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水稻假病斑突变体dj-lm基因的图位克隆与功能分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 前言第11-24页
    1.1 植物假病斑突变体研究进展第11-16页
        1.1.1 植物假病斑的发生与命名第11-12页
        1.1.2 植物假病斑基因的克隆与发生机制研究进展第12-15页
        1.1.3 植物假病斑突变体的抗病性研究第15-16页
    1.2 线粒体参与调控细胞死亡研究进展第16-19页
        1.2.1 线粒体参与调控动物细胞死亡发生机制第16-17页
        1.2.2 线粒体参与调控植物细胞死亡发生机制第17-19页
    1.3 DRP家族蛋白研究进展第19-23页
        1.3.1 DRP家族蛋白结构与分类第19-20页
        1.3.2 DRP家族蛋白的功能研究第20-23页
    1.4 本研究目的与意义第23-24页
第2章 假病斑突变体DJ-LM表型鉴定第24-35页
    2.1 实验材料第24-25页
        2.1.1 水稻材料第24页
        2.1.2 稻瘟菌与白叶枯菌株(生理小种)第24页
        2.1.3 试剂与试剂盒第24页
        2.1.4 仪器第24-25页
    2.2 实验方法第25-28页
        2.2.1 水稻主要农艺性状调查第25页
        2.2.2 水稻组织化学染色第25页
        2.2.3 稻瘟菌打孔接种第25-26页
        2.2.4 白叶枯菌接种第26页
        2.2.5 Chitin与Flg22诱导水稻ROS发生检测第26页
        2.2.6 水稻中与抗病性相关基因、早衰相关基因表达分析第26-28页
    2.3 结果与分析第28-33页
        2.3.1 假病斑突变体dj-lm的表型观察与农艺性状调查第28-29页
        2.3.2 假病斑突变体dj-lm化学组织染色分析第29-30页
        2.3.3 假病斑突变体dj-lm的稻瘟病抗性分析第30页
        2.3.4 假病斑突变体dj-lm白叶枯抗性分析第30-31页
        2.3.5 假病斑突变体dj-lm中Chitin与Flg22诱导ROS发生的检测第31-32页
        2.3.6 假病斑突变体dj-lm中与抗病性相关基因、早衰相关基因表达分析第32-33页
    2.4 讨论第33-35页
第3章 假病斑突变体基因DJ-LM的图位克隆第35-47页
    3.1 实验材料第35页
        3.1.1 水稻材料第35页
        3.1.2 菌株与质粒第35页
        3.1.3 试剂与试剂盒第35页
        3.1.4 仪器第35页
    3.2 实验方法第35-39页
        3.2.1 假病斑突变体dj-lm的分离群体构建与遗传分析第35页
        3.2.2 分子标记的连锁分析第35-37页
        3.2.3 水稻总DNA的提取第37-38页
        3.2.4 假病斑突变体基因DJ-LM精细定位与候选基因分析第38页
        3.2.5 水稻总RNA提取第38页
        3.2.6 假病斑突变体DJ-LM候选基因时空表达分析与接种稻瘟病菌后表达分析第38页
        3.2.7 Omega质料提取试剂盒小量提取质粒方法第38-39页
        3.2.8 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因互补检测第39页
    3.3 结果与分析第39-45页
        3.3.1 假病斑突变体基因DJ-LM的遗传分析第39-40页
        3.3.2 假病斑突变体基因DJ-LM的精细定位第40-41页
        3.3.3 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因的确定第41-43页
        3.3.4 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因的互补检测第43页
        3.3.5 假病斑突变体基因DJ-LM候选基因进化与时空表达分析第43-45页
    3.4 讨论第45-47页
第4章 假病斑突变基因DJ-LM的功能分析第47-66页
    4.1 实验材料第47-48页
        4.1.1 植物材料第47页
        4.1.2 菌株与质粒第47页
        4.1.3 试剂与试剂盒第47-48页
        4.1.4 仪器第48页
    4.2 实验方法第48-55页
        4.2.1 酵母双杂交(Yeast Ywo-Hybrid)与X-gal染色第48-49页
        4.2.2 烟草细胞异源基因瞬时表达第49-50页
        4.2.3 Blue Native PAGE(BN-PAGE)分析第50页
        4.2.4 水稻原生质体的制备与异源基因瞬时表达第50-51页
        4.2.5 MBP重组蛋白的原核表达与纯化第51-52页
        4.2.6 GTP水解酶活性检测第52页
        4.2.7 水稻亚细胞结构的电子透射显微镜观察第52-53页
        4.2.8 蛋白电泳与Western杂交第53页
        4.2.9 基因克隆与载体构建第53-55页
    4.3 结果与分析第55-63页
        4.3.1 OsDRP1E蛋白通过自我互作形成高级复合物第55-57页
        4.3.2 OsDRP1E互作蛋白的筛选第57页
        4.3.3 OsDRP1E蛋白GTP酶活性检测第57-59页
        4.3.4 OsDRP1E蛋白的亚细胞定位分析第59-62页
        4.3.5 假病斑突变体dj-lm亚细胞结构观察第62-63页
        4.3.6 假病斑突变体dj-lm中细胞色素c蛋白水平检测第63页
    4.4 讨论第63-66页
第5章 全文研究结论和展望第66-68页
    5.1 研究结论第66-67页
    5.2 研究展望第67-68页
参考文献第68-82页
附录第82-86页
致谢第86-88页
作者简历第88-89页

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