附录 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第11-15页 |
第二章 材料和方法 | 第15-32页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 实验动物 | 第15页 |
2.1.2 细胞株 | 第15页 |
2.1.3 引物 | 第15页 |
2.1.4 主要实验试剂 | 第15-16页 |
2.1.5 主要仪器耗材 | 第16-17页 |
2.1.6 主要试剂的制备 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
2.2.2 细胞转染技术 | 第19-21页 |
2.2.3 RNA提取、逆转录及Real-timePCR | 第21-24页 |
2.2.4 Western blot蛋白印迹 | 第24-25页 |
2.2.5 免疫荧光染色和观察 | 第25-26页 |
2.2.6 Transwell迁移或侵袭实验 | 第26-27页 |
2.2.7 肿瘤单细胞成球实验 | 第27页 |
2.2.8 扫描电镜 | 第27-28页 |
2.2.9 脾下肝转移模型建立及验证 | 第28-31页 |
2.2.9.1 建立脾下肝转移模型 | 第28页 |
2.2.9.2 石蜡切片HE染色 | 第28-30页 |
2.2.9.3 免疫组织化学技术 | 第30-31页 |
2.2.10 蛋白免疫共沉淀 | 第31-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-43页 |
3.1 ARHI表达量与EMT及细胞干性标志蛋白表达水平相关 | 第32-36页 |
3.1.1 ARHI在胰腺癌组织中差异性表达 | 第32-33页 |
3.1.2 ARHI在胰腺癌细胞中差异性表达 | 第33页 |
3.1.3 下调内源ARHI的表达抑制了胰腺癌细胞的EMT | 第33-35页 |
3.1.4 过表达ARHI促进胰腺癌细胞EMT | 第35-36页 |
3.2 ARHI促进胰腺癌细胞的侵袭与成球 | 第36-38页 |
3.3 ARHI促进肝转移动物模型的体内肿瘤细胞侵袭 | 第38-40页 |
3.4 ARHI下调ERK激活 | 第40-42页 |
3.5 ARHI对EMT及细胞干性的促进效应与关键蛋白Notch-1 的表达密切相关 | 第42-43页 |
第四章 讨论和结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 | 第50-57页 |
综述参考文献 | 第54-57页 |
致谢 | 第57页 |