摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 前言 | 第11-24页 |
1.1 植物假病斑突变体研究进展 | 第11-16页 |
1.1.1 植物假病斑的发生与命名 | 第11-12页 |
1.1.2 植物假病斑基因的克隆与发生机制研究进展 | 第12-15页 |
1.1.3 植物假病斑突变体的抗病性研究 | 第15-16页 |
1.2 线粒体参与调控细胞死亡研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 线粒体参与调控动物细胞死亡发生机制 | 第16-17页 |
1.2.2 线粒体参与调控植物细胞死亡发生机制 | 第17-19页 |
1.3 DRP家族蛋白研究进展 | 第19-23页 |
1.3.1 DRP家族蛋白结构与分类 | 第19-20页 |
1.3.2 DRP家族蛋白的功能研究 | 第20-23页 |
1.4 本研究目的与意义 | 第23-24页 |
第2章 假病斑突变体DJ-LM表型鉴定 | 第24-35页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 水稻材料 | 第24页 |
2.1.2 稻瘟菌与白叶枯菌株(生理小种) | 第24页 |
2.1.3 试剂与试剂盒 | 第24页 |
2.1.4 仪器 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 水稻主要农艺性状调查 | 第25页 |
2.2.2 水稻组织化学染色 | 第25页 |
2.2.3 稻瘟菌打孔接种 | 第25-26页 |
2.2.4 白叶枯菌接种 | 第26页 |
2.2.5 Chitin与Flg22诱导水稻ROS发生检测 | 第26页 |
2.2.6 水稻中与抗病性相关基因、早衰相关基因表达分析 | 第26-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
2.3.1 假病斑突变体dj-lm的表型观察与农艺性状调查 | 第28-29页 |
2.3.2 假病斑突变体dj-lm化学组织染色分析 | 第29-30页 |
2.3.3 假病斑突变体dj-lm的稻瘟病抗性分析 | 第30页 |
2.3.4 假病斑突变体dj-lm白叶枯抗性分析 | 第30-31页 |
2.3.5 假病斑突变体dj-lm中Chitin与Flg22诱导ROS发生的检测 | 第31-32页 |
2.3.6 假病斑突变体dj-lm中与抗病性相关基因、早衰相关基因表达分析 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
第3章 假病斑突变体基因DJ-LM的图位克隆 | 第35-47页 |
3.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.1 水稻材料 | 第35页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第35页 |
3.1.3 试剂与试剂盒 | 第35页 |
3.1.4 仪器 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-39页 |
3.2.1 假病斑突变体dj-lm的分离群体构建与遗传分析 | 第35页 |
3.2.2 分子标记的连锁分析 | 第35-37页 |
3.2.3 水稻总DNA的提取 | 第37-38页 |
3.2.4 假病斑突变体基因DJ-LM精细定位与候选基因分析 | 第38页 |
3.2.5 水稻总RNA提取 | 第38页 |
3.2.6 假病斑突变体DJ-LM候选基因时空表达分析与接种稻瘟病菌后表达分析 | 第38页 |
3.2.7 Omega质料提取试剂盒小量提取质粒方法 | 第38-39页 |
3.2.8 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因互补检测 | 第39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-45页 |
3.3.1 假病斑突变体基因DJ-LM的遗传分析 | 第39-40页 |
3.3.2 假病斑突变体基因DJ-LM的精细定位 | 第40-41页 |
3.3.3 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因的确定 | 第41-43页 |
3.3.4 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因的互补检测 | 第43页 |
3.3.5 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因进化与时空表达分析 | 第43-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
第4章 假病斑突变基因DJ-LM的功能分析 | 第47-66页 |
4.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.1.1 植物材料 | 第47页 |
4.1.2 菌株与质粒 | 第47页 |
4.1.3 试剂与试剂盒 | 第47-48页 |
4.1.4 仪器 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-55页 |
4.2.1 酵母双杂交(Yeast Ywo-Hybrid)与X-gal染色 | 第48-49页 |
4.2.2 烟草细胞异源基因瞬时表达 | 第49-50页 |
4.2.3 Blue Native PAGE(BN-PAGE)分析 | 第50页 |
4.2.4 水稻原生质体的制备与异源基因瞬时表达 | 第50-51页 |
4.2.5 MBP重组蛋白的原核表达与纯化 | 第51-52页 |
4.2.6 GTP水解酶活性检测 | 第52页 |
4.2.7 水稻亚细胞结构的电子透射显微镜观察 | 第52-53页 |
4.2.8 蛋白电泳与Western杂交 | 第53页 |
4.2.9 基因克隆与载体构建 | 第53-55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-63页 |
4.3.1 OsDRP1E蛋白通过自我互作形成高级复合物 | 第55-57页 |
4.3.2 OsDRP1E互作蛋白的筛选 | 第57页 |
4.3.3 OsDRP1E蛋白GTP酶活性检测 | 第57-59页 |
4.3.4 OsDRP1E蛋白的亚细胞定位分析 | 第59-62页 |
4.3.5 假病斑突变体dj-lm亚细胞结构观察 | 第62-63页 |
4.3.6 假病斑突变体dj-lm中细胞色素c蛋白水平检测 | 第63页 |
4.4 讨论 | 第63-66页 |
第5章 全文研究结论和展望 | 第66-68页 |
5.1 研究结论 | 第66-67页 |
5.2 研究展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-82页 |
附录 | 第82-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
作者简历 | 第88-89页 |