 第45-46页 |
| 3.4.4 甘蓝型油菜花蕾特异启动子SP3-1 扩增与序列分析 | 第46-48页 |
| 3.4.5 甘蓝型油菜根、茎秆和角果皮特异启动子SP6-1 扩增与序列分析 | 第48-50页 |
| 3.5 甘蓝型油菜组织特异启动子promoter-GUS表达载体构建 | 第50-55页 |
| 3.5.1 植物表达载体pCAMBIA 1305.1 骨架的制备 | 第50页 |
| 3.5.2 双酶切构建甘蓝型油菜组织特异启动子表达载体 | 第50-54页 |
| 3.5.3 重组载体转化根瘤农杆菌及鉴定 | 第54-55页 |
| 3.6 p1305.1-FL-1P和p1305.l-SC-2P载体遗传转化拟南芥及转基因植株鉴定 | 第55-59页 |
| 3.6.1 拟南芥的遗传转化 | 第55页 |
| 3.6.2 转基因再生植株PCR检测 | 第55-56页 |
| 3.6.3 转基因拟南芥GUS基因表达量分析 | 第56-57页 |
| 3.6.4 转基因植株GUS组织化学染色 | 第57-58页 |
| 3.6.5 转基因拟南芥GUS蛋白活性分析 | 第58-59页 |
| 3.7 甘蓝型油菜花和种子特异表达候选基因RNA-Seq分析 | 第59-73页 |
| 3.7.1 甘蓝型油菜花和种子特异表达基因鉴定 | 第59-60页 |
| 3.7.2 甘蓝型油菜种子特异表达基因的GO分类和富集分析 | 第60-66页 |
| 3.7.3 甘蓝型油菜花特异表达基因的GO富集分析 | 第66-71页 |
| 3.7.4 甘蓝型油菜特异表达基因qRT-PCR验证 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-77页 |
| 4.1 组织特异表达候选基因的获取 | 第73-74页 |
| 4.2 启动子顺式元件预测分析 | 第74页 |
| 4.3 启动子的promoter-GUS载体的构建 | 第74-75页 |
| 4.4 通过根癌农杆菌介导法转化拟南芥获得转基因植株 | 第75-76页 |
| 4.5 FL-1 启动子和SC-2 启动子表达的时空性 | 第76-77页 |
| 5 主要结论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 主要缩略词 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
