| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第5-10页 |
| 绪论 | 第10-24页 |
| 1. 聚酮化合物及聚酮合成酶的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1 聚酮类化合物 | 第10-11页 |
| 1.2 聚酮合成酶 | 第11-13页 |
| 2. 多环氧杂蒽酮类化合物的研究进展 | 第13-17页 |
| 2.1 多环氧杂蒽酮类化合物的化学结构与生物活性 | 第13-14页 |
| 2.2 多环氧杂蒽酮类化合物生物合成研究 | 第14-17页 |
| 3. 代谢组学 | 第17-20页 |
| 3.1 代谢组学在寻找新型抗生素中的应用 | 第18-19页 |
| 3.2 代谢组学在微生物共培养中的应用 | 第19-20页 |
| 4. kigamicin的生物合成研究进展 | 第20-22页 |
| 5. 本论文的研究内容与意义 | 第22-24页 |
| 第一章 orf60基因的生物信息学分析 | 第24-28页 |
| 1.1 方法 | 第24页 |
| 1.2 结果与分析 | 第24-28页 |
| 第二章 重组质粒PLL200的构建 | 第28-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2 方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 大肠杆菌质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第30-31页 |
| 2.2.2 试剂盒提取少量质粒 | 第31页 |
| 2.2.3 钙转感受态的制备与转化 | 第31-32页 |
| 2.2.4 E.coli BW25113/pIJ790电转感受态的制备与转化 | 第32页 |
| 2.2.5 采用试剂盒纯化回收DNA片段 | 第32-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-38页 |
| 2.3.1 重组质粒PLL200的构建 | 第33-38页 |
| 2.3.1.1 置换片段引物的设计与扩增 | 第33-34页 |
| 2.3.1.2 采用PCR-targeting技术构建重组质粒PLL200 | 第34-38页 |
| 第三章 突变株ML20068的构建与表达产物的检测 | 第38-46页 |
| 3.1 材料 | 第38页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第38页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 培养基 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 菌种的保藏 | 第38-39页 |
| 3.2.2 链霉菌总DNA的快速提取 | 第39页 |
| 3.2.3 异源亲本杂交介导DNA跨属转移(孢子的接合转移) | 第39-40页 |
| 3.2.4 有机溶剂萃取 | 第40页 |
| 3.2.5 高效液相色谱(HPLC)使用方法 | 第40-41页 |
| 3.2.6 表达产物的HPLC-MS检测 | 第41页 |
| 3.3 结果 | 第41-46页 |
| 3.3.1 突变株ML20068的构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 突变株ML20068表达产物的HPLC检测 | 第42-44页 |
| 3.3.3 突变株ML20068表达产物的HPLC-MS检测 | 第44页 |
| 3.3.4 ML20068与ML154 HPLC-MS检测结果的比对 | 第44-46页 |
| 第四章 突变株ML20068的发酵及产物的分离纯化 | 第46-60页 |
| 4.1 材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 菌株 | 第46页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 培养基 | 第46页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.2 方法 | 第47-51页 |
| 4.2.1 50L发酵罐液体发酵 | 第47-48页 |
| 4.2.2 非离子型大孔树脂的吸附与洗脱 | 第48页 |
| 4.2.3 有机试剂的重蒸 | 第48页 |
| 4.2.4 反相硅胶柱层析 | 第48-49页 |
| 4.2.5 制备液相的使用方法 | 第49-50页 |
| 4.2.6 核磁共振检测前样品的预处理 | 第50-51页 |
| 4.3 结果 | 第51-60页 |
| 4.3.1 突变株ML20068固体培养和液体发酵的对比 | 第51-52页 |
| 4.3.2 突变株ML20068的50L发酵罐液体发酵 | 第52页 |
| 4.3.3 非离子型大孔树脂的洗脱 | 第52-54页 |
| 4.3.4 反相硅胶柱层析 | 第54页 |
| 4.3.5 制备液相分离纯化 | 第54-56页 |
| 4.3.6 核磁共振检测结果 | 第56-58页 |
| 4.3.7 高分辨质谱检测 | 第58-60页 |
| 第五章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 5.1 总结 | 第60-61页 |
| 5.2 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 个人简历 | 第74-78页 |
