| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·山羊传染性胸膜肺炎支原体概述 | 第10页 |
| ·山羊传染性胸膜肺炎支原体抗原特性 | 第10-12页 |
| ·山羊传染性胸膜肺炎支原体分子生物学研究进展 | 第12-13页 |
| ·丝状支原体簇脂蛋白概述 | 第12-13页 |
| ·国内外对山羊传染性胸膜肺炎支原体研究现状 | 第13页 |
| ·山羊传染性胸膜肺炎支原体分子生物学诊断方法 | 第13页 |
| ·体外基因表达技术研究现状 | 第13-16页 |
| ·原核基因表达系统 | 第14-16页 |
| ·真核基因表达系统 | 第16页 |
| ·存在的问题 | 第16-18页 |
| 引言 | 第18-20页 |
| 第2章 LPPA基因的克隆与序列分析 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·受体菌与质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂和主要仪器 | 第20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器及型号 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·引物的设计 | 第22页 |
| ·菌种的复苏与菌体的收获 | 第22页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第22-23页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第24页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第24页 |
| ·连接产物的转化 | 第24-25页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第25页 |
| ·PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·BamHⅠ、HindⅢ酶切鉴定 | 第26页 |
| ·序列测定及序列分析 | 第26页 |
| ·免疫信息学分析 | 第26-27页 |
| ·山羊支原体LPPA基因表达蛋白中氨基酸组成分析 | 第26页 |
| ·山羊支原体LPPA基因表达蛋白的信号肽预测 | 第26页 |
| ·山羊支原体LPPA基因表达蛋白的跨膜区预测 | 第26-27页 |
| ·山羊支原体LPPA基因表达蛋白的二级结构预测 | 第27页 |
| ·LPPA表达蛋白的亲水性以及抗原性区域预测 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物的回收 | 第27页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·序列分析 | 第28-29页 |
| ·生物信息学分析 | 第29-31页 |
| ·LPPA表达蛋白的氨基酸组成特征分析 | 第29页 |
| ·LPPA表达蛋白信号肽预测 | 第29页 |
| ·LPPA表达蛋白二级结构预测 | 第29-30页 |
| ·LPPA表达蛋白跨膜结构域的预测 | 第30页 |
| ·LPPA表达蛋白的亲水性以及抗原性区域预测 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| 第3章 LPPA基因翻译蛋白的表达 | 第34-48页 |
| ·试验材料 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·仪器设备 | 第34-35页 |
| ·菌株及载体 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-42页 |
| ·山羊LPPA基因片段原核表达载体的构建与鉴定 | 第35-39页 |
| ·山羊LPPA基因片段在E.coli BL_(21)中的表达及表达条件的优化 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白免疫印迹分析(Western blotting) | 第40-41页 |
| ·山羊LPPA表达蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| ·结果 | 第42-45页 |
| ·山羊LPPA基因原核表达载体鉴定结果 | 第42-44页 |
| ·免疫印迹分析(Western blotting)结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第4章 山羊LPPA重组蛋白对小鼠的免疫保护效力研究 | 第48-52页 |
| ·山羊支原体胸膜肺炎PG_3株攻毒剂量的确定 | 第48页 |
| ·LPPA基因在BL_(21)(DE_3)中的诱导表达 | 第48页 |
| ·免疫保护力试验 | 第48页 |
| ·小鼠抗重组LPPA蛋白抗体的检测 | 第48页 |
| ·攻毒试验 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
