符号及缩略词 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-26页 |
1.1 猪流行性腹泻的研究进展 | 第12-21页 |
1.1.1 PEDV的形态结构和理化特性 | 第12-13页 |
1.1.2 PEDV的分子生物学特点 | 第13-15页 |
1.1.3 猪流行性腹泻流行病学 | 第15-17页 |
1.1.4 PEDV的培养特性 | 第17页 |
1.1.5 猪流行性腹泻临床症状和病理变化 | 第17-18页 |
1.1.6 猪流行性腹泻病毒诊断检测方法 | 第18-20页 |
1.1.7 疫苗开发进展 | 第20-21页 |
1.2 卵黄抗体的研究进展 | 第21-24页 |
1.2.1 卵黄抗体的形成 | 第21-22页 |
1.2.2 卵黄抗体的结构 | 第22页 |
1.2.3 卵黄抗体的理化特性 | 第22-23页 |
1.2.4 卵黄抗体的优势 | 第23页 |
1.2.5 卵黄抗体在猪生产上的应用 | 第23页 |
1.2.6 卵黄抗体在猪流行性腹泻上的应用 | 第23-24页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-44页 |
2.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定材料与方法 | 第26-33页 |
2.1.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.2 方法 | 第27-33页 |
2.2 猪流行性腹泻重组S蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用的材料与方法 | 第33-40页 |
2.2.1 材料 | 第33-35页 |
2.2.2 方法 | 第35-40页 |
2.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备的材料与方法 | 第40-44页 |
2.3.1 材料 | 第40-41页 |
2.3.2 方法 | 第41-44页 |
3 结果与分析 | 第44-65页 |
3.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定结果 | 第44-50页 |
3.1.1 病毒分离结果 | 第44页 |
3.1.2 S1基因序列分析 | 第44-47页 |
3.1.3 RT-PCR鉴定结果 | 第47-48页 |
3.1.4 Vero细胞胰酶适应性结果 | 第48页 |
3.1.5 细胞病变结果 | 第48-49页 |
3.1.6 TCID50的测定结果 | 第49页 |
3.1.7 间接免疫荧光实验 | 第49-50页 |
3.1.8 动物回归试验 | 第50页 |
3.2 猪流行性腹泻重组S蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用结果 | 第50-60页 |
3.2.1 PEDV tS1截短基因扩增结果 | 第50-51页 |
3.2.2 pMD18-T-tS1截短重组质粒双酶切鉴定 | 第51页 |
3.2.3 pET-32a-tS1截短表达质粒双酶切鉴定 | 第51-52页 |
3.2.4 重组S1蛋白的诱导表达和纯化 | 第52-53页 |
3.2.5 重组的S1蛋白Western-blotting分析 | 第53-54页 |
3.2.6 间接ELISA条件优化结果 | 第54-56页 |
3.2.7 间接ELISA判断标准的确定 | 第56页 |
3.2.8 特异性试验 | 第56-57页 |
3.2.9 敏感性试验 | 第57页 |
3.2.10 重复性试验 | 第57-58页 |
3.2.11 稳定性试验 | 第58页 |
3.2.12 符合性试验 | 第58-60页 |
3.2.13 临床检测结果 | 第60页 |
3.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备结果 | 第60-65页 |
3.3.1 Vero细胞接毒变化 | 第60页 |
3.3.2 病毒纯化鉴定 | 第60-61页 |
3.3.3 卵黄抗体及血清效价水平检测 | 第61-62页 |
3.3.4 卵黄抗体SDS-PAGE分析 | 第62页 |
3.3.5 卵黄抗体浓度的测定及效价检测 | 第62页 |
3.3.6 无菌检验结果 | 第62页 |
3.3.7 卵黄抗体的中和试验 | 第62-64页 |
3.3.8 卵黄抗体中和效价与ELISA检测结果比较 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
4.1 猪流行性腹泻病毒的分离鉴定 | 第65-66页 |
4.2 猪流行性腹泻重组S1蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用 | 第66-67页 |
4.3 猪流行性腹泻卵黄抗体的制备 | 第67-68页 |
5 结论 | 第68-69页 |
6 参考文献 | 第69-77页 |
7 致谢 | 第77-78页 |
8 攻读硕士期间发表论文情况 | 第78页 |