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猪流行性腹泻病毒S1蛋白间接ELISA方法的建立与应用及卵黄抗体的制备

符号及缩略词第4-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 猪流行性腹泻的研究进展第12-21页
        1.1.1 PEDV的形态结构和理化特性第12-13页
        1.1.2 PEDV的分子生物学特点第13-15页
        1.1.3 猪流行性腹泻流行病学第15-17页
        1.1.4 PEDV的培养特性第17页
        1.1.5 猪流行性腹泻临床症状和病理变化第17-18页
        1.1.6 猪流行性腹泻病毒诊断检测方法第18-20页
        1.1.7 疫苗开发进展第20-21页
    1.2 卵黄抗体的研究进展第21-24页
        1.2.1 卵黄抗体的形成第21-22页
        1.2.2 卵黄抗体的结构第22页
        1.2.3 卵黄抗体的理化特性第22-23页
        1.2.4 卵黄抗体的优势第23页
        1.2.5 卵黄抗体在猪生产上的应用第23页
        1.2.6 卵黄抗体在猪流行性腹泻上的应用第23-24页
    1.3 本研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-44页
    2.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定材料与方法第26-33页
        2.1.1 材料第26-27页
        2.1.2 方法第27-33页
    2.2 猪流行性腹泻重组S蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用的材料与方法第33-40页
        2.2.1 材料第33-35页
        2.2.2 方法第35-40页
    2.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备的材料与方法第40-44页
        2.3.1 材料第40-41页
        2.3.2 方法第41-44页
3 结果与分析第44-65页
    3.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定结果第44-50页
        3.1.1 病毒分离结果第44页
        3.1.2 S1基因序列分析第44-47页
        3.1.3 RT-PCR鉴定结果第47-48页
        3.1.4 Vero细胞胰酶适应性结果第48页
        3.1.5 细胞病变结果第48-49页
        3.1.6 TCID50的测定结果第49页
        3.1.7 间接免疫荧光实验第49-50页
        3.1.8 动物回归试验第50页
    3.2 猪流行性腹泻重组S蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用结果第50-60页
        3.2.1 PEDV tS1截短基因扩增结果第50-51页
        3.2.2 pMD18-T-tS1截短重组质粒双酶切鉴定第51页
        3.2.3 pET-32a-tS1截短表达质粒双酶切鉴定第51-52页
        3.2.4 重组S1蛋白的诱导表达和纯化第52-53页
        3.2.5 重组的S1蛋白Western-blotting分析第53-54页
        3.2.6 间接ELISA条件优化结果第54-56页
        3.2.7 间接ELISA判断标准的确定第56页
        3.2.8 特异性试验第56-57页
        3.2.9 敏感性试验第57页
        3.2.10 重复性试验第57-58页
        3.2.11 稳定性试验第58页
        3.2.12 符合性试验第58-60页
        3.2.13 临床检测结果第60页
    3.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备结果第60-65页
        3.3.1 Vero细胞接毒变化第60页
        3.3.2 病毒纯化鉴定第60-61页
        3.3.3 卵黄抗体及血清效价水平检测第61-62页
        3.3.4 卵黄抗体SDS-PAGE分析第62页
        3.3.5 卵黄抗体浓度的测定及效价检测第62页
        3.3.6 无菌检验结果第62页
        3.3.7 卵黄抗体的中和试验第62-64页
        3.3.8 卵黄抗体中和效价与ELISA检测结果比较第64-65页
4 讨论第65-68页
    4.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定第65-66页
    4.2 猪流行性腹泻重组S1蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用第66-67页
    4.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备第67-68页
5 结论第68-69页
6 参考文献第69-77页
7 致谢第77-78页
8 攻读硕士期间发表论文情况第78页

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