改良的大豆子叶节转基因方法
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-28页 |
| 1 大豆再生体系的建立 | 第12-13页 |
| ·大豆器官的发生和植株再生 | 第12-13页 |
| ·大豆体细胞胚胎发生和植株再生 | 第13页 |
| 2 大豆遗传转化的方法 | 第13-17页 |
| ·农杆菌侵染法 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导大豆基因转化的进展 | 第13-14页 |
| ·农杆菌转化大豆的影响因素 | 第14页 |
| ·基因枪转化法 | 第14-15页 |
| ·种质转化法 | 第15-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第15-16页 |
| ·子房注射法 | 第16-17页 |
| ·其他转基因方法的应用 | 第17页 |
| 3 大豆基因转化的优选方案 | 第17-23页 |
| ·大豆种子的消毒 | 第17-18页 |
| ·大豆种子的萌发 | 第18页 |
| ·外植体的选择 | 第18-19页 |
| ·预培养对大豆丛生芽诱导的影响 | 第19页 |
| ·大豆转化的主要影响因素 | 第19-20页 |
| ·外植体的切取方式 | 第19页 |
| ·侵染时间的选择 | 第19-20页 |
| ·共培养时间 | 第20页 |
| ·其他影响因素 | 第20页 |
| ·大豆生长各时期培养基的选择 | 第20-22页 |
| ·丛生芽诱导培养基的选择 | 第21页 |
| ·丛生芽生长培养基的选择 | 第21-22页 |
| ·生根培养基的选择 | 第22页 |
| ·抗性再生幼苗的移植 | 第22页 |
| ·抗性芽的筛选 | 第22-23页 |
| 4 植物中硼的作用 | 第23-25页 |
| ·土壤中硼的含量及分布 | 第23页 |
| ·硼胁迫对植株生长的影响 | 第23-24页 |
| ·低硼胁迫下植物的影响 | 第23-24页 |
| ·高硼胁迫对植物的影响 | 第24页 |
| ·硼参与细胞壁的结构及功能 | 第24-25页 |
| ·硼参与细胞壁的结构 | 第24-25页 |
| ·硼的功能 | 第25页 |
| ·硼对糖类代谢及其运输的影响 | 第25页 |
| ·硼对蛋白质和核酸代谢的影响 | 第25页 |
| 5 目的基因的转化和特点 | 第25-27页 |
| ·目的基因的直接转化法 | 第25-26页 |
| ·目的基因—抗虫基因 | 第26页 |
| ·抗虫基因Bt 的致病机理 | 第26页 |
| ·抗虫基因的特点 | 第26页 |
| ·抗虫基因的应用 | 第26-27页 |
| 6 转基因技术的应用前景 | 第27-28页 |
| 第二章 大豆子叶节丛生芽的诱导 | 第28-33页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·大豆品种 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·无菌外植体的建立 | 第28页 |
| ·外植体的萌发 | 第28页 |
| ·大豆子叶节丛生芽的诱导 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-32页 |
| ·酒精消毒时间对大豆萌发的影响 | 第30页 |
| ·不同萌发培养基对大豆萌发的影响 | 第30-31页 |
| ·植物激素的不同种类和浓度对大豆子叶节诱导的影响 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 硼对大豆子叶节丛生芽的影响 | 第33-37页 |
| 1 材料与方法 | 第33页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33页 |
| ·无菌外植体的建立 | 第33页 |
| ·不同硼酸浓度诱导培养基的丛生芽诱导 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-35页 |
| ·硼酸浓度对丛生芽数量的影响 | 第33页 |
| ·硼酸浓度对丛生芽生长状况的影响 | 第33-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·缺硼对植物细胞壁和生物膜的影响 | 第35页 |
| ·硼对细胞成分伸展蛋白的影响 | 第35-36页 |
| ·硼和其它元素的平衡作用 | 第36-37页 |
| 第四章 硼介导的外源基因(Bt)的转化 | 第37-45页 |
| 1 材料与方法 | 第37-41页 |
| ·材料和试剂 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·目的基因和菌种 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·LB 固体培养基 | 第37页 |
| ·YEP 液体培养基 | 第37页 |
| ·植物基本培养基 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·碱法提取质粒的试剂 | 第37-38页 |
| ·50×核酸电泳缓冲液TAE | 第38页 |
| ·TE 缓冲液 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·菌种的复苏 | 第38页 |
| ·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第38页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·大豆外植体的侵染 | 第39页 |
| ·侵染后外植体的培养 | 第39页 |
| ·大豆叶片总RNA 的提取 | 第39-40页 |
| ·逆转录试验 | 第40页 |
| ·Bt 基因的分子生物学检测 | 第40-41页 |
| ·PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·逆转录PCR 检测 | 第41页 |
| ·Southern blotting 检测 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·菌种的鉴定 | 第41-42页 |
| ·PCR 和逆转录PCR 检测结果 | 第42-43页 |
| ·Southern blotting 检测结果 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论与展望 | 第45-48页 |
| ·大豆子叶节诱导体系 | 第45页 |
| ·硼的选择对大豆基因转化的影响 | 第45页 |
| ·外源基因Bt 的转化方法与表达检测 | 第45-46页 |
| ·问题与展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 常用词缩写表 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
