摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 钙调蛋白激酶Iγ与神经元形态 | 第13-15页 |
1.2 增强子(enhancer) | 第15-18页 |
1.3 微小RNA(microRNA) | 第18-22页 |
第二章 实验及材料方法 | 第22-43页 |
2.1 实验动物 | 第22页 |
2.2 生物信息学筛选 | 第22-23页 |
2.2.1 增强子序列的筛选 | 第22页 |
2.2.2 miRNA的预测及筛选 | 第22-23页 |
2.3 表达载体的构建 | 第23-35页 |
2.3.1 CaMKIγ表达载体的构建 | 第23-30页 |
2.3.2 增强子片段表达质粒的构建 | 第30-32页 |
2.3.3 miRNA表达质粒的构建 | 第32-35页 |
2.4 细胞培养 | 第35-37页 |
2.4.1 原代神经元培养 | 第35-36页 |
2.4.2 N2A细胞的培养 | 第36-37页 |
2.5 离体及在体电转 | 第37-38页 |
2.5.1 离体电转 | 第37-38页 |
2.5.2 在体电转 | 第38页 |
2.6 灌流固定及冷冻切片 | 第38-39页 |
2.7 免疫组化 | 第39-41页 |
2.8 形态统计 | 第41页 |
2.9 荧光素酶的检测 | 第41-43页 |
第三章 实验结果 | 第43-64页 |
3.1 CaMKIγ对神经元形态的作用 | 第43-52页 |
3.1.1 电转条件的优化 | 第43-47页 |
3.1.2 CaMKIγ对神经元形态的影响 | 第47-52页 |
3.2 CaMKIγ候选增强子序列筛选及鉴定 | 第52-59页 |
3.3 生物信息学预测调控CaMKIγ表达的microRNA | 第59-61页 |
3.4 miRNA对CaMKIγ调控的实验验证 | 第61-64页 |
第四章 实验讨论 | 第64-69页 |
4.1 CaMKIγ对神经元形态的作用 | 第64-65页 |
4.2 CaMKIγ候选增强子序列筛选及鉴定 | 第65-67页 |
4.3 调控CaMKIγ表达的miRNA预测及验证 | 第67-69页 |
第五章 结论及展望 | 第69-71页 |
5.1 结论 | 第69页 |
5.2 展望 | 第69-71页 |
图表附录 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
致谢 | 第83页 |