| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-30页 |
| 1.1 乙型肝炎病毒概述 | 第14-21页 |
| 1.1.1 乙型肝炎病毒简介 | 第14-17页 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒的感染复制周期 | 第17-19页 |
| 1.1.3 HBV相关的免疫应答 | 第19-20页 |
| 1.1.4 HBV耐药性及停药反弹机制 | 第20页 |
| 1.1.5 HBV治疗药物研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2 外部引导序列的概述 | 第21-24页 |
| 1.2.1 核酶的简介 | 第21-22页 |
| 1.2.2 影响核酶P催化的因素 | 第22-23页 |
| 1.2.3 EGS的发现 | 第23页 |
| 1.2.4 EGS在研究中的应用 | 第23-24页 |
| 1.3 沙门氏菌概述 | 第24-30页 |
| 1.3.1 沙门氏菌简介 | 第24页 |
| 1.3.2 沙口氏菌的入侵机制 | 第24-25页 |
| 1.3.3 减毒活疫苗载体研究进展 | 第25-26页 |
| 1.3.4 沙门氏茵减毒株的构建 | 第26-27页 |
| 1.3.5 减毒沙门氏菌载体的优点 | 第27-28页 |
| 1.3.6 以减毒沙门氏茵为载体的活疫苗应用研究 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-56页 |
| 2.1 实验仪器与设备 | 第30-31页 |
| 2.2 基本实验材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.3 常规分子克隆实验技术 | 第32-40页 |
| 2.3.1 大肠杆菌DH5α化转感受态的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.2 大肠杆菌DH5α转化实验 | 第33-34页 |
| 2.3.3 SDS碱裂解法粗提质粒 | 第34-35页 |
| 2.3.5 Northern Blot实验 | 第35-40页 |
| 2.4 酵母双杂交系列实验 | 第40-45页 |
| 2.4.1 文库信息 | 第40页 |
| 2.4.2 试剂与培养基准备 | 第40-42页 |
| 2.4.3 文库滴定 | 第42页 |
| 2.4.4 Bait菌株的构建 | 第42-43页 |
| 2.4.5 酵母双杂交筛选文库 | 第43-44页 |
| 2.4.6 X-gal显色实验 | 第44页 |
| 2.4.7 酵母质粒提取 | 第44-45页 |
| 2.5 细胞相关实验 | 第45-48页 |
| 2.5.1 细胞的培养 | 第45-46页 |
| 2.5.1.1 细胞培养基及试剂 | 第45页 |
| 2.5.1.2 细胞复苏（以Hela细胞为例） | 第45-46页 |
| 2.5.1.3 细胞传代 | 第46页 |
| 2.5.1.4 细胞冻存 | 第46页 |
| 2.5.2 脂质体法转染细胞 | 第46-47页 |
| 2.5.3 使用流式细胞仪对细胞进行检测和分选 | 第47-48页 |
| 2.6 核酶P体外剪切HBV S RNA相关实验 | 第48-53页 |
| 2.6.1 硫酸二甲酯转化实验 | 第48页 |
| 2.6.2 核酶P的提取与鉴定 | 第48-50页 |
| 2.6.3 基因的克隆与体外转录(以HBV S为例) | 第50-52页 |
| 2.6.4 EGS与RNA底物结合实验 | 第52页 |
| 2.6.5 EGS介导核酶P剪切s38RNA的体外实验 | 第52-53页 |
| 2.7 沙门氏菌侵染HepG2.215细胞的相关实验 | 第53-56页 |
| 2.7.1 体外测定沙门氏菌的生长曲线 | 第53页 |
| 2.7.2 以沙门氏菌为载体在人体细胞中表达EGS RNA | 第53页 |
| 2.7.3 沙门氏菌的入侵对细胞的毒性检测 | 第53-54页 |
| 2.7.4 ELESA实验检测HBV E抗原、表面抗原浓度 | 第54页 |
| 2.7.5 使用qPCR分析HBV capsid-associated DNA水平 | 第54-56页 |
| 第三章 人工改造的EGS对HBV基因表达和复制抑制作用的研究 | 第56-76页 |
| 3.1 研究背景 | 第56-57页 |
| 3.2 实验结果 | 第57-69页 |
| 3.2.1 分析S mRNA可被EGS结合的位点 | 第57-58页 |
| 3.2.2 EGS介导核酶P对HBV的S RNA进行剪切的体外实验 | 第58-62页 |
| 3.2.3 以沙门氏菌为载体在培养细胞中表达EGS | 第62-65页 |
| 3.2.4 以沙门氏菌为载体介导表达EGS,在细胞中抑制HBV的感染和复制 | 第65-69页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第69-71页 |
| 3.4 研究展望——人工改造的EGS抗HBV的动物实验方案 | 第71-76页 |
| 3.4.1 研究背景 | 第71-72页 |
| 3.4.2 技术路线 | 第72-73页 |
| 3.4.3 研究方案 | 第73-76页 |
| 第四章 HBV TP蛋白与肝细胞表达蛋白相互作用的研究 | 第76-85页 |
| 4.1 背景介绍 | 第76-78页 |
| 4.1.1 TP蛋白的简介 | 第76-77页 |
| 4.1.2 酵母双杂交原理 | 第77-78页 |
| 4.2 实验结果 | 第78-83页 |
| 4.2.1 文库滴度测定与转化率测定结果 | 第78-79页 |
| 4.2.2 酵母质粒的提取与鉴定 | 第79-81页 |
| 4.2.3 序列测定与分析 | 第81-83页 |
| 4.3 分析与讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-102页 |
| 攻读博士期间的学术成果 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
