| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 MTBE的物理化学性质 | 第11-12页 |
| 1.2 MTBE的毒理学研究 | 第12-14页 |
| 1.2.1 MTBE的急性毒性 | 第12页 |
| 1.2.2 MTBE的遗传毒性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 MTBE的致癌性 | 第13页 |
| 1.2.4 MTBE的生殖毒性 | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白质组学技术在毒理学中的应用 | 第14-17页 |
| 1.3.1 蛋白质组学技术概述 | 第14-16页 |
| 1.3.2 蛋白质组学技术在毒理学研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 课题研究基础 | 第17-18页 |
| 1.4.1 MTBE在不同细胞系中的毒性研究情况 | 第17页 |
| 1.4.2 本课题组在蛋白质组学技术应用研究基础 | 第17-18页 |
| 1.5 课题研究目的及实验方案 | 第18-21页 |
| 1.5.1 课题研究目的及意义 | 第18页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 1.5.3 实验设计方案及技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 MTBE诱导CHO细胞毒性作用和氧化应激效应 | 第21-44页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 细胞及受试物 | 第23页 |
| 2.2.4 培养基及常用溶液配置 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.3.1 细胞培养及处理 | 第24页 |
| 2.3.2 细胞增殖试验 | 第24页 |
| 2.3.3 LDH漏出率检测 | 第24-25页 |
| 2.3.4 细胞内活性氧的检测 | 第25-26页 |
| 2.3.5 丙二醛含量的检测 | 第26页 |
| 2.3.6 氧化应激相关酶活力的检测 | 第26-28页 |
| 2.3.7 特定基因的mRNA表达检测 | 第28-31页 |
| 2.3.8 相关蛋白表达检测 | 第31-33页 |
| 2.4 结果 | 第33-41页 |
| 2.4.1 细胞增殖抑制作用 | 第33-34页 |
| 2.4.2 细胞形态变化 | 第34-35页 |
| 2.4.3 LDH漏出率检测 | 第35页 |
| 2.4.4 细胞内活性氧的检测 | 第35-36页 |
| 2.4.5 丙二醛（MDA）含量的检测 | 第36页 |
| 2.4.6 氧化应激相关酶活力的检测 | 第36-38页 |
| 2.4.7 荧光定量PCR | 第38-40页 |
| 2.4.8 MTBE对蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-43页 |
| 2.6 本章小结 | 第43-44页 |
| 第3章 MTBE对CHO细胞蛋白质组的影响 | 第44-69页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-46页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.3 细胞及受试物 | 第46页 |
| 3.2.4 培养基及常用溶液配置 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-52页 |
| 3.3.1 CHO细胞染毒处理 | 第46页 |
| 3.3.2 蛋白提取及处理 | 第46-47页 |
| 3.3.3 蛋白定量 | 第47页 |
| 3.3.4 荧光标记 | 第47-49页 |
| 3.3.5 第一向等点聚焦 | 第49-50页 |
| 3.3.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第50-51页 |
| 3.3.7 二维凝胶荧光图像分析 | 第51页 |
| 3.3.8 后染色（post-stained）的制备凝胶电泳 | 第51页 |
| 3.3.9 挖点及蛋白酶解 | 第51-52页 |
| 3.3.10 质谱鉴定及数据库搜索 | 第52页 |
| 3.3.11 差异表达蛋白的Western blot验证 | 第52页 |
| 3.4 结果 | 第52-66页 |
| 3.4.1 蛋白定量结果 | 第52-53页 |
| 3.4.2 2D-DIGE分析 | 第53-55页 |
| 3.4.3 差异表达蛋白的质谱鉴定 | 第55-63页 |
| 3.4.4 差异蛋白的功能分析 | 第63-64页 |
| 3.4.5 差异蛋白的Western blot验证 | 第64-66页 |
| 3.5 讨论 | 第66-67页 |
| 3.6 本章小结 | 第67-69页 |
| 第四章 结论与展望 | 第69-71页 |
| 4.1 结论 | 第69页 |
| 4.2 展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79页 |
