| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 两栖动物 | 第9-10页 |
| 1.1.1 两栖动物概述 | 第9页 |
| 1.1.2 两栖动物生存现状 | 第9页 |
| 1.1.3 两栖动物锐减的诱因 | 第9-10页 |
| 1.2 东北林蛙 | 第10-11页 |
| 1.2.1 东北林蛙概述 | 第10-11页 |
| 1.2.2 东北林蛙的研究意义 | 第11页 |
| 1.3 虹彩病毒 | 第11-12页 |
| 1.3.1 虹彩病毒概述 | 第11页 |
| 1.3.2 虹彩病毒的致病机制 | 第11页 |
| 1.3.3 虹彩病毒对两栖动物的危害 | 第11-12页 |
| 1.4 TLR信号通路 | 第12-14页 |
| 1.4.1 TLRs概述 | 第12-14页 |
| 1.5 TLR信号通路的转导 | 第14-15页 |
| 1.6 TLRs的应用 | 第15页 |
| 1.7 东北林蛙固有免疫研究现状 | 第15-16页 |
| 1.8 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验动物及病原微生物的暂养与保存 | 第17页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 mRNA序列及引物设计 | 第18-19页 |
| 2.2.2 RGV接种及组织样品采集 | 第19页 |
| 2.2.3 组织总RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.2.4 RACE法获得东北林蛙MyD88全长cDNA序列 | 第20-24页 |
| 2.2.5 东北林蛙MyD88的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.6 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR | 第25页 |
| 2.3 本章小结 | 第25-27页 |
| 3 结果 | 第27-42页 |
| 3.1 RACE结果 | 第27-28页 |
| 3.2 东北林蛙MyD88的生物信息学分析 | 第28-31页 |
| 3.2.1 全长cDNA序列及保守结构域查找 | 第28-29页 |
| 3.2.2 多序列比对及同源性分析 | 第29-30页 |
| 3.2.3 系统发育分析 | 第30-31页 |
| 3.3 引物特异性及扩增效率的鉴定 | 第31-36页 |
| 3.3.1 β-actin标准曲线及溶解曲线 | 第32-33页 |
| 3.3.2 MyD88标准曲线及溶解曲线 | 第33页 |
| 3.3.3 IRAK4标准曲线及溶解曲线 | 第33-34页 |
| 3.3.4 TRAF6标准曲线及溶解曲线 | 第34-35页 |
| 3.3.5 TRAF3标准曲线及溶解曲线 | 第35-36页 |
| 3.4 RGV胁迫下东北林蛙MyD88、IRAK4、TRAF6和TRAF3的差异表达变化 | 第36-40页 |
| 3.4.1 东北林蛙皮肤MyD88、IRAK4、TRAF6和TRAF3表达量变化 | 第37-38页 |
| 3.4.2 东北林蛙肾脏MyD88、IRAK4、TRAF6和TRAF3表达量变化 | 第38-39页 |
| 3.4.3 东北林蛙肝脏MyD88、IRAK4、TRAF6和TRAF3表达量变化 | 第39-40页 |
| 3.4.4 东北林蛙心脏MyD88、IRAK4、TRAF6和TRAF3表达量变化 | 第40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 4.1 TLRs与病毒识别 | 第42页 |
| 4.2 东北林蛙MyD88与TLR信号通路 | 第42-43页 |
| 4.3 东北林蛙TLR信号通路与抗病毒免疫反应 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
