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火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子序列克隆及表达分析

摘要第4-5页
Abstract第5-7页
缩略词表第8-9页
第一章 前言第9-24页
    1.1 植物反转录转座子研究进展第9-19页
        1.1.1 植物反转录转座子类型第10-12页
        1.1.2 植物反转录转座子的结构特征第12-14页
        1.1.3 植物反转录转座子的分布特点第14-15页
        1.1.4 LTR反转录转座子的转座机制第15-16页
        1.1.5 LTR反转录转座子的活性及影响因素第16-17页
        1.1.6 植物LTR反转录转座子分离鉴定第17-18页
        1.1.7 基于反转录转座子的分子标记种类第18-19页
    1.2 火龙果的体细胞变异与分子鉴定第19-22页
        1.2.1 火龙果起源和地理分布第19-20页
        1.2.2 火龙果的分类第20-21页
        1.2.3 国外内火龙果研究现状第21页
        1.2.4 火龙体细胞变异检测第21-22页
    1.3 研究目的与意义第22-23页
    1.4 研究内容与技术路线第23-24页
第二章 火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子序列克隆第24-48页
    2.1 试验材料第24-25页
    2.2 实验试剂及仪器设备第25页
    2.3 方法第25-31页
        2.3.1 基因组DNA提取及检测第25-26页
        2.3.2 反转录酶序列的PCR扩增第26-27页
        2.3.3 PCR产物回收第27-28页
        2.3.4 PCR产物连接与转化第28-29页
        2.3.5 质粒提取第29-30页
        2.3.6 菌落PCR及测序第30页
        2.3.7 反转录酶序列分析第30-31页
    2.4 结果与分析第31-44页
        2.4.1 火龙果基因组DNA检测第31页
        2.4.2 火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子RT序列扩增第31-34页
        2.4.3 红肉火龙果Ty3-gypsy类RT核苷酸序列分析第34-36页
        2.4.4 红肉火龙果Ty3-gypsy类RT氨基酸序列分析第36-38页
        2.4.5 白肉火龙果Ty3-gypsy类RT核苷酸序列分析第38-40页
        2.4.6 白肉火龙果Ty3-gypsy类RT氨基酸序列分析第40-43页
        2.4.7 Ty3-gypsy类反转录转座子RT的系统进化分析第43-44页
    2.5 讨论第44-48页
        2.5.1 火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子异质性第44-46页
        2.5.2 反转录酶基因的进化分析第46-48页
第三章 火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子的活性检测第48-58页
    3.1 试验材料第48-49页
    3.2 实验试剂及仪器设备第49页
    3.3 试验方法第49-52页
        3.3.1 总RNA提取及检测第49-50页
        3.3.2 cDNA的合成第50页
        3.3.3 反转录酶转录活性检测第50-51页
        3.3.4 引物设计与内参基因筛选第51-52页
        3.3.5 半定量RT-PCR扩增第52页
    3.4 结果与分析第52-55页
        3.4.1 火龙果总RNA质量检测第52-53页
        3.4.2 反转录酶转录活性检测第53页
        3.4.3 半定量RT-PCR体系建立第53-54页
        3.4.4 半定量RT-PCR检测第54-55页
    3.5 讨论第55-58页
第四章 火龙果Ty3-gypsy类反转录转座子LTR序列克隆第58-67页
    4.1 试验材料第58页
    4.2 实验试剂及仪器设备第58页
    4.3 试验方法第58-62页
        4.3.1 火龙果基因组DNA提取第59页
        4.3.2 特异性引物设计第59-60页
        4.3.3 染色体步移法分离反转录转座子LTR序列第60-62页
        4.3.4 PCR产物回收与测序第62页
        4.3.5 序列分析第62页
    4.4 结果与分析第62-64页
        4.4.1 巢式PCR扩增第62-64页
        4.4.2 反转录转座子3'端序列特征分析第64页
    4.5 讨论第64-67页
第五章 总结与展望第67-69页
    5.1 主要结果第67-68页
    5.2 后续工作展望第68-69页
参考文献第69-80页
致谢第80-81页
附录第81-82页

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