| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 ABA的结构与功能 | 第12-14页 |
| 1.2 ABA的合成、代谢与运输 | 第14-16页 |
| 1.3 ABA信号通路核心组分 | 第16-21页 |
| 1.3.1 ABA受体 | 第17-19页 |
| 1.3.1.1 ABAR/CHLH受体 | 第17-18页 |
| 1.3.1.2 GCR2受体 | 第18页 |
| 1.3.1.3 GCG1/GCG2受体 | 第18-19页 |
| 1.3.1.4 PYR/PYL/RACR受体 | 第19页 |
| 1.3.2 ABA信号转导的负调控因子 | 第19-20页 |
| 1.3.3 ABA信号转导的正调控因子 | 第20-21页 |
| 1.4 经典ABA信号通路 | 第21-22页 |
| 1.5 ABA信号通路的转录调控 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌种 | 第24页 |
| 2.1.3 质粒 | 第24页 |
| 2.1.4 生化试剂和实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.5 网络信息资源 | 第25-26页 |
| 2.1.6 实验引物 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-46页 |
| 2.2.1 植物培养 | 第28-29页 |
| 2.2.1.1 拟南芥及烟草消毒及处理 | 第28-29页 |
| 2.2.1.2 萌发率统计及表型观察 | 第29页 |
| 2.2.2 常用培养基及其它试剂的配置 | 第29-30页 |
| 2.2.3 DNA片段的扩增和载体的构建 | 第30-34页 |
| 2.2.3.1 DNA片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.3.2 平末端加A反应 | 第31页 |
| 2.2.3.3 连接克隆载体 | 第31页 |
| 2.2.3.4 酶切反应 | 第31-32页 |
| 2.2.3.5 表达载体连接 | 第32页 |
| 2.2.3.6 菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第32页 |
| 2.2.3.7 酶切鉴定阳性克隆 | 第32-33页 |
| 2.2.3.8 Gateway系统构建入门载体 | 第33页 |
| 2.2.3.9 LR反应 | 第33-34页 |
| 2.2.4 半定量RT-PCR鉴定基因表达量 | 第34页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR及其引物设计 | 第34-36页 |
| 2.2.5.1 荧光定量PCR引物设计 | 第34-35页 |
| 2.2.5.2 实时荧光定量PCR引物评估及表达量计算 | 第35页 |
| 2.2.5.3 实时荧光定量PCR步骤 | 第35-36页 |
| 2.2.6 PCR鉴定AtPSL4超表达株系 | 第36页 |
| 2.2.7 PCR鉴定psl4突变体纯合株系 | 第36-37页 |
| 2.2.8 大量法提取拟南芥基因组DNA | 第37-38页 |
| 2.2.9 小量法提取拟南芥DNA | 第38页 |
| 2.2.10 Trizol法提取拟南芥RNA | 第38页 |
| 2.2.11 RNA中去除基因组DNA和反转录 | 第38-39页 |
| 2.2.12 琼脂糖凝胶电泳DNA片段回收 | 第39-40页 |
| 2.2.13 大肠杆菌质粒提取 | 第40-41页 |
| 2.2.13.1 小量碱法 | 第40页 |
| 2.2.13.2 大量碱法提取质粒DNA | 第40-41页 |
| 2.2.14 大肠杆菌Top10感受态细胞制备与转化 | 第41-42页 |
| 2.2.14.1 Top10感受态细胞制备 | 第41-42页 |
| 2.2.14.2 转化Top10感受态细胞 | 第42页 |
| 2.2.15 农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第42-43页 |
| 2.2.15.1 GV3101感受态细胞的制备 | 第42页 |
| 2.2.15.2 转化GV3101感受态细胞 | 第42-43页 |
| 2.2.16 农杆菌侵染拟南芥 | 第43页 |
| 2.2.17 酵母双杂实验 | 第43-44页 |
| 2.2.17.1 制备酵母感受态细胞 | 第43-44页 |
| 2.2.17.2 转化酵母感受态细胞 | 第44页 |
| 2.2.17.3 验证互作 | 第44页 |
| 2.2.18 农杆菌介导的烟草叶片瞬时表达 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-62页 |
| 3.1 AtPSL4序列分析及蛋白质结构预测 | 第46-48页 |
| 3.1.1 AtPSL4启动子分析 | 第46页 |
| 3.1.2 PSL4蛋白序列分析 | 第46页 |
| 3.1.3 PSL4蛋白结构分析 | 第46-48页 |
| 3.2 PSL4蛋白的亚细胞定位 | 第48-51页 |
| 3.3 AtPSL4的表达模式分析 | 第51-53页 |
| 3.3.1 AtPSL4的组织表达模式分析 | 第51页 |
| 3.3.2 AtPSL4诱导表达模式分析 | 第51-53页 |
| 3.4 AtPSL4超表达植株的表型及功能鉴定 | 第53-58页 |
| 3.4.1 盐胁迫下AtPSL4超表达植株的表型鉴定 | 第53页 |
| 3.4.2 盐胁迫下AtPSL4超表达与WT萌发速率的快慢差异是由渗透胁迫引起的 | 第53-54页 |
| 3.4.3 AtPSL4未参与到赤霉素合成及信号转导通路中 | 第54-55页 |
| 3.4.4 AtPSL4参与到ABA信号通路中 | 第55-58页 |
| 3.5 PSL4互作蛋白的鉴定 | 第58-62页 |
| 3.5.1 PSL4不与CaMs互作 | 第58-59页 |
| 3.5.2 PSL4与SnRK2.2、SnRK2.3、SnRK2.6 互作 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第77页 |
